《按摩与康复医学９２０１５年第６卷第２３期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ＆Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，、ｂＩ－６Ｎｏ．２３ —２９一 ＤＡＤＳ抑制ＣＤ４４ 、ＣＤ２４一人胃癌干细胞特性的作用研究’ｌｃ 周 雨 （Ｎｉｇｈ医学高等专科学校，湖南邵阳４２２０００） ［摘要］胃癌是现阶段对人类健康威胁最大的恶性肿瘤之一，国际癌症研究机构（ＩＣＲＧ）的一项统计数据显示，２００８年胃癌 死亡病例占全球因肿瘤死亡患者的９．７％，仅次于肺癌，因此胃癌的治疗与控制是肿瘤研究的重点与难点。肿瘤干细胞（ｃａｎ． ｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ＣＳＣｓ）是肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞，被认为是肿瘤发生、复发及转移的根源，其 中ＣＤ４４ 与ＣＤ２４一具有无限增殖分化潜能，是胃癌形成与放、化疗抵抗的主要原因。本文将阐明二烯丙基二硫（ｄｉａｌｌｙｌ ｄｉｓｕ１． ｆｉｄｅ．ＤＡＤＳ）对ＣＤ４４ 与ＣＤ２４。细胞生长的抑制作用及对细胞周期的影响，为ＤＡＤＳ的抗胃癌功效提供参考依据。 ［关键词］胃癌：肿瘤干细胞（ｃｓｃｓ）：二烯丙基二硫（ＤＡＤＳ）：ＣＤ４４ ；ＣＤ２４一：抑制作用：作用机制 ［中图分类号］Ｒ７３５．２ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１ ００８—１ ８７９（２０１ ５）２３—００２９－０２ 随着对肿瘤研究的不断深入，人们发现肿瘤组 织中只有少量细胞具有自我更新和多向分化潜能， 属于干细胞疾病，手术治疗、放射治疗、化学治疗等 常规治疗手段对胃癌细胞的杀灭效果较好，但对胃 癌ＣＳＣｓ的抑制作用不足，导致胃癌可以继续生长， 可分化为特定组织中一个或多个具有特定功能的 终末细胞，即表现出干细胞特性，因此提出了ＣＳＣｓ 的概念 １。干细胞是一群未分化的具有自我更新、 导致胃癌的复发与转移，因此有效杀灭胃癌ＣＳＣｓ 是治疗胃癌的关键所在。 １ 胃癌ＣＳＣｓ ＣＤ４４ 细胞与ＣＤ２４一细胞均为胃癌与结肠癌 ＣＳＣｓ的重要标记物之一，具有很强的致瘤性， ＣＤ４４ 在多种ＣＳＣｓ中均有表达，是多种ＣＳＣｓ的表 面标记物，尤其在胃癌中是分选高纯度ＧＣＳＣｓ的主 要标记物。有报道称在体外实验中 ，将ＣＤ４４ 细胞 加入含有表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ， 多系分化潜能的细胞，肿瘤的形成、进展、转移均为 肿瘤干细胞增殖分化的结果，肿瘤难以根治的原因 也是由于肿瘤干细胞的存在。肿瘤干细胞学说为 肿瘤的研究提供了新的思路，对探讨肿瘤的生物学 特性、发生、转归及诊治等具有重大意义。目前，已 从血液肿瘤、乳腺癌、脑肿瘤、结直肠癌、卵巢癌等 多种实体肿瘤中分离出肿瘤干细胞。肿瘤的发生、 复发、转移与肿瘤干细胞有密切关系，但目前针对 ＥＧＦ）与碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｉｆｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）的无血清培养基中培养，数周 后可见“肿瘤球”形成；在体内实验中，将ＣＤ４４ 细胞 植入免疫缺陷鼠皮下或胃黏膜下数周后成瘤， ＣＤ４４ 均显示出超强的致瘤能力，但ＣＤ４４‘细胞不具 肿瘤干细胞的干预治疗尚处于研究阶段，暂无靶向 肿瘤干细胞功能的成熟方法担］。近年来，关于 胃癌的研究虽然取得了较大进展，但关于胃癌的发 病机制尚无一致结论，越来越多的研究证实胃肿瘤 ［８］符海冰冲西医结合改善脑梗死后血管性痴呆症状疗效观察［Ｊ】． 实用医药，２０１２，７（４）：１６５—１６６． 云南中医中药杂志，２０１４，３５（１０）：４８．４９． ｆ９］胡宾．中西医结合治疗脑梗死后血管性痴呆的临床疗效观察［ｊ］． 医学信息，２０１４，２７（４）：１４８—１４９． ［１７］尤志增，王正君，周少华，等．补气活血方治疗多发性梗死性痴呆 的临床研究ＩＪ］．辽宁中医杂志，２０１０，３７（１）：１０２—１０４． ［１８］张伟，王媛博，于绘丽，等．中西医结合治疗脑梗死后血管性痴呆 疗效观察［Ｊ］．中国医药导报，２０１１，８（１４）：ＩＯ１—１０２． 【ｌ９】张瑛＿中西医结合治疗脑梗死后血管性痴呆的体会叨．现代诊断 与治疗，２０１４，２５（２２）：５１０１—５１０２． ［１０］姜源，徐菲．安理申联合脑心通胶囊治疗脑梗死后血管性痴呆的 临床疗效观察［Ｊ］＿西部医学，２０１４，２６（６）：６９８—７００． ［１１］孔莉．针刺治疗脑梗死后血管性痴呆的・临床疗效观察【Ｊ】．天津中 医药．２０１３。３０（１２）：７２６．７２８． ［１２］孟凡莲，马忠金，尹广利，等．通络益脑丸防治脑梗死后血管性痴 呆６０例疗效观察［Ｊ］．河北中医，２０１３，３５（１２）：１７９４—１７９５． ［２Ｏ】周龙寿，王嘉轩．安理申联合脑心通胶囊治疗脑梗死后血管性痴 呆临床观察［Ｊ］．浙江中西医结合杂志，２０１３，２３（１２）：９８１・９８２． ［１３】商发科．地黄饮子治疗脑梗死后血管性痴呆疗效观察［Ｊ］．中国中 医急症，２０１０，ｌ９（９）：１５１３．１５２４． 收稿日期：２０１５．０５．０５ ［１４】尚桂梅．中西医结合治疗脑梗死后血管性痴呆临床观察［Ｊ］．中国 现代药物应用。２０１４，８（１８１：１７１－１７２． 『ｌ５１王慧玲．疏血通联合奥拉西坦注射液治疗脑梗死后血管性痴呆 作者简介：崔道宁（１９８９一），男，在读硕士，研究方向：传统针刺 方法及郑氏针法的临床研究与实验研究。 △通讯作者：杨晓波（１９６７．），女，硕士，副教授，研究方向：传统 针刺方法及郑氏针法的临床研究与实验研究。 的临床观察［Ｊ］．中国医药指南，２０１３，ｌ１（３２）：５１６—５１７． ［１６］杨红琴．中西医结合治疗脑梗死后血管性痴呆临床分析［Ｊ】．中国 一３０一 《按摩与康复医学￣２０１５年第６卷第２３期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ＆Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，Ｖｏ１．６Ｎｏ．２３ 备致瘤能力，说明ＣＤ４４ 细胞具有ＣＳＣｓ特性。 ＣＤ２４’主要表达于小肠隐窝下半部，动物实验发现 ＣＤ２４。在小鼠体内表达于胃壁细胞，与细胞凋亡的 调节和幽门螺杆菌感染密切相关，而且ＣＤ２４。表达 的部位有利于其他ＣＳＣｓ的生长 。 段海瑞等 运用免疫磁珠分选技术（ｍａｇｎｅｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ，ＭＡＣＳ）从胃癌细胞中分选出了ＣＤ４４ 与ＣＤ２４。细胞，并通过体外“肿瘤球”形成实验、体内 致瘤实验、化疗耐药实验及迁移侵袭实验等对其进 行“干样”特性分析，并通过ＭＴＴ法、流式细胞术、软 琼脂集落形成实验等技术方法观察ＤＡＤＳ对ＣＤ４４ 与ＣＤ２４。细胞的抑制作用。结果发现：①在“肿瘤 球”形成实验中，“肿瘤球”在无血清培养基中培养 ４～６小时后贴壁，２４小时后有细胞贴壁生长，７天后 细胞数量明显增加，未迁移出的细胞体积较小，呈 紧密分布，胞质外有长短不同突起，贴壁生长。② 在化疗耐药实验中，经５－ＦＵ与ＶＰ一１６化疗药物治疗 后，ＣＤ４４。细胞被大量杀灭，ＣＤ４４ 与ＣＤ２４一细胞数量 均明显减少，说明ＣＤ４４ 与ＣＤ２４。细胞对化疗药物 具有一定的抗药性。③在体内致瘤实验中，将２×１０ 个ＣＤ４４ 细胞分别接种在４只免疫缺陷鼠皮下或胃 黏膜下，８周后有３只小鼠体内成瘤；而将２×１０ 个 ＣＤ４４ 细胞分别接种在４只免疫缺陷鼠皮下或胃黏 膜下，８周后无１例发生成瘤；将２×１Ｏ 个ＣＤ４４ 细胞 分别接种在４只免疫缺陷鼠皮下或胃黏膜下，８周后 ５只小鼠全部成瘤；而将２×１０ 个ＣＤ４４‘细胞分别接 种在４只免疫缺陷鼠皮下或胃黏膜下，８周后无１例 发生成瘤；说明ＣＤ４４ 细胞具有更强的体内成瘤能 力。 ２ ＤＡＤＳ ＤＡＤＳ是一种从大蒜中提取出来的脂溶性成 分，是目前临床中非常具有开发潜力的抗肿瘤备选 药物。关于ＤＡＤＳ的药理机制绝大多数常规认为 主要通过抑制肿瘤细胞生长、阻滞肿瘤细胞周期进 行及诱导肿瘤细胞分化与凋亡等，从而发挥对多种 恶性肿瘤明显的抑制作用 ］。常规抗肿瘤药物的抗 肿瘤机制主要是将肿瘤细胞的周期滞在Ｇ。／Ｇ 期或 Ｇ：／Ｍ期，诱导肿瘤细胞分化成熟或凋亡，以达到抑 制肿瘤细胞生长的目的。研究显示，ＤＡＤＳ能够将 胃癌细胞周期阻滞在Ｇ：／Ｍ期，从而抑制肿瘤细胞生 长［７】ｃ ＤＡＤＳ对ＣＤ４４ 与ＣＤ２４一细胞的抑制作用如下： ＠ＣＤ４４ 与ＣＤ２４。细胞经不同浓度ＤＡＤＳ处理４８小 时后，吸光值明显下降，且吸光值与ＤＡＤＳ浓度呈 明显负相关。②将ＣＤ４４ 与ＣＤ２４一细胞分别置于软 琼脂培养基中培养，每孔１０００个，共５个复孔，分别 在培养基中加入ＤＡＤＳ ３０ｍｇ／Ｌ与ＤＡＤＳ ６０ｍｇ／Ｌ， 并于２周后计数各孔集落数目（＞５０个），结果发现未 做ＤＡＤＳ处理的培养基中其细胞集落数目为１５．６８＋ ０．４８个，ＤＡＤＳ ３０ｍｇ／Ｌ处理组为９．２１－４－０．３９个， ＤＡＤＳ ６０ｍｇ／Ｌ处理组为２．２７￣０．２１个，说明ＤＡＤＳ 能够显著抑制ＣＤ４４ 与ＣＤ２４一细胞的增殖，且抑制 效果与ＤＡＤＳ浓度呈正相关。 ３展望 近年来，ＣＳＣｓ在器官移植、细胞治疗、基因治 疗、新药筛选等方面均发挥重要作用，其研究涉及 生命科学与生物医药的所有领域，是现阶段生命科 学领域最受关注、发展最快的前沿生物技术。ＣＳＣｓ 对肿瘤的生物学行为及临床诊疗、预后预测等均具 有重要的临床意义，但现阶段对肿瘤干细胞的了解 还处于初级阶段，本文通过综述ＤＡＤＳ对ＣＤ４４ 与 ＣＤ２４ 细胞抑制作用，以期为今后的胃癌治疗提供 参考思路。 参考文献 ［１］段海瑞．ＤＡＤＳ抑制ＣＤ４４ 人胃癌细胞ＡＧＳ“干样”特性的作用 研究［Ｄ］．南华大学，２０１２． ［２］Ｍａｒｃａｔｏ Ｐ，Ｄｅａｎ ＣＡ，Ｐａｎ Ｄ，Ａｒａｓｌａｎｏｖａ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ａｌｄｅｈｙｄｅ ｄｅｈｙ— ｄｒｏｇｅｒｓａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｐｒｉｍａｒｉｌｙ ｄｕｅ ｔｏ ｉｓｏｆｏｒｍ ＡＬＤＨ１Ａ３ ａｎｄ ｉｔｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｓ ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ ｏｆ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ［Ｊ］ｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ，２０１ １，２９（１）：３２－４５． ［３］胡程．ＣＤ４４（＋）ＣＤ２４（－）胃癌ＡＧＳ细胞生长及千细胞相关基因研 究［Ｄ］．南华大学，２０１３． 【４］Ｆｒｅｚｚａ Ｃ，Ｐｏｌｌａｒｄ ＰＪ，Ｇｏｔｔｌｉｅｂ Ｅ．Ｉｎｂｏｒｎ ａｎｄ ａｃｑｕｉｒｅｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｄｅｆｅｃｔｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ（Ｂｅｄ），２０１１，８９（３）：２１３－２２０． ［５］段海瑞，凌晖．胃癌干细胞的研究进展【ＪＪ．中南医学科学杂志， ２０１２，４０（２２）：３０８－３１２． ［６］Ｂｏｒｏｖｓｋｉ Ｌ Ｄｅ Ｓｏｕｓａ Ｅ Ｍｅｌｏ Ｆ，Ｖｅｒｍｅｕｌｅｎ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｎｉｃｈｅ：ｔｈｅ ｐｌａｃｅ ｔｏ ｂｅ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，２０１ ｌ，７１（３）：６３４—６３９． ［７］Ｂｉｄｄｌｅ Ａ，Ｇａｍｍｏｎ Ｌ，Ｆａｚｉｌ Ｂ，ｅｔ ａ１．ＣＤ４４ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ－ｌｉｋｅ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄ ｂｙ ｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４４ ｖａｒｉａｎｔ ｉｓｏｆｏｒｍｓ ａｎｄ ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ＣＤ４４ ｉｓｏｆｏｒｍ ｉｎ ｔｈｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌｓ ｔｈａｔ ｈａｖｅ ｕｎｄｅｒｇｏｎｅ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ－－ｔｏ・－ｍｅｓｅｎｃｈｙ－－ ｍａｌ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰＬｏＳ，Ｏｎｅ，２０１３，８（２）：ｅ５７３１４． 收稿日期：２０１５－０９—２５ 基金项目：２０１２年邵阳市科技计划项目，编号：ｃ１２２０ 作者简介：周雨（１９８３ ），女，硕士，讲师，研究方向：胃癌的病因 及发病机制。
