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用于血浆凝固酶试验的兔血浆制备和贮存方法

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维普资讯 http://www.cqvip.com 海医学检验杂志2002年第17卷第5期Shanghai J of Med Lab Sci 2002,Vol 17.No 5 讨 论 定体外抗菌活性,临床可根据需要和药敏试验的结 果选用。治疗葡萄球菌引起的尿路感染,常用抗菌 药呋喃妥因、喹诺酮类一般有效,但应注意喹诺酮 本实验结果证实在常规工作中必须遵照NC— CLS的规定:对范围很广的J3一内酰胺类抗生素,葡 类药物治疗MRS,最初为敏感的菌株在治疗3~4 d后可变为耐药,应对分离物重复测试。 参考文献 [1] 马纪平,苏建荣,靳景图,等耐甲氧青霉素葡萄球菌 [J].中华陕学检验杂志,1996,19;186 [2] National Committee for clinical Laboratory Standards. Performance standards for Antimicrobial Disk Suscepti— 萄球菌属的细菌只要测试青霉素和苯唑西林药敏, 就可以推知一大批J3一内酰胺类抗生素的敏感性和 耐药性,不必常规测试其它青霉素类、J3一内酰胺酶 抑制剂复合物、头孢菌素类、卡巴培能类的药敏;对 于MRS,头孢菌素类和其它J3一内酰胺类抗生素在 体外药敏可能呈敏感,但临床无效,这些分离株不 应该报告其敏感结果l2 J。各临床实验室应注意遵 守此规定,否则,不仅浪费人力物力,而且可能错误 地指导用药,危及病人生命。治疗MRS感染,万 古霉素为唯一基本上无耐药株的药物,利福平具一 bility Tests ̄S].NCLLS,2000,20:I. (收稿日期:2002—02—25) (本文编辑:储怡星) 文章编号:1【)(】1 2087(2002)05 0287 02 中图分类号:R446 11 文献标识码:A 用于血浆凝固酶试验的兔血浆制备和贮存方法 梁训宏, 何 林, 卢月梅, 吴伟元 (暨南大学附属深圳市人民医院检验科,广东518020) 摘要:目的 建寺一种实用方便的兔血浆制作、贮仔方法,用于葡萄球菌血浆凝固酶实验。方法 EDTA・ K2抗凝免血浆,生理盐水4倍稀释,比较2~8。C、 20。C及里埃公司胶乳试剂作比较。结果实用方便,结果准确,值得推广。 关键词:血浆凝固酶;葡萄球菌;兔血浆 85。C的 仔效果,并同时与病人血浆、法国生物梅 54株受试菌,该法与胶乳法符合率为100%,优于病人血浆。结论 该方法 血浆凝固酶试验是葡萄球菌属鉴定中的关键 ATCC 25923,表皮葡萄球菌ATCC 12228。 二、血浆制备方法 实验,目前公认用兔血浆较好,但许多实验室用病 人血浆或血库血浆来代替,一定程度上影响了结果 市售健康食用兔以无菌操作抽血(心脏或静 脉),每毫升血液用EDTA・K2・2H2O 2 mg抗凝,离 心分离血浆(3 000 r/min,10 min)。将血浆分装于 无菌小试管,每管血浆0.1 ml+0.9%生理盐水 0.4 ml,混匀,加塞盖,贮藏于2~8。C,一20。( ,一 85。C 3种温度,每管开启后一次用毕。 三、试验 的准确性。为此,我们摸索了一种实用方便的兔血 浆制备贮存方法——稀释分装冷冻法,使用效果较 为满意,现介绍如下 材料和方法 一、菌株 临床标本分离菌54株(VITEK—AMS鉴定值 均在95%以上),其中金黄色葡萄球菌1 1株,中间 型葡萄球菌3株,表皮葡萄球菌22株,溶血葡萄球 对54株临床标本分离菌,用血液室废弃的病 人血浆以及兔血浆,同时采用玻片法及试管法做凝 固酶试验l1 。试验时3种温度贮藏的兔血浆同时 做,每次试验均以质控菌株做对照。试验结果以胶 乳法(法国生物梅里埃公司产品)为准作对比。 菌9株,耳葡萄球菌3株,腐生葡萄球菌3株,松鼠 葡萄球菌3株。质控菌株为金黄色葡萄球菌 维普资讯 http://www.cqvip.com ・288 卜海医学检验杂志2002年第1 7卷第5期Shanghai J of Med Lab Sci 2002,Vol 1 7 N()5 结 一果 未能很好解决,问题的关键在于凝固酶试验的质 控。我们认为,除此之外,许多单位图方便使用病 人血浆或血库血浆,也是影响结果的重要原因。因 为使用不合适的血浆,即使做了质控,结果也未必 准确。使用病人血浆或血库血浆,以下几个方面可 以影响实验结果:病人血浆中含有的各种抗体、药 物;某些病人血浆中纤维蛋白含量低下;各种不同 抗凝剂的影响;病人血浆存放不当,未用无菌管盛 放而污染等。此外,若操作不当,还有感染乙肝、艾 滋病毒等危险。进口胶乳试剂价格昂贵,难以普 及。而使用我们介绍的方法,1只2.5 kg的兔,至 少可得血浆30 m1,制备稀释冰冻血浆300份,足以 使用较长时间。使用时从冰箱取出即可直接应用, 无须稀释,省时方便。 、3种试剂相比较 以胶乳法结合生化反应为标准,54株细菌中, 兔血浆与胶乳法符合率为100%。病人血浆假阳 性率12.5%(5/40),假阴性率21.4%(3/14)。 二、温度的影响 20。C及一85。C贮存的兔血浆效果最好,至 第6个月时结果不变,贮存更长时间的效果有待观 察。2~8。C贮存的血浆45 d失效,表现为血浆浑 浊,有少量纤维蛋白凝块析出,若将凝块挑出,继续 存放,又有凝块逐渐析出。纤维蛋白析出增多,血 浆失效。贮存温度愈低,凝血因子活性保存时间愈 长,效果越好。 讨 论 参考文献 [1] 中华人民共和国卫生部医政一】.全国临床检验操作规 程[M].第2版.江苏:东南大学出版社,1997 478. (收稿13期:2002—02 07) (本文编辑:储怡星) 胡继红等在1999年及2000年临床微生物室 间质评总结及质量控制会议上提及:历年全国临床 微生物质评结果中血浆凝固酶试验的准确性始终 文章编号:1【l(1l 2087(2002)05 0288—04 中图分类号:R593 24 文献标识码:A 系统性红斑狼疮肾病中的实验室指标观察 张晓峰, 夏菁, 苏 晓 (上海市中医医院中心实验室,上海200071) 摘要:目的探讨相关指标的联合检测在系统性红斑狼疮(SLE)肾功能损伤诊断中的l 床价值。方法 采 用酶标、液相免疫沉淀散射比浊等方法检测sI正患者和健康者的3项早期肾功能损伤指标(TRf/Cr、mAlb/Cr 和NAG/Cr)、选择性蛋白尿指标(SPI)、24 h尿微量白蛋白(mAlb)和尿补体C3、al微球蛋白(n1M)。结果 68 例SLE患者中有12例尿蛋白定性为阴性,其肾功能早期损伤3项指标已有较高的阳性率,尿mAlb和C3的结 果和阳性率也较高;用尿mAlb定量分组时发现,<30 rag/天组的各项指标除c3外均为阴性或很低的阳性率, 说明用该指标作为肾功能早期损伤的判别较尿蛋白定性更为客观;随着肾损害进一步加重,各项检测结果和阳 性率均旱增高趋势,早期损伤中的2项肾小球指标(TRf/Cr和mAlb/Cr)在损害较重的患者巾更是非常显著地 增高(P<0.01),阳性率几乎都在100%;与22例正常组相比,有12例SI E患者的SPI呈阳性,其TRf/Cr、 mAlb/Cr和尿c3明显高于阴性组(P<0.05),阳性率也有升高。结论 l临床上应定期对SLE患者进行尿液蛋 白定性常规检查,阴性者做肾功能早期损伤3项测定以便及早发现肾损害;阳性者特别是2+以上的患者建议加 做SPI,对损伤情况作出明确判断。 关键词:系统性红斑狼疮;转铁蛋白;微最白蛋白;选择性蛋白尿指数;补体C3;n1一微球蛋白 系统性红斑狼疮(SLE)随着病程的发展可累 肾炎(LN)。因此,SLE患者肾功能损伤的及时发 及全身各器官,最常受累的是肾脏,发展成狼疮性 现和准确评价,对于治疗决策及疗效判断十分重 

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