HCR反应发夹设计
在一个典型的HCR中,采用两个发夹式寡核苷酸。一个单链DNA启动子(缩写为\"I\")可以打开其中一个发夹,暴露出一个以前未识别的单链区域,可以打开另一个发夹。该反应循环进行,导致形成有缺口的双链并发体。以前的报告显示,数百到数千个发夹构件可以被组装起来。为了将HCR与DNA交换技术相结合,这里开发了一种可逆的HCR。我们采用了两种策略,命名为间隙式HCR(gHCR)和尾部HCR(tHCR)。
对于gHCR,一个额外的单链区域被插入第一个发夹的环中,而对于tHCR,额外的区域被置于发夹的3′端。在启动子启动后,两个发夹(即H1和H2)可以组装成双链的协合体,在gHCR和tHCR的情况下分别有重复的空隙或尾巴。为了分解协合体,额外的区域(即间隙和尾巴区域)作为一个脚点与寡核苷酸垫圈(缩写为\"W\")结合,反过来,它可以与H2竞争,通过链位移与H1杂交。