维普资讯 http://www.cqvip.com Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ １ ８ Ｎｏ．５ ２００６ １２０ｍｇ各３份，按处方比例分别加人其它组份，置１０ｍＩ 量瓶 中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液适量，加 无水乙醇分别稀释成每１ｍＬ中含１６ ｇ、２０ ２４／ｚｇ的溶液， 摇匀，作为供试品溶液。按照２．２．１项下制备对照品溶液。取 上述两种溶液依法测定，结果（见表１）。 ２．６样品测定 取３批样品，依上述方法测定，３批样品 ０４１ ２１５、Ｏ Ｌｌ１０２９、Ｏ ｉｌ ００８测定结果分别为１１３．６、１１ ３．８、１１４．６ （ ）。 液，结果在２７４ｎｍ处无吸收峰。说明处方中其余组份对本测 定无干扰，因此选择２７４ｎｍ作为测定波长。 ３．２本文用紫外分光光度法测定氯霉素的含量，操作简便， 结果准确、回收率高、重现性好，并且可排除处方中其余组份 对氯霉素含量测定的影响，适用于氯霉素地塞米松搽剂中氯 霉素的质量控制。 参考文献 ［１］国家药典委员会编．中国药典２００５年版［ｓ］．二部．北京：化学工 业出版社。２００５，７７６． ３讨论 ３．１测定波长的选择 取对照品溶液在２００ｎｍ￣５００ｎｍ波 长范围内扫描，结果在２７４ｎｍ波长处有最大吸收；按处方比 例加人地塞米松和辅料，不加氯霉素，按含量测定项下配制溶 ［２］国家药典委员会编．中国药典２００５年版ＩＳ］．二部，北京：化学工 、Ｉ 出版社，２００５．８４２． 高效凝胶渗透色谱法测定双灵固本散中多糖肽的分子量及其分布 王赛贞 ，林树钱 ，林志彬 ，陈颖 （１．福州绿谷生物药业技术研究所福州３５０００２；２．北京大学医学部药理系 北京１０００８３） 摘要：目的 建立双灵固本散分子量及其分布测定的质控方法。方法 采用高效凝胶渗透色谱法（ＨＰＧＰＣ），多糖专用凝胶柱 ＴＳＫＧ３０００ＳＷｘＬ。以已知分子量右旋糖酐（Ｄｅｘｔｒａｎ）为对照品，０．２ｍｏｌ・Ｌ 硫酸钠溶液为流动相；柱温３５ ａＣ；流速０．５ｒｎｌ・ｒａｉｎ ；示差折光检测 嚣。结果 利用ＧＰＣ专用软件处理测得双灵固本散中多糖肽的重均分子量（Ｍｗ）在１２０００￣１８０００和数均分子量（Ｍｎ）在６５００￣７５００以及分子 量分布（Ｍｗ／Ｍｎ）小于３。用双灵固本散高效凝胶渗透图谱与灵芝子实体中分离出具有活性成分的多糖肽（ＧＬ—ＰＰＴ）图谱作对照，结果表明，双 灵固本散含有具有药理活性物质——灵芝多糖肽基本相同的分子量及其分布。结论鉴别图谱和产品的质量控制。 本文实验建立的方法简便、快速，可作为灵芝糖肽的特征 关键词：高效凝胶渗透色谱法；分子量及其分布；双灵固本散 中图分类号：Ｒ９３ｔ．７１；Ｒ９２７．１ 文献标识码：Ａ文章编号：１００６—３７６５（２００６）０５—００５７—０３ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｗｅｉｇｈｔ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ Ｓｕｎ ｒｅｃｏｍｅｌ（ＣＧＬＥ）ｂｙ ＨＰＧＰＣ ＷＡＮＧ Ｓａｉ—ｚｈｅｎ ，ＬＩＮ Ｓｈｕ—ｑｉａｎ ，ＬＩＮ Ｚｈｉ—ｂｉｎ ～，ＯＨＥＮ Ｙｉｎｇ （１．Ｆｕｚｈｏｕ Ｇｒｅｅｎ Ｖａｌｌｅｙ ＢｉＯＤｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａＩ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｆｕｚｈｏｕ，３５０００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，１ ０００８ ３，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴｌＶＥ Ａ ＨＰＧＰＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｔＯ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ（Ｍｗ）ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ（ＭＷＤ）ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ ｓｕｎ ｒｅｃｏｍｅ（ＣＧＬＥ—ＰＰＴ）．ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ＣＧＩ Ｅ．ＭＥＴＨＯＤＳ ＣＧＩ Ｅ—ＰＰＴ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｓｐｅｃｉａｌ，ｇｅｌ ｃｏｌｕｍｎ ｆｏｒ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（ＴＳＫＧ３０００ＳＷｘＬ）ａｎｄ ａ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ ｉｎｄｅｘ ｄｅｔｅｃｔｏｒ（Ｒ１ ｄｅｔｅｃｔｏｒ），ｕｓｉｎｇ ｄｅｘｔｒａｎ ｗｉｔｈ ｋｎｏｗｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ａｓ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ，ａｎｄ ０．２ ｍｏｌ・Ｌ－１ ｓｏｄｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ ａｓ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３５。Ｃ，ａｎｄ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０．５ ｍｌ・ｍｉｎ～．ＲＥＳＵＬＴ Ｔｈｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｄａｔａ ｗｅｒｅ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｐｅｃｉａｌ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｆｏｒ ｇｅｌ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＧＰＣ）．Ｔｈｅ Ｗｅｉｇｈｔ—ａｖｅｒａｇｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｗｅｉｇｈｔ （Ｍｗ）ａｎｄ ｔｈｅ Ｎｕｍｂｅｒ—ａｖｅｒａｇｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ（Ｍｎ）ｏｆ ＣＧ１ Ｅ—ＰＰＴ ｗａｓ １２０００￣１８０００ ａｎｄ ６５Ｏ０～７５００ 作者简介：王赛贞，女（１９４６一），高级工程师，主要从事于药用真菌化学成分的研究和灵芝产品质量控制工作。Ｅｍａｉｌ：ＷＳＺ１００＠ｓｏｈｕ．ＣＣＩＴｔ。联系 电话：Ｏ５９ｌ一８３７９９９４４ ＊绿谷集团科研基金资助项目 ・５７・ 维普资讯 http://www.cqvip.com 海峡药学２０Ｏ６年第１８卷第５期 ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ Ｍｗ／Ｍｎ（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）ｂｅｉｎｇ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ３．Ｔｈｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ＣＧＬＥ—ＰＰＴ ａｎｄ ｔｈａｔ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄ＇ｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｇａｎｏｄｅｒｍａ Ｚｗｉｄｕｍ ｆｒｕｉｔ ｂｏｄｙ（ＧＬ～ＰＰＴ）．ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＣＧＬＥ ｈａＳ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｗｈｉｃｈ ｈａｖｅ ａｌｍｏｓｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ Ｍｗ ａｎｄ ＭＷＤ ａｓ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ＧＬ—ＰＰＴ． ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ ａｎｄ ｒａｐｉｄ．Ｉｔ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｆｏｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇａｎｏｄｅｒｍａ ｌｕｃｉｄｕｍ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ ＣａＩｌ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ＣＧＩ Ｅ． ＫＥＹ Ｗ０ＲＤＳ：ＨＰＧＰＣ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ；Ｓｕｎ ｒｅｃｏｍｅ 双灵固本散由灵芝子实体提取物和孢子制成的散剂。它 具有免疫调节，抗肿瘤和抗氧化等药理作用“ 。多糖肽是灵芝 主要活性成分之一，常用多糖的定量分析方法多因辅料干扰 等原因，影响测定结果准确度。本文拟定多糖肽的重均分子 量、数均分子量和分子量分布作为质控指标。多糖的分子量呈 多分散性特点，需要用统计方法表征其平均分子量和分子量 分布 。 。文中用高效凝胶渗透色谱（ＨＰＧＰＣ）法对灵芝和双 灵固本散的指纹图谱进行研究。除了建立鉴别双灵固本散产 品的指纹图谱分析方法外．还以灵芝子实体中分离出具有活 性成分的多糖肽（ＧＬ—ＰＰＴ）图谱作对照．以标示双灵固本散 药理活性物质多糖肽的重均分子量、数均分子量及其分子量 分布 从多糖肽分子量角度来解析该产品的有效性。本文建立 的ＨＰＧＰＣ法．具有简便、快速和重现性好的特点，为该产品 质控方法提供科学依据。 １仪器与试药 １．１仪器Ｗａｔｅｒｓ２６９５型高效液相色谱仪；ｗａｎｔｅｒｓ２４１０示 差折光检测器；Ｗａｔｅｒｓ专用工作站。ＫＱ一３００ＤＥ数控超声波 清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。 １．２试剂已知分子量右旋糖酐（Ｄｅｘｔｒａｎ）对照品，由中国 药品生物制品检定所提供。对照品的已知分子量为２５００、 ４６００、７１００、１００００和２１４０Ｏ。灵芝多糖肽ＧＬ—ＰＰＴ由我所实 验室制备。ＤＥＡＥ—Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ为ｗｈａｔｍａｎ产品，Ｂｉｏ—Ｇｅｌ Ｐ一 １０ Ｇｅｌ为上海伯乐生命医药产品进口分装。纯水用Ｍｉｌｉｐｏｒｅ— Ｑ超纯水系统制得。双灵固本散由西安绿谷制药有限公司提 供。 ２实验方法 ２．１ 色谱条件 采用多糖专用凝胶柱ＴＳＫＧ３０００ＳＷｘ ，理 论塔板数以葡萄糖峰计算为１０２６０，葡萄糖保留时问为２０． ３７ｒａｉｎ；柱温３５℃；以０．２ｍｏｌ・Ｌ－１硫酸钠溶液为流动相；进样 量５Ｏ Ｌ；流速０．５ｍｌ・ｍｉｎ一。用ＧＰＣ凝胶色谱软件（药典 版）处理。 ２．２对照品溶液 取右旋糖酐标准分子量系列对照品各 １０ｍｇ，分别溶于２ｍＬ流动相，吸取５Ｏ Ｌ供ＨＰＬＣ检测。 ２．３供试品溶液 精确称取经均匀混合处理的双灵固本散 １ｇ，加水少许搅匀，移人ｌＯＯｍＬ容量瓶中，６Ｏ＿Ｃ超声溶解 １０ｍｉｎ，冷却加水至刻度，摇匀，过滤。精确量取４ｍＬ滤液，加 １２ｍＬ无水乙醇搅匀，１００００ｒｐｍ离心１０ｍｉｎ，弃上清液，沉淀 用流动相溶解至１．５ｍＩ ，０．４５，ｕｍ柱头滤器滤过，取５０ｔ￣ｌ滤液 供ＨＩ ＬＣ检测。 ２．４ ＧＬ—ＰＰＴ的分离纯化１ ＧＩ －－ｐｐ水溶液，进行乙醇 分级沉淀。收集３３ 乙醇沉淀物，即得ＧＬ—ＰＰ一１多糖肽。 ・５８・ 用ＤＥＡＥ—Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ和Ｂｉｏ—Ｇｅｌ Ｐ一１０柱色谱分离，先后用 ｐＨ５．６，０．２ｔｏｏｌ・Ｌ 醋酸缓冲液一ＮａＣＬ（０．１、０．３ｍｏｌ・ Ｌ ）依次洗脱，收集０．２ｍｏｌ・Ｌ－１醋酸缓冲液～０．３ｍｏｌ・Ｌ ＮａＣＬ组分的洗脱液。经透析醇沉，即得ＧＬ—ＰＰＴ。用ＧＬ— ＰＰＴ１０ｍｇ溶于流动相中．０．４５ｂｍ￣柱头滤器滤过，取５Ｏ Ｌ供 ＨＰＩ Ｃ进样分析。 ３结果 ３．１标准曲线的建立 取右旋糖酐系列对照品溶液．分别在 ＨＰＬＣ上进样。记录洗脱峰保留时间．由ＧＰＣ软件绘制标准 曲线。以标准分子量的对数值为纵坐标，以相应色谱峰的保留 时间为横坐标，进行线性回归。得回归方程：ｌｏｇ（Ｍ）一８．９５９２ ０．３３１０Ｔ．ｒ一０．９９６３。 ３．２精密度试验 取对照品溶液（分子量为７１００）及双灵固 本散（批号：０４０７０１）重复进样５次．每次进样５Ｏ Ｌ，按上述条 件测定．ＧＰＣ软件自动计算重均分子量、数均分子量和分子 量分布。对照品重均分子量和数均分子量的ＲＳＤ分别为０． ７６ 和０．３８ 。双灵固本散（批号为０４０７０１）的重均分子量和 数均分子量的ＲＳＤ分别为２．３４．％和２．２５ 。 ３．３重现性试验取双灵固本散（批号０４０４０３）５份，按２．３ 项下述及方法制备供试液 并按上述色谱条件测定，自动计算 重均分子量和数均分子量 其ＲＳＤ分别为１．１７ 和１．７６ 。 ３．４稳定性试验取供试品溶液（０４０４０３批）分别放置０，１， ２，６，９ｈ，精密进样５Ｏ Ｌ，按上述色谱条件测定，自动计算重均 分子量和数均分子量，其ＲＳＤ分别为１．４３ 和１．９９ 。 ３．５双灵固本散中多糖肽重均分子量、数均分子量和分子量 分布的测定 根据ＧＰＣ标准曲线及供试品保留时间，采用 ＧＰＣ软件汁算，检测５批样品重均分子量、数均分子量和分 子量分布见表。双灵固本散指纹图（见图２）。说明双灵固本散 与灵芝多糖肽ＧＬ—ＰＰ＇Ｉ、图谱特征一致。 表 ５批双灵固本散的重均分子量、数均分子量和分子量分布 卅 重均分子量 数均分子量 分子量分布 １３９５６ ６６１０ ２．１１ ｌ７２０２ ７０１０ ２．４５ １６７３３ ６９２３ ２．４２ １３Ｏ１４ ６９３３ １．８８ １２４９５ ６８５７ １．８２ ３．６ 灵芝多糖肽ＧＬ～ＰＰＴ的重均分子量、数均分子量和分 子量分布的测定 用灵：芝子实体中分离出ＧＬ—ＰＰＴ具有活 性物质多糖肽（见图１），检测其重均分子量、数均分子量和分 子培分布分别为１０５９３、５１ ６３和２．０５。检测结果表明ＧＬ— ＰＰＴ的特征鉴别图谱与双灵固本散的结果一致。 维普资讯 http://www.cqvip.com Ｓｔｒａｉｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｖｏｌ １８ Ｎｏ．５ ２００６ 验均显较好的重现性、稳定性和精密度，各参数的ＲＳＤ均小 于３％。说明本检测方法稳定可行。 ４．３经检测ＧＬ—ＰＰＴ和双灵固本散ＨＰＧＰＣ图谱基本相 同。ＧＬ—ＰＰＴ主峰保留时间为ｌ５．５４ ，而双灵固本散在ｌ５． ６２ ～１５．７０ 之间．说明ＧＬ—ＰＰＴ保留时间和双灵固本散保 留时间一致。ＧＬ－－ＰＰＴ系从灵芝子实体中提取出具有免疫调 节，抗肿瘤和抗氧化等药理作用的活性组分．说明双灵固本散 １１．２０ ｔ６．７９ ２２．３９（ ｎ１ 图１灵芝多糖肽ＧＬ ＰＰＴ凝胶渗透色谱图 含有多糖肽药理活性物质，达到用活性成分来鉴别产品质量 的目的。 ４．４ ＧＬ—ＰＰＴ和双灵固本散图谱显示３个峰。第一峰为多 糖峰（将另文报道）；第二峰为多糖肽峰（经检测多糖为４２． ９３ ；肽４３．５５ ）；第三峰为小分子杂质 ＧＬ—ＰＰＴ作为鉴 别用对照品纯度达８５％，符合相关规定。 ４．５本文建立的ＨＰＧＰＣ法，具有简便、快速和重现性好的 特点，可作为糖肽类药物鉴别手段。 ｌ１、２０ ｌ５．７９ ２２．３９ 图２双灵固本散凝胶渗透色谱图 参考文献 ［１］Ｑｉ—Ｚｈｅｎ Ｃａｏ，Ｚｈｉ—ｂｉｎ Ｌｉａ Ａｎｔｉｒｔｕｍｏｒ ａｎｄ ａｎｔｉ—ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｇａｎｏｄｅｒｍａ ｌｕｃｉｄｕｍ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｐｅｐｔｉｄｅ［Ｊ］、Ａｃｔａ ４讨论 ４．１色谱条件的选择：参照中国药典２０００年版二部附录Ｖ ｐｈａｒｍａｃｏｌ ｓｉｎ ２００４ Ｊｕｒａ、２５（６）．８３３～８３８． Ｈ规定“ ，采用与其相匹配的多糖专用柱，柱温、流动相、流速 和检测器。我们也曾比较水和不同浓度硫酸钠溶液（Ｏ．１、０．２ 和０．３ｍｏｌ・Ｌ ）为流动相的色谱结果。根据样品的溶解度、 出锋时间、峰形以及药典规定，最后选用０．２ｍｏｌ・Ｌ 硫酸钠 为流动相。 ［２３于世林．高效液相色谱方法及应用．（第二版）［Ｍ３．北京：化学工 业出版社．２００５．１５６． （３３罗立新，周少奇，姚汝华．灵芝多糖的结构分析［Ｊ］．分析实验室． １９８８．１７（４）：１７～２Ｏ． （４３国家药典委员会．多糖的分子量与分子量分布测定法、中华人民 共和国药典［ｓ］．二部，北京：化学工业出版社．２０００．附录３９． ４．２检测５批双灵固本散中多糖肽的重均分子量、数均分子 量和分子量分布结果（见表１），经方法学考察结果表明本试 固定化 一淀粉酶的研究 陈莉敏，李柱来，王津（福建医科大学药物化学系福州３５０００４） 摘要： 以壳聚糖为载体，戊二醛为交联荆，将ａ一淀粉酶固定。结果表明固定化酶与原酶均有两个最适ｐＨ值（５．０．６ ５）；固定化酶在７０℃仍有较 高热稳定性，而原酶活力明显下降；固定化酶的Ｋ’ｍ一０．６２×１０ ｍｇ・ｍＬ一 ，原酶Ｋｍ＝１．１２×１０一 ｍｇ・ｍＬ 。 关键词：壳聚糖；ａ一淀粉酶；固定化 中图分类号：Ｒ９６３文献标识码：Ａ文章编号：１００６—３７６５（２００６）０５—００５９－０３ Ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅ Ａ—ａｍｙｌａｓｅ ＣＨＥＮ Ｌｉ—ｍｉｎｇ，ＬＩ Ｚｈｕ—ｌａｉ，ＷＡＮＧ Ｊｉｎ（Ｆａｃｕｌｔｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｆｕｊｉａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｓｉｔｙ，Ｆｕｊｉａｎ，３５０００４，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ： Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，ｕｓｅｓ ｏｆ ｃｈｉｔｏｓａｎ ａｓ ａ ｓｕｐｐｏｒｔｅｒ，ｇｌｕｔａｒａｌｄｅｈｙｄｅ ａｓ ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｔｅｒｃｏｎｎｅｃｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔ．ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ—ａｍｙｌａｓｅ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ ｏｎ ｃｈｉｔｏｓａｎ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｓｏｍｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ｏｆ ｏｒｉｇｉｎａｌ ａ— ａｍｙｌａｓｅ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｔｌｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ：（１）Ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｐＨ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍｏｂｌｉｚｅｄ ａ—ａｍｙｌａｓｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎａｌ ａ—ａｍｙｌａｓｅ ｗｅｒｅ ｂａｓｉｃａｌｌｙ ｔｈｅ ｓａｍｅ，ｂｅｉｎｇ ５ ａｎｄ ６．５ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．（２）Ｈｅａｔ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ ａ— ａｍｙｌａｓｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｏｒｉｇｉｎａｌ ａ—ａｍｙｌａｓｅ．Ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ 作者简介：陈莉敏，女（１９７０．３一）。毕业于华东理工大学本科 职称：讲师。从事药物化学专业。联系电话：０５９１～８３５６９６３６ ・５９・
