攮 分析检测 试论食品之中大肠杆菌O157:H7检测 邓龙 (广东食品药品职业学院广东广州510520) 摘要:大肠杆菌的控制是我国控制食品安全的主要指标之一。食物中O157:H7大肠杆菌超标将会导致食用者身体出现 异常,严重危害身体健康。本文通过对大肠杆菌O157:H7的危害进行分析,并对食物中的大肠杆菌O157:H7检测方法进行分析, 以供参考。 关键词:O157 H7食品安全大肠杆菌检测危害 中图分类号:TS207.4 文献标识码:A 文章编号:1672.5336(2014)12-0043—01 1大肠杆菌O157:H7来源与危害 菌进行集合。 德国在2011年爆发的大肠杆菌感染病例累计达到 3食品之中大肠杆菌O157:H7检测方法 3901例,甚至已经造成47人死亡。那么大肠杆菌的来源 3.1细菌分离法 渠道主要有哪些昵?在迈阿密第八季05中有一个女孩 目前使用频率较多的是山梨醇麦康凯琼脂培养其 因为受到大肠杆菌中毒导致死亡,经过调查发现大肠 来对菌株实行分离与筛选,大肠杆菌O1 57:H7在一般 杆菌是来源于养牛场的粪便,粪便对周围的水源造成 正常的条件是不能发酵山梨醇的,在琼脂上只能呈现 了污染,而死者食用的蔬菜就是通过这些污染了的水 出灰色菌落,但其他的菌则会出现红色。根据头孢克 来进行灌溉的,在未完全清除蔬菜表面的大肠杆菌污 肟抑制变形菌,60%的山梨醇阴性的和大肠杆NiO157:H7 染物前,就进行食用,才造成了严重的后果。… 发酵鼠李糖特性制备了新的培养基,从而提高了分离 对于大肠杆菌O157:H7的病菌来源则一般认为是 敏感性。【 1 感染这种病菌的人或动物粪便对食品造成污染,而这 3.2血清学检测法 些食物进人到饮食链中,有可能会导致相关食品制品 通过分离培养之后,大肠杆菌O1 57:H7需要进一 或相关饮品都有可能会载有这种病菌。病人在感染后 步进行血清学的实验与鉴定,目前有玻片凝集试验与 将会出现血样粪便、腹泻症状,容易引起出血性结肠 乳胶凝集试验等。通过来讲,玻片凝集试验会出现假 炎,甚至引起并发溶血性尿素症,死亡率约在3 0%左 阴性效果,对真实性造成一定的干扰。另外实验室则 右。1996年日本大阪地区暴发O157:H7感染,造成感染 是多采用ELISA法来进行血清学检测,充分利用全菌 者数万,最终造成死亡1 2人,引起世界关注。2000年我 体、脂多糖/滋养层交叉反应抗原等检测血清中的抗 国河南省发生O157:H7感染,四个月间共有35例患者, 体水平。一般而言,人或动物通过食品进行大肠杆菌 其中死亡28人,肾衰病死率87%。 O1 57:H7感染后,会诱发搞LPS抗体,所以通过LPS的 2大肠杆菌检测方法 抗体进行检测能够直接反应出大肠杆菌O157:H7的感 目前国家在相关的大肠杆菌检测中使用的国家标 染程度。3.3免疫学检测法 准,其主要步骤有三个实验。首先是乳糖发酵试验,第 二是分享培养试验,第三是证实试验。在乳糖发酵试 在免疫学检测方法中主要包括三种具体的试验检 验中,选择三个稀释样品浓度,特定条件下观察是否 测法。首先是直接免疫荧光法。把荧光素标记到抗体 会产生气体。分享培养主要是指把产生气体的发酵管 上,通过与抗原反应来进行检测。目前已经证实可以 培养物转移到伊红蓝琼指平板之上,再在36度的环境 通过此种方法检测出O157:H7,如果想要效果更加明 中培养近24小时,对菌体的形态进行观察。最后的证实 显,可以通过预先使用漂白剂处理离心,通过此种免 试验,在平板上挑选可疑的菌落,进行梁色观察,同时 疫学检测法用时较短,一般为两个小时左右。第二种 SA试验。ELISA是 对发酵管进行观察,根据确定的管数,对MPN值进行 是酶联免疫吸附试验,以下称为ELI查询。[21免疫磁珠分离法是把特异性抗体吸附在可以 被吸附磁性珠子上,通过抗体反应把样品中的大肠杆 收稿日期:2014-05—16 一种新的免疫酶技术,可以对需要检测的抗体、抗原 ……下转第45页 作者简介:邓龙(1985一),男,汉族,广东梅州1人,研究生,助教,广东食品药品职业学院,2012年毕 业于华南农业大学,研究方向:食品科学。 中外食品工业5In口一foreign Food Industry 43 分析检测 析法,以蛋黄为例,色谱分析法首先需要分离出蛋黄 地威胁到了人类的身体健康,因此,当前人们通过利 中的磷脂,并收集各组分从而获得高清的质谱图,而 用色谱联用技术,科学地检测食品中的生物霉素,从 通过气相色谱法,我们还可检测硬脂酸、亚油酸和油 而确保食品加工过程的安全。酸等不饱和脂肪酸,由此可见,色谱分析法在对油品 质量的检测中具有重要的作用。 4色谱分析在食品添加剂检测中的应用 4.i色谱分析在检测食品甜味剂方面的应用 食物中的甜味往往来源于甜味剂,根据甜味剂的 3色谱分析在食品污染检测中的应用 3.I色谱分析在食品环境污染物质测定方面的应 营养价值,人们将其分为了2类,其一为营养型甜味 用 剂,其二为非营养型甜味剂,比如常见的糖精钠就属 食物在生产、加工和流通的不同环节中都可能受 于后者,这种人工合成的甜味剂价格相对较为实惠, 到不同的污染,根据污染物的种类,目前将食品污染 因此被广泛地应用于食品添加领域。然而,过量的甜 分为2类,其一为无机污染,包括铜、汞和铅等重金属 味剂也会影响到人类的健康,因此,利用液相色谱分 污染,其二为有机污染,包括二嗯英、多环芳烃等,目 析法就可以科学地测定果冻等食物中的甜味剂含量, 前,人们一般选择原子吸收仪来测定食品中的重金属 从而确保食品的安全。 污染,而食品中有机污染的最为常见的测定方法,则 4.2色谱分析在食品色素检测方面的应用 是高分辨色谱技术。 应用 据研究发现,人工合成色素会危害到人类的身体 3.2色谱分析在食品农药,兽药残留测定方面的 健康,因此,近年来,世界各国已经开始人工色素 的使用,而利用高效液相色谱分析法可检测食品中的 随着化学药品的过量使用,目前,食品的安全绝大 合成色素,这种方法不仅操作简单,而且重现性好。 多数是由于受到农药的影响,而利用色谱分析法可科 参考文献 学地检测食品中的农药残留量,从而确保食品的安 [1]孙宝国.食品添加剂与食品安全[A].第十五届中国国际 全。比如,人们可通过气质联用法来检测果蔬中的农 食品添加剂和配料展览会学术论文集[C]。2011. 药残留量,而通过高效液相色谱分析技术还可检测水 [2]食品安全和食品添加剂[A].第四届中国国际保健节食 果中的克百威等农药的残留量。 物营养与安全高层论坛报告汇集[C],2004. 3.3色谱分析在食品加工以及存储过程中生物霉 [3]尹洧.色谱分析技术在食品检测中的应用.农业工程, 素测定的应用 2Ol 2(08). 众所周知,食品在加工和存储过程中,其组成成分 会发生一系列的化学变化,最为常见的是产生霉素, 比如高温烘烤后的肉制品会产生杂环胺,这样就极大 上接第43页 病毒入侵。随着生物医学水平的不断提高,将会对食 进行定性检测与定量检测,而且用时也相对较短,准确 品中病毒安全问题进行深入研究,促进我国食品行业 性更高一些。目前这些技术已经开始应用于OI 57:H7 安全。 一一一的一般检测中。通过ELISA检测的试验结果基本不需 参考文献 要再使用方法进行验证。第三种是免疫磁性分离法。 [1]史秋梅,张艳英,高桂生,高光平,程淑琴。裴玉欣.河北省 在标本中含有不同种属的细菌时,在进行SMAC培养 部分地区肉、蛋食品大肠杆菌污染状况的检测[L]].河北 后,加入被O157:H7包围的磁珠,可以把其他的细菌进 科技师范学院学报,2012,04:7—11. 行隔离,从而极大提高了敏感性。 [2]张艳英,高桂生,史秋梅。高光平,刘申.动物性食品源大肠 4结语 杆菌0血清型鉴定及其K88菌毛基因检测[J].中国畜牧兽 2013。03:185—188. 本文通过对食品中的大肠杆菌来源与传播途径进 医。杨振泉,赵隽,王冉.食源性大肠杆菌在即食食品中 行分析,对于大肠杆菌的检测方法从宏观上与微观上 [3]张辉,J].江苏农业学报,201 1,05:l l22—1 l27. 进行分析,根据传播途径制定了详细的防治措施,通 的生长预测模型[过对人口食品的防范,不断提高对食品的安全意识, 同时加强体育锻炼,提高免疫力,抵抗大肠杆菌感染 中外食品工业Sino—foreiBn Food Industry 45