大肠杆菌0157：H7综述
食品质量与安全 07级2班 熊政委 222007324212112
摘要：肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 为的食源性强致病菌，本文主要阐述了大肠杆菌0157：H7的形态学特征，培养特征，生化特性，抗原特性，致病性，对外界环境的抗性，流行病学特征 ，检测流程以及控制防范措施。
关键词: 大肠杆菌0157：H7, 形态学特征, 培养特征, 生化特性, 抗原特性, 致病性,
对外界环境的抗性,, 流行病学特征, 检测流程以及控制防范措施
Abstract: Escherichia coli O157 is a Food-borne pathogen stronger. his article mainly expounds the Escherichia coli 0157: H7 morphology, biochemistry, cultivating characteristics, characteristics of pathogenic antigen and the external environment, the resistance and epidemiological characteristics, testing process and control measures.
Keywords: Escherichia coli 0157: H7, morphology, biochemistry, cultivating characteristics, characteristics, pathogenic antigen, the resistance of the external environment, the epidemiological characteristics, testing, process and control measures
前言
大肠杆菌0157：H7 是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的一个主要菌型,其致病力强,对人
类健康构成重大威胁, 肠出血性大肠杆菌是由Riley等于1982 年首次报告并确认为致病菌以来 此菌在世界范围内形成了多次暴发流行尤其是1996年日本发生的大规模暴发流行感染近万例死亡10 余例,造成严重危害#引起国际社会的广泛关注报道。[1]
一， 形态学特性
大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性两端钝圆的短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身鞭毛，能运动，无芽孢。[2]
二，培养特征
由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能生长，生长温度范围为15-46℃。：
在普通营养琼脂培养基上表现为光滑型菌落，有光泽，湿润，灰白色;最适宜
的温度为37℃。此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长缓慢。[3]
三，生化特性
EEC0157:H7除不发酵或迟缓发酵山梨醇外，其常见生化特性与大肠杆菌类
似。能发酵葡萄糖产酸产气，能分解乳糖、甘露糖、蜜二糖、阿拉伯糖；酯酶、硫化氢、脲酶、精氨酸、色氨酸、伏8普、明胶、肌醇实验均为阴性。[4]
四，抗原特性
主要由菌体O抗原、鞭毛H抗原、夹膜K抗原组成。目前共鉴定出了170种0抗原。O抗原即脂多糖抗原(lipopolysaccharide，LPS)，也称细菌内毒素(endotoxin)，主要与抗原性、致病性及对噬菌体的敏感性有关，可作用于抗原提呈细胞促使其产生多种细胞因子和炎症介质，使机体发热、腹泻、血压的降低，乃至感染性休克等多种病变。它主要由脂质部分(LipidA)、核心寡聚糖和O- 特异性多糖侧链(O-SPS)三部分构成，O- 特异性多糖侧链由重复的寡糖单位组成，位于核心多糖外侧，具有种属特异性[5]。每种抗原代表一种血清群。而K抗原最初是用细菌凝集实验鉴定的:细菌在O抗血清中不凝集而当培养基加热后出现凝集，这种菌株就被认为含有K抗原。根据K抗原的表型结构，人们发现了几种不同的分子结构(其中包括菌毛)，这些结构使科学家们考虑重新构建只含酸性多聚糖的K抗原。因此，蛋白质类的菌毛抗原就被从K抗原中分离出去，而被指定为F，0和H抗原的适当结合可以界定一个血清型[6]
五，致病性
肠出血性大肠杆菌(EHEC) O157 ∶H7的致病性体现于细菌的黏附定植和细菌毒素2个方面。粘附定植是细菌感染的第一步, 当EHEC侵入机体肠腔后，借助菌毛粘附在盲肠和结肠上皮细胞的刷状缘上并损害微绒毛，这种损害被称为\"粘附和消除\"，这与被称eaeA(E·coliA/F)的染色体基因有关. O157 ∶H7主要产生2 种毒素,分别称为志贺毒素Ⅰ ( Stx1 ) 和志贺毒素Ⅱ( Stx2)[5] 。在细菌体内, Stx2为分泌型表达, Stx1为胞内表达。2种毒素均由1个A亚单位和5个B亚单位组成,A亚单位具有细胞内毒性,能与28S rRNA作用导致蛋白质合成停止,是EHEC O157∶H7引起临床表现的病理基础; B亚单位具有细胞结合特性,能与具有特定受体(Gb3)的细胞结合,从而引导A亚单位发挥作用 。多数O157∶H7细菌产生Stx2,而且Stx2毒性强于Stx1,与溶血性尿毒综合征(HUS)及血栓形成性血小
板减少性紫癜( TTP)等严重并发症的相关性更为密切[7]
六，流行病学特征
WHO报道EHEC0157：H7感染的人群分布数据显示，10岁以下年龄的孩子发病
率最高，并且大多数病例发展为HUS。我国 1999一2000年的疫情报告数据显示，该年度发病人数达到2万多例，住院病人的病死率为88.42%。与国外报道的不同之处是，我国病例中农民占多数，重症病例以老年人居多，且儿童很少。 EHEC0157感染发病有明显的季节性，夏季和秋季是高峰季节。此外，雨季也是感染的好发季节。我国1999年和2000年在江苏、安徽两省发生的两起大规模的暴发分别是在5月到9月和3月到8月期间，高峰期都在6月，以春夏季为主。但是，在欧洲和澳洲则多发生在寒冷季节，从9月到次年4月期间，明显不同于北美洲和亚洲。[8]
EHEC0157:H7主要引起散发性的感染，但也可引起爆发流行. EHEC0157:H7 感染患者和无症状携带者可作为传染源。牛、羊、狗、鸡等动物是大肠杆菌EHEC0157:H7的天然宿主，动物作为传染源要比人类更为重要，它往往是动物来源食品污染的根源。EHEC0157:H7 患者平均排菌时间约(K 左右，但有报道指出，出血性肠炎患者平均排菌时间可达7d，长者可达13d；伴有溶血性尿毒综合症的患者排菌时间可达21d，最长可达124d，动物传染源排菌时间更长，往往长期排菌甚至终生排菌。EHEC0157:H7 主要通过食源性、水源性、接触等3条途径传播，人与人之间传播过程中，二代患者的症状往往较轻，出现出血性肠炎的比例较低，常常只出现非血性腹泻。人类大多易感，儿童和老年人容易发病且症状往往较重，易出现严重并发症。
七，对外界环境的抗性
此菌耐酸不耐热，在PH 2.5 或3.0 温度37℃时，能耐受5h 而不失去生存力，加热到75℃ 1min即被杀死，但能在冰箱内长期生存，对含氯消毒剂十分敏感，在有效氯含量0.4ppm 以上的水体中难以存活。[9]
八，检测流程
目前对肠出血性大肠杆菌( Enterohemorrhagic E. coli ,EHEC) 的检测方法包括生化反应、血清学方法、DNA 探针技术、PCR 技术、SLT毒素检测等。
生化反应及菌株的分离
根据EHEC0157：H7 均为山梨醇发酵阴性或迟缓发酵阳性的特性，March 和Farmer设计的山梨醇麦康凯琼脂(SMAC)培养基的H7 抗血清U山梨醇发酵培养基具有经济、简便、快速且结果可靠的优点，可作为EHEC0157:H7的常规分离培养基，待培养出菌株后，再做血清学鉴定，缺点是不能发现非0157:H7血清型的出血性大肠杆菌，此外，一些0157:H7( 大肠杆菌菌株可发生变异，变成发酵山梨醇的菌株
免疫学检测
主要是检查菌体抗原0157和鞭发抗原H7,常见的有乳胶凝集试验、酶标免疫吸附技术(ELISAS)、被动血凝试验(PHC)、免疫荧光法(IFA)、免疫磁球法、酶免疫荧光法等，市场上已有诊断试剂合可供选择，但特异性及灵敏度均有待提高。
分子生物学检测
包括DNA探针技术和聚合酶链反应(PCR)技术。基因探针主要有针对EHEC毒性质
粒,VT-1 , VT-2和eae基因探
针。DNA探针是我国预防医学科学院和美国马利兰大学医学院菌苗发展中心共同发展的，已被国际公认，并在世界上多
数试验室使用，成为鉴定EHEC菌株的关键指标，敏感性和特异性可达99% 以上 .PCR 技术方面，由我国预防医学科学院徐建国等与美国的FDA 的R·Hall 博士共同协作的， 以EHEC 溶血素AB（HlyAB）基因序列为基础的PCR 检测方法具有敏感、快速、特异的特点，3~4h左右即可出试验结果。此外国外还有一些PCR 方法，如检测SLT1、SLT2等，特异性较差，需结合其他试验资料来综合判断。
血清中抗体的检测
在EHEC0157:H7的感染中，EHEC脂多糖(LPS)能进入血流诱导机体产生抗LPS 抗体，LPS 的 IgG 和IgM都为近期
感染的指征，少数患者尚可测出抗VT-1 和VT-2的抗体，这些均有助于早期临床诊断。
毒素的检测：
检测患者粪便SLT的存在和血清中SLT抗体的方法。该方法需细胞培养的条件和技术，费时、费力、特异性不高SLT[10]。
九，控制防范措施
预防感染需要在食品链的所有阶段采取控制措施，从农场的农业生产到加工、制造以及在商业机构和家庭环境中对食品的制作。国家级开展的风险评估已指出，通过各种减少绞碎牛肉风险的策略（例如筛检屠宰前动物以减少将大量病菌带入屠宰场）可减少病例的数量。良好的卫生屠宰规范能够减少粪便对屠体的污染，但是不能保证制品不带有出血性大肠杆菌。向屠宰厂工人和参与生肉生产的人进行食品处理卫生教育对于将微生物污染降低到最低水平至关重要。同样，预防牧场原料奶的污染实际上并不可能，但是应对牧场工人进行良好卫生规范原则方面的教育，以便将污染降低到最低水平。消灭食品中的出血性大肠杆菌的唯一有效方法是进行杀菌处理，例如加热（如烹煮或加热杀菌）或照射[11]. 主要措施有：（1）加强食品、饮水和地表水体的监督管理，严把\"病从口入关\"。（2）管好传染源，确诊的EHEC0157:H7， 感染患者应进行隔离， 在解除隔离前应进行粪便EHEC0157:H7检查，连续3次阴性方可解除隔离。（3）提高医务人员对该病的认识，对公众进行预防知识的教育。（4）养成良好的饮食、卫生习惯（5）卫生部门应该高度重视此问题，个人因该避免食用烹调不足的牛肉等肉类食品，尽量不喝生牛奶，不吃被污染的食品及变质的食品，少吃生冷食品[12]
参考文献：（1）苏子林 李伯林 吴中发 吴皖卿.从奶牛粪便中检出肠出血性大肠杆菌0157:H7. 江西医学检验的实验报告.2004-2(22):47-48
(2)
(3)
(4) 丁红雷 毛旭虎 王豪举 邹全明. 肠出血性大肠杆菌O157 的实验室分离与鉴定方法. 卫生研究. 2007-2(36) 242-244
(5) 宋宏新 ，刘晓阳 ，程 军 ，李书丰. 特异性抗肠出血性大肠杆菌O157:H7
内毒素鸡卵黄抗体的制备. 食品科学. 2007-28- 01:1-167
(6)
(7) 马 颖,毛旭虎,邹全明,张卫军. 肠出血性大肠杆菌O157∶H7志贺样毒素Ⅱ毒素亚单位Stx2A的表达与纯化. 第三军医大学学报.2006-8(15)第:1582-1584
(8) 丁益强.肠出血性大肠杆菌0157:H7志贺样毒素ZB亚基的表达南方医科大学2005级硕士学位论文.2008-5:3-4
(9)
（10）李达平 张志诚 陈家 . 出血性大肠杆菌0157:H7感染研究现状.江西医药.2001-36(4):315-317
(11)
（12）毛q
