中国科技期刊数据库医药 中药半枝莲化学有效成分的提取与含量鉴定探析 张征刘长明薛冰… 承德市食品药品检验检测中心 河北承德０６７０００ 摘要：目的分析研究中药半枝莲的化学有效成分提取方法和含量鉴定方法。方法采用溶剂法提取半枝莲中的总黄酮和总多 糖，用紫外分光光度法对这两种有效成分进行含量鉴定。结果本次试验中总黄酮的平均提取率为１２．１３％，平均总黄酮含量 为１３．３％。总多糖平均提取率为１０．５７％，平均总多糖含量为５４．８３％。结论采用这两种方法提取半枝莲有效成分并鉴定其含 量具有良好的效果，且操作简单方便，提取率较高，值得临床研究采用。 关键词：中药半枝莲：有效成分：提取：含量鉴定 １材料 药品：药材为河南原产半枝莲，唇形科黄芩属半枝莲的 干燥全草。 试剂：芦丁对照品（中国食品药品检定研究院），分析 纯试剂（天津贝斯医药科技有限公司），无水葡萄糖对照品 （上海源叶生物科技有限公司）。 仪器：ＴＵ一１９５０紫外可见分光光度计（北京普析通用仪 器有限责任公司）。 ２方法 ２．１半枝莲中总黄酮的提取和含量鉴定 ２．１．１总黄酮的提取 将干燥的半枝莲切断粉碎后取５０ｇ，加入２００ｍｌ剂量７５％ 乙醇，保持４Ｏ℃浸泡３ｈ，１５ｍｉｎ搅拌一次。３ｈ后将溶液过 滤，保留滤液，将过滤后残渣加ｌＯＯｍｌ剂量７０％乙醇侵泡， 浸泡两次后将滤液合并，然后浓缩并蒸至稠膏状，再放入真 空干燥箱内烘干即可。按此步骤提取三批半枝莲干粉。 ２．１．２总黄酮含量鉴定 样品溶液制备：精密称取上述提取物１５０ｍｇ，置于５０ｍｌ 量瓶中，加入适量７０％乙醇直至干粉完全溶解，再继续加乙 醇稀释至５０ｍｌ，即为样品溶液。 对照品溶液制备：精密称取芦丁对照品２０ｍｇ，置于５０ｍｌ 量瓶中，加入适量７Ｏ％乙醇直至芦丁完全溶解，再继续加入 乙醇稀释至５０ｍｌ，摇匀后作为对照品溶液，溶液中芦丁浓度 为０．４２０８ｍｇ／ｍｌ。 标准曲线制备：精密吸取芦丁对照品溶液０．２ｍｌ、０．４ｍｌ、 ０．６ｍｌ、０．８ｍｌ、１．Ｏｍｌ、１．２ｍｌ、１．５ｍｌ，将其分别置于ｌＯｍｌ 量瓶中，在量瓶中分别加入１０％铝和５％亚钠各 ０．３ｍｌ、４％氢氧化钠４ｍｌ，将所有量瓶放置８ｍｉｎ。按照分光 光度法在５１０ｎｍ的波长处测定吸光度，以芦丁对照品溶液浓 度为横坐标ｘ，以吸光度为纵坐标Ｙ，绘制出标准曲线图。 经过线性回归处理得出了回归方程Ｙ＝Ｏ．Ｏ１１７Ｘ一０．００８，相关 系数ｒ＝Ｏ．９９６，吸光度与对照品溶液的浓度在８．４５６￣６１：１４７ ｇ／ｍｌ范围内有良好的线性关系。 含量测定：精密吸取制备好的样品溶液０．５ｍｌ，按照上 述标准曲线的制备方法，在波长４９０ｎｍ处测定吸光度，将获 得的吸光度根据标准曲线计算出溶液中总黄酮浓度，得出样 品溶液中的总黄酮含量。 ２．２．３半枝莲总多糖的提取和含量鉴定 ２．２．４总多糖的提取 将干燥半枝莲切断粉碎后取ｌＯＯｇ，加水煎煮３次，每次 煎煮２０ｍｉｎ，第一次加水量为２００ｍｌ，后两次加水量为１００Ｍ。 将３次煎煮后的煎液合并，并将其蒸发浓缩，然后蒸至稠膏 状。加入７５％乙醇后置于容器中放置一夜，第二日进行过滤 后取其沉淀物，加入石油醚和乙醚各２５０ｍｌ进行洗涤，挥干 溶剂后进行真空干燥，即可得半枝莲多糖。依照此步骤进行 三次。 ２．２．５总多糖含量测定 样品溶液制备：精密称取上述多糖提取物６０ｍｇ，置于 ２５０ｍｌ量瓶中，加入适量水使其完全溶解，再继续加入水稀 释至２５０ｍｌ，摇匀后即为多糖样品溶液。 对照品溶液制备：精密称取葡萄糖对照品２５．２ｍｇ，置于 ２５０ｍｌ容量瓶中，加入适量水使其完全溶解，再继续加入水 稀释至２５０ｍｌ，摇匀后作为标准葡萄糖溶液，溶液浓度为 １００．０１１ ｇ／ｍ１。 苯酚溶液制备：精密称取苯酚ｌＯＯｇ，加入碳酸氢钠０．０５ｇ 和铝片０．１ｇ，进行蒸馏分离，收集１８２℃时的蒸馏产物，并 称取７．５ｇ，加入１５０ｍｌ水使其溶解后置于容量瓶内并放置于 冰箱内。 标准曲线制备：精密吸取上述标准葡萄糖溶液０．１ｍｌ、 ０．２ｍｌ、０．４ｍｌ、０．６ｍｌ、０．８ｍｌ、１．Ｏｍ１分别置于干燥试管内， 加入水稀释至１．Ｏｍｌ，再加入制备好的苯酚溶液１．６ｍｌ，摇 匀后再加硫酸７．Ｏｍｌ，再摇匀后将试管置于１００℃水中１５ｍｉｎ 后取出，取出后立即冷却至室温。另取水ｌｍｌ进行同样操作， 设为空白对照。在波长４９０ｎｍ处测定吸光度，以标准葡萄糖 浓度为横坐标ｘ，以吸光度为纵坐标Ｙ，得出线性回归方程 为Ｙ＝Ｏ．０６９１Ｘ一０．００４，相关系数ｒ＝Ｏ．９９９５，吸光度与浓度在 １．５６～１０．６３ ｕｇ／ｍ１的范围内呈现良好的线性关系。 多糖含量测定：取样品溶液ｌｍｌ，按照上述标准曲线制 备方法在波长４９０ｎｍ处测定吸光度，根据标准曲线计算出多 糖浓度，得出半枝莲多糖含量。 ’３结果 提取三批分别获取半枝莲干粉５．７ｇ、６．１ｇ、６．４ｇ，平均 提取率为１２．１３％。这三批提取出的半枝莲干粉中总黄酮的含 量分别为１３．６％、１３．５％、１２．９％，平均总黄酮含量为１３．３％。 三次提取多糖分别为９．４ｇ、１１．５ｇ、１０．８ｇ，平均提取率 为１０．５７％。这三批半枝莲多糖提取物中多糖的平均含量分别 为５４．７％、５７．６％、５２．２％，平均总多糖含量为５４．８３％。 ４讨论 半枝莲是中医处方和中草药中的常用中药，对于阑尾 炎、肝炎、胃痛、早期肝癌、肺癌等病症具有确切的疗效。 近年来医学上对半枝莲中的化学有效成分的研究表明，半枝 莲中黄酮类化合物和多糖是与疗效密切相关的最主要成分 【２】。 目前对半枝莲的化学有效成分提取有很多种方法。溶剂 提取法是一种比较简单的方法，即根据中草药中各成分在不 同溶剂中的不同溶解度，选择合适的溶剂将有效成分从药材 中溶解出来。本次研究说明该方法具有良好的提取效果。紫 外分光光度法是一种常用的鉴定药物成分含量的方法，它的 原理是通过测定药物的有效成分在特定波长处的光吸收度， 从而对该成分进行定性定量的分析。本次研究中测定平均总 黄酮含量为１３．３％，平均总多糖含量为５４．８３％，与相关文献 研究结果相似【３】。结果表明，采用这两种方法提取半枝莲 有效成分并鉴定其含量具有良好的效果，且操作简单方便， 提取率较高，值得临床研究采用。 参考文献 ［１］何文涓，俞佳慧．中药半枝莲有效成分的提取及含量测 定［Ｊ］．科技视界，２０１ ４，（３０）：３３５－３３５。３４７． （下转第８６页） ８３ 临床医学 度，同时松弛血管平滑肌、降低血管外部的阻力并舒张外周 参考文献 ［１］冯以真．用硝苯地平缓释片联合缬沙坦片治疗高血压的 疗效观察［Ｊ］．当代医药论丛。２０１４（１４）：２２０—２２１． ［２］张念玉．缬沙坦与硝苯地平缓释片治疗原发性高血压临 床疗效观察［Ｊ］．中外医学研究。２０１４（１２）：２４—２５． ［３］张雨成．应用缬沙坦联合硝苯地平缓释片治疗原发性高 血压的疗效观察［Ｊ］．当代医药论丛，２０１４（１２）：１８４－１８５． 阻力血管，进而有效减轻心脏的后负荷。 参考本次临床观察研究，发现患者采用联合用药方法总有效 率要高于单一用药的治疗方法，而且二者之间的差异具有统 计学意义，说明联合用药的治疗方法治疗效果更好，降压显 著。 ４结语 在上述治疗过程中，并未发现患者出现较严重的不良反应， 采用缬沙坦联合硝苯地平缓释片治疗高血压的方法适合进 步推广应用。 一……………………＾，…………… ………………＾＾＾＾＾………～……＾＾ （上接第８３页） ［２］董红丽．中药半枝莲化学有效成分的提取与含量鉴定 ［Ｊ］．中国现代药物应用，２０１１．０５（１９）：７４－７５． ［３］谷焕芝．半枝莲等中药有效化学成分的分离研究［Ｄ］．聊 城大学，２０１４． ［４］毛姗婷．浅谈中药化学成分提取、分离和鉴定的方法［Ｊ］ 中外健康文摘：临床医师。２００８。（１）：１Ｏ１＿１Ｏ２． ［５］仲崇林，姜瑞芝，不详．蝮蛇注射液有效成分的化学研 究：¨．蝮蛇注射液中多胺的分离与鉴定【Ｊ］．吉林中医药。 １９８９，（４）：３７—３７． ［６］黄蘅，陈学松．韩信草药材质量标准研究［Ｊ］．中国药 业，２０１０，（１５）：２２—２３． ［７］林清英．提取分离新技术在中药制剂生产中的应用［Ｊ］． 海峡药学，２００７。（６）：１０１—１Ｏ４． ［８］孙友富，肖永庆．羌活化学成分研究ＩＩＩ羌活石油醚提 取部分化学成分的分离鉴定［Ｊ］．中国中药杂志，１９９４， （２）：９９—１００． 【９】张自丽，宋高臣．半枝莲多糖的提纯及抑瘤作用的研究 进展［Ｊ】．牡丹江医学院学报，２０１１，（６）：４４－４５． ８６
