代表性微生物菌落的识别
（一)实验目的
(1)学习不同微生物单菌落的制备方法。
(2)学习微生物菌落特征的描述。
（二）实验原理
在固体平板培养基上，单个微生物细胞或孢子生长繁殖可以形成一个具有特定形状的菌落。在一定的培养基上和一定培养条件下，微生物的菌落持征是稳定的，因此通过菌落的观察可以识别细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等几大类微生物。菌落的基本特征包括菌落形状、大小、边缘、隆起度和颜色等。
(三)实验器材
(1)活材料：覃状芽胞杆菌(Bacillus mycoides)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichieae coli)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、酿酒酵母
(Saccharomyces cerevisiae)、青霉(Penicillium sp．)、曲霉(Aspergillus sp．)、根霉(Rhizopus sp.)、木霉(Trichoderma sp．)和链霉菌(Streptomyces sp.)等。
(2)培养基；
1)细菌培养基采用牛肉膏蛋白胨培养基；
2)放线菌培养基采用淀粉培养基；
3)真菌培养基采用马铃薯葡萄糖培养基；
(3)器材：无菌平皿、接种环、无菌吸管等。
（四)实验方法
(1)制备平板：
将15-20mL熔化后冷却至50℃左右的培养基按无菌操作倒入无菌平皿中，静置待其凝固，如有冷凝水，倒置放30-37℃温箱内使之干燥．以便于单菌落的出现。
(2)接种：
1)划线法：
①取一点菌苔或一环细菌悬液，在上述无冷凝水的平板一侧边缘处反复涂抹。
②灼烧接种环，冷却后，从上述涂菌处划出直线3-4条，将接种环灼烧，从第一次划线处划线3-4条，将接种环灼烧，从第二次划线处划线3-4条。将接种环灼烧，从第三次划线处划线3-4条。划线时接种环与平板表面成30。-40。角，轻轻接触，不要使接种环划破培养基表面。
③倒置平板，于最适温度下培养l-2d，出现单菌落。
划线法有很多，可以根据不同情况选用。
2)混菌法：适合做细菌菌落和放线菌菌落。
做细菌菌落和放线菌菌落时最好采用稀释平板法，这样做的菌落形态典型。
3)点接法：做丝状真菌的菌落可采用点接法。
①制备平板，将熔化后冷却至50℃左右的培养基加入无菌平皿，凝固后备用。
②接种，用接种针从斜面菌种桃取少量真菌菌丝或孢子，轻轻点接于培养基表面，每个平板一般接种1-3处。
③倒置平板，于最适温度下培养2-3d，从点接出单菌落。
待培养一定时间后，取出培养的菌落，观察菌落的形状和大小、边缘、表面、隆起形状，透明度及培养基的颜色等(参见图1)。
图1 菌落的形态
