霉菌细胞的观察
一、实验目的
1. 观察霉菌菌丝细胞的显色结构； 2. 观察霉菌细胞壁及质壁分离现象； 3. 观察菌丝不同部位霉菌细胞形态；
4.观察霉菌细胞核形态数目及其分布特征。 二、实验材料：
1.试剂：菌丝，高浓度KCl溶液，固定液（冰乙酸，甲醇），Giema染液（Giemsa粉末，甘油，甲醇, ，PBS（磷酸二氢钾，氢氧化钠，蒸馏水，PH调至7.2），蒸馏水, 50%乙醇)） 2.器材：载玻片，盖玻片，镊子，解剖针，培养皿(8)，吸水纸，吸管，染缸(8)，光学显微镜 三、原理：
霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称，不是分类学的名词，在分类上属于真菌门的各个亚门。
霉菌细胞具1至多个细胞核。细胞壁分为三层：外层无定形的β葡聚糖（87nm)；中层是糖蛋白，蛋白质网中间填充葡聚糖（49nm)；内层是几丁质微纤维，夹杂无定形蛋白质（20nm)。
构成霉菌体的基本单位称为菌丝，呈长管状，宽度2～10微米，可不断自前端生长并分枝。在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料，称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝，可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。大量菌丝交织成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体。菌丝体常呈白色、褐色、灰色，或呈鲜艳的颜色（菌落为白色毛状的是毛霉，绿色的为青霉,黄色的为黄曲霉），有的可产生色素使基质着色。霉菌繁殖迅速，常造成食品、用具大量霉腐变质，但许多有益种类已被广泛应用，是人类实践活动中最早利用和认识的一类微生物。
霉菌菌丝一般为颜色鲜艳，且菌丝为单层细胞，故可直接用于观察其显色结构、细胞壁，染色后可观察其细胞器。 四、操作步骤： 1. 制片：
在载玻片上加一滴蒸馏水，用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先置于50%乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子，再放在载玻片上的液滴中，用解剖针小心地将菌丝分散开。（注意：挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态；加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。）在低倍镜下找到霉菌细胞，移到视野，切换至高倍镜观察。找出霉菌细胞的显色结构。并找出不同霉菌不同部位的细胞形态及细胞器的异同。 2. 质壁分离:在载玻片上滴一滴KCL溶液(0.5g/ml)，用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先置于50%乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子，再放在载玻片上的液滴中，用解剖针小心地将菌丝分散开。盖上盖玻片，镜检。
3.细胞核的观察：取备用菌丝于载玻片，滴加一滴固定液，十分钟后补加一滴固定液，盖上盖玻片，待其自然干燥后放入染缸10～15分钟【Giemsa】。，晾干，镜检。【直接在玻片上看，不要冲洗】 配制方法：
1，kcl溶液：kcl固体，蒸馏水 2，固定液：冰乙酸，甲醇，1：1
3，Giemsa染液：Giemsa粉末，甘油，甲醇,
PBS（磷酸二氢钾34g,1mol/L氢氧化钠溶175ml,蒸馏水825ml,PH7.2）
