特发性肺纤维化患者血清透明质酸、层粘连蛋白的变化及意义
目的 探讨特发性肺纤维化（IPF）患者血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）的变化及意义。 方法 选择2014年6月～2016年6月在杭州师范大学附属医院呼吸科诊治的IPF患者38例为IPF组，选择同期健康非吸烟者30例为对照组。采用放射免疫法检测IPF患者及对照组血清HA、LN的水平；并与肺功能、6 min步行试验（6MWT）、呼吸困难评分等指标进行相关分析。 结果 与对照组比较，IPF组患者血清HA、LN水平显著升高（P 0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会同意，所有研究对象均签署知情同意书。1.2方法
1.2.1 所有研究對象均行胸部HRCT检查，IPF患者经临床-影像确诊。本研究中所有IPF患者均未行外科肺活检。
1.2.2 所有研究对象均于清晨空腹抽取外周静脉血5 mL，分离血清，留标本置于-80℃冰箱保存待测。采用放射免疫法测定血清HA、LN浓度，试剂盒由上海海军医学研究所生物技术中心提供。
1.2.3 所有研究对象均采用德国耶格肺功能仪（Master Screen PFT）进行肺功能检测，观察用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼气量（FEV1）、一氧化碳弥散量（DLCO）等指标。
1.2.4 所有IPF患者均行6MWT测定。试验过程中若患者出现明显的症状，如头晕、气促等，应立即停止试验。
1.2.5 采用改良英国医学研究学会呼吸困难指数（mMRC）评估IPF患者的呼吸困难程度。mMRC评分分为0～4级。0级：仅在费力运动时出现呼吸困难；1级：平地快步行走或步行爬小坡时出现气短；2级：由于气短，平地行走时比同龄人慢或需停下来休息；3级：平地行走100 m左右或数分钟后需停下来喘气；4级：因严重呼吸困难以至于不能离开家，或在穿衣服/脱衣服时出现呼吸困难。
1.3 统计学方法
采用统计软件SPSS 16.0对数据进行分析，正态分布的计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验；计数资料以率表示，采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 IPF患者血清HA、LN水平
IPF患者血清HA、LN水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。
2.2 IPF患者血清HA、LN水平与肺功能的相关性分析
IPF患者肺功能检测结果：FVC为（65.2±17.4）%、FEV1为（61.8±15.5）%、DLCO为（57.3±19.1）%。线性相关分析显示血清HA、LN水平分别与FVC、FEV1、DLCO呈负相关（均r < 0，P < 0.05或P < 0.01）。
2.3 IPF患者血清HA、LN水平与6MWT的相关性
38例IPF患者有35例完成6MWT，6MWT平均值为（235.7±102.5）m。线性相关分析显示血清HA、LN水平均与6MWT呈负相关（r = -0.637、-0.705，P < 0.01）。
2.4 IPF患者血清HA、LN水平与mMRC呼吸困难评分的相关性
IPF患者的mMRC评分为（2.45±1.29）分。线性相关分析显示血清HA、LN水平均与mMRC评分呈正相关（r = 0.618、0.552，P < 0.05）。
3 讨论
IPF的诊断主要依赖于临床症状、肺功能检测、高分辨率CT和组织病理学等。临床-放射-病理（CRP）多学科诊断模式有助于提高IPF诊断的准确性[4-5]。King等[6]通过研究，建立起一套临床-影像-生理学评分系统来评价IPF患者的病情及生存预测。但由于该评分系统的复杂性及IPF病情本身的复杂性，了其在临床的广泛应用。
积极开展生物标志物的研究，是近年来IPF研究的热点内容之一。研究发现，血清和BALF生物学标志物，如Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6（KL-6）、表面活性蛋白A（SP-A）、表面活性蛋白D（SP-D）、趋化因子配体18（CCL18）、基质金属蛋白酶（MMP）水平对评估病情及判断预后有一定意义[7-18]。近年来，随着对肺纤维化研究的逐步深入，HA、LN在肺纤维化研究中的价值日益引起重视。
HA是一种大分子黏性糖胺聚糖，是目前研究较多的细胞外基质（ECM）成分之一。在IPF早期，肺内存在的大量的炎症、免疫效应细胞间相互作用，刺激成纤维细胞产生HA。研究发现，IPF患者BALF中HA浓度高于正常对照组[19]。动物实验中也有类似的发现。LN是一种基底膜特有的大分子非胶原糖蛋白。LN能够诱导细胞黏着、生长和分化等，能吸引、黏附肺上皮细胞、成纤维细胞和炎细胞，并刺激、促进成纤维细胞和上皮细胞合成胶原，这就决定了LN在肺纤维化中的多重作用[20]。
本研究发现，IPF患者血清HA、LN浓度升高，显著高于对照组（P < 0.05）。IPF患者血清HA、LN水平与VC、FEV1、DLCO呈负相關，与6MWT呈负相关，而与呼吸困难的严重程度显著正相关。这提示血清HA、LN水平可作为评价IPF病情严重程度、判断疗效的指标。而血清HA、LN的测定，具有简便易行、无创等优点，值得在临床，尤其是基层医院推广应用。
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