维普资讯 http://www.cqvip.com 鸡传染性支气管炎血清抗体的检测 涂勋初’，曾兴艳 重庆北碚区畜牧兽医局４００７００ｊ ２西南大学动物科技学院，重庆北碚４００７１ ５ 鸡传染性支气管炎（ＩＢ）是由 小在４０～６０日龄，随机抽取鸡的血 对照孔均值（ＰＣ２－ＮＣ２）＞０．０７５时， 冠状病毒科的禽传染性支气管炎病 液样本用于检测。 阴性对照孔所得值的均值≤０．１５０时， 毒（ＩＢＶ）引起的急性、高度接触性 （二）主要试剂 ＩＢＶ抗体检测试 测定结果才有效。试验结果计算按以 传染病。在我国，邝荣禄于１９７２年 剂盒：北京爱德士元亨生物科技有限 下公式进行： 首次报道在广东省发生鸡的ＩＢ，随 公司，批号：０６－０９２６２Ｃ，该试剂盒 后国内大部分省份都有本病发生的报 包括：传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）包 阴性对照平均值（｜Ⅳ ）：—Ａ，￣Ｌ（６５０）＋Ａ２（６５０） ＝＿道。目前流行的ＩＢ主要有吸型、肾 被板；ＩＢＶ阳性对照血清，含ＩＢＶ抗 阳性对照平均值（尸ｃ＿）＝ 型、肠型、腺胃型等几种类型，其 体（已稀释，用叠氮化钠保护）；ＩＢＶ 特征为病鸡咳嗽、喷嚏和气管发生哕 阴性对照血清，不含ＩＢＶ抗体（已稀释， ｓ／Ｐ值：壁曼 二 ＰＣｘ—ＮＣｘ 音，在雏鸡还可出现流涕，产蛋鸡产 用叠氮化钠保护）；酶标抗体，（山羊） 蛋减少和质量变劣，有的剖检可见肾 抗鸡抗体，辣根过氧化物酶（ＨＲＰＯ） 终点抗体滴度（１：５００）与Ｓ／Ｐ 肿大，有尿酸盐沉积。鸡传染性支气 结合物；样品稀释液（叠氮化钠保护）； 的关系式；Ｌｏｇｍ滴度＝１．０９（Ｌｏｇ１ｏＳ／Ｐ） 管炎可使各种年龄、各种品种的鸡感 ＴＭＢ底物；终止液。 ＋３．３６ 染，但以雏鸡发病最为严重。由于鸡 感染ＩＢ后引起的生长受阻，耗料增 二、试验方法 用于ＩＢＶ抗体的ＥＬＩＳＡ检测结 果的判定是根据样品对阳性的Ｓ／Ｐ值 加、鸡蛋产品质量下降所造成的损失 （一）血液的采集与血清分离 鸡 来决定的，即：样品的Ｓ／Ｐ值≤０．２， 通常比死亡造成的损失还大，故本病 翅下静脉采血６～７ｍｌ，４℃静置２４ 判为阴性；样品的Ｓ／Ｐ值＞０．２（滴 已逐渐成为目前危害我国养禽业的主 小时以上，离心获取血清，每份样品 度＞３９６），判为阳性。 要疫病之一，而目前控制ＩＢ的唯一 分装成２管置于－１８＂Ｃ保存。 方法只能依靠免疫接种，我国使用的 （二）ＥＬＩＳＡ检测在检测前用样 三、结果 疫苗有Ｈ１２０株、Ｈ５２株、Ｍａ５株、 品稀释液将备检血清样品作５００倍稀 从三个小型养鸡场共取得的６２ ２８／８６株、Ｍ４１株等。在养鸡生产 释，参照ＩＢＶ抗体检测试剂盒说明书 份鸡血清样本，检测出ＩＢＶ抗体阳 中由于不清楚鸡群的母源抗体等基础 进行，酶标板经全自动酶标仪６５０ｎｍ 性血清共５７份，阳性率为９１．９４％， 免疫情况，虽然对鸡场进行了ＩＢ疫 读板，记录Ａ（６５０）的０Ｄ值。 其ＥＬＩＳＡ滴度范围为４０３～７８３１， 苗的免疫，但仍然在许多养鸡场发生 （三）试验有效性与结果判定标准 ＥＬＩＳＡ滴度平均值为２７５７．６４；三个不 ＩＢ。本试验选测三个已进行ＩＢ疫苗 ＩＢＶ抗体检测ＥＬＩＳＡ试验有效性的确 同的养鸡场，ＩＢＶ抗体阳性检出率分 免疫的小型养鸡场的鸡进行ＩＢＶ血 定，是只有在阳性对照均值减去阴性 别为９０．００％（１８／２０）、９０．４８％（１９／２１） 清抗体的检测，旨在于了解养鸡场 ＩＢ的免疫状况，从而为制定可行的 表１ 三个养鸡场Ｉ ＢＭ血清抗体检测结果统计 ＩＢ免疫计划提供科学依据。 一、试验材料 （一）受检的血液样本 对我区的 三个已进行鸡传染性支气管炎疫苗免 ３ ２１ ２０ ５２８～５８９５／２３５５．１０ ９５．２４ 疫的养鸡场，杂交土种肉鸡，鸡只大 兽医导刊 己口口８年第１期，￣ｌｅｓ，ｎＪ］・Ｉｄ 维普资讯 http://www.cqvip.com 冬季许多养殖密集地区的产蛋坞 要表现为轻微的呼吸道症状，呼吸道 群容易 现产蛋下降。我们对２０００年 以来每年冬季造成产蛋下降的原因进 行了调查和统计。发现造成产蛋下降 症状可持续５～７天或更长，发病鸡 采食量轻微下降或无明显变化，个别 鸡只拉黄绿色稀粪，产蛋率下降，一 般产蛋下降２Ｏ％～４Ｏ％不等或更多， 产蛋卜降的同时出现白皮蛋、褪色蛋、 的原因主要是疾病因素，如新城疫、 禽流感、传支、脑炎、鼻炎等。其中 新城疫的发病率为最高，其次为禽流 感、传支、脑炎、鼻炎等。 根据令年的最新发病情况统计来 软皮蛋增多，一般经７～１Ｏ天降到最 低，大约经１２～１５天才缓慢回升， 一般难以恢复到原来的水平，且病程 看，除了以上疾病因素外，使 劣质 饲料导致产蛋下降的发病率正在迅速 升高。 过后出现部分假产鸡。有些鸡群发病 后，无明显的临床症状，只表现产蛋 率下降和蛋壳质量问题。解剖发病鸡 只有卵黄性的腹膜炎，卵泡变形萎缩， ２０００年－２００６年冬季 产蛋下降流行病学调查表 一、输卯管子宫部早期水肿（水肿部呈透 吸状），后期个别鸡只输卵管萎缩。 （二）禽流感 由于人们普遍对禽 流感进行了免疫，所以发生典型的病 例很少，基本可以控制典型禽流感的 发生。但在一些环境污染严重的地区 我们对国内主要蛋鸡主产区２０００ 年一２００６年’（从１Ｏ月份至来年１月份） 产蛋下降的病例综合统计分析（见表１）。 刘 昌宏 昌祥 苏 ： 强 ２００７年统计数据不完整，从最新 统计数据来看疾病因素仍然是造成产蛋 下降的主要原因，但近期由于饲料涨价 而更换劣质饲料的原因正在增加。 或免疫不确实的鸡场也有发生。禽流 感现在主要流行弱毒（Ｈ９Ｎ２）和强毒 （Ｈ５Ｎ１）两种，现简单介绍其发病特点。 弱毒禽流感（Ｈ９Ｎ２）：①典型：多 病鸡肿头、肿脸、鸡冠发紫，拉黄绿 色稀粪，产蛋率下降３０％～９０％不等， 蛋壳发白，软皮蛋、畸形蛋增多。解 剖死鸡腺胃乳头化脓出血、肠道出血、 二、常见疾病的临床症状 发生在未免疫或免疫不确实的鸡场， 一青岛易邦生物工程有限公司．山东青岛 及病理变化 主要发生在产蛋鸡群，发病鸡群采食 李彬。栾栋祖。刘东。王群义。刘平。刘丰波 （一）鸡新城疫 该病仍是发病和 危害较为严重的一种传染病。鸡群丰 饮水下降严重，大群精神不振，张口 伸颈喘、呼噜、咳嗽、甩鼻，部分发 脂肪充血、输卵管有白色脓性分泌物， 气管充血、出血。②非典型：发生于 冬季蛋鸡产蛋下降的成因分析 和９５．２４％（２０／２１），ＥＬＩＳＡ滴度范 围分别为４１４～６８９６、４０３～７８３１和 活油乳剂疫苗。Ｈ１２０毒力弱，对雏鸡 安全；Ｈ５２毒力强，多用于８～１０周 防制肾型传染性支气管炎的效果极差 或无效。除此之外，在没有弱毒疫苗 初免的情况下，采用鸡传染性支气管 炎灭活疫苗的保护性效果也不佳。 本试验应用ＥＬＩＳＡ对三个小型养 鸡场进行了抽样检测，共检测６２份血 清样本，ＩＢＶ抗体阳性血清５７份，阳 ５２８～５８９５，ＥＬＩＳＡ滴度平均值分别为 ３２１９．３９、２７４３．１７和２３５５．１０，见表１。 龄鸡重复免疫；灭活油乳剂疫苗各种 日龄均可使用。因此，应通过检测养 鸡场鸡群的母源抗体等基础免疫情况， 四、结果分析 由于在一些养鸡场，养殖者并不 清楚鸡群的母源抗体等基础免疫情况， 制定合理免疫程序并选用合适的疫苗， 特别是首免时间的确定。 值得注意的是，鸡传染性支气管 炎病毒血清型多且交叉保护力弱。单 一性率为９１．９４％，其ＥＬＩＳＡ平均滴度 范围为４０３～７８３１，ＥＬＩＳＡ滴度平均 值为２７５７．６４；三个鸡场血清ＩＢＶ抗 就进行ＩＢ疫苗接种，根本没有制定合 理的免疫程序，而且一些养殖者也不 疫苗只能对同型鸡传染性支气管炎 清楚鸡传染性支气管炎疫苗的性质和 病毒感染产生免疫力，而对异型鸡传 使用，因此，仍然会造成ＩＢ的发生。 我国目前所使用的ＩＢ疫苗主要有 体阳性率均较高且抗体水平较整齐， 表明这三个鸡场进行的ＩＢ疫苗免疫正 处在免疫保护期。 染性支气管炎病毒只能提供部分保护 或根本不保护。如使用预防呼吸型传 染性支气管炎的疫苗Ｈ１２０和Ｈ５２， 有Ｍ４１型的弱毒苗Ｈ５２、Ｈ１２０和灭 （参考文献略） ●Ｅ 投稿热线（０１ ０）８７７ｆ５５３８５￣Ｉ ３ 订阅服务（０１ ０）８７７３２１５７９ 投稿信箱５ｕｄｋ己口口７＠己６］．ｎｅｔ
