ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００９ ＶＯＬ．２０ ＮＯ．３ 时珍国医国药２００９年第２０卷第３期 益母草镇痛抗炎作用的实验研究 王丽娟 ，张 丽 ，王 勇 ，王（１．天津市食品生物技术重点实验室，天津健 ３００１３４； ２．天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津３００１３４） 摘要：目的研究益母草的镇痛、抗炎作用。方法以阿司匹林为阳性对照，采用小鼠热板法和化学刺激法观察益母草的 镇痛作用，采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型观察益母草的抗炎作用。结果益母草（６０ｇ和 ９０ ｇ生药・ ～，ｉｇ）及阿司匹林均能延长小鼠对热刺激疼痛反应潜伏期，使小鼠１０，２０ｍｉｎ内扭体次数减少，并明显减轻 二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜致大鼠足跖肿胀，与生理盐水组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），镇痛及抗炎作用强 度与阿司匹林相近或稍弱。结论益母草具有明显的镇痛抗炎作用。 关键词：益母草；镇痛作用；抗炎作用 中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０８０５（２００９）０３－０６４５－０２ Ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ Ａｎａｌｇｅｓｉｃ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｒｉ ｗＡＮＧ Ｌｉ－ｉｕａｎ ‘．ｚＨＡＮＧ Ｌｉ ．ＷＡＮＧ Ｙｏｎｇ ，ＷＡＮＧ Ｊｉａｎ （１． ０ ｎ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＦｏｏｄ Ｂｉｏ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｎ口ｎｊｉｎ ３００１３４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｏｉｃ Ｐｒ０一 ｃ ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ， 口 ｎ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， ｎ ｎ ３００１３４，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ ａｎａｌｇｅｓｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｆｉ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ａｎａｌｇｅｓｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｒｉ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｗｉｔｈ ｈｏｔｐｌａｔｅ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｅａｒ ｓｗｅｌｌｉｎｇ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｘｙｌｅｎｅ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｎｄ Ｄａｗ ｅｄｅｍａ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｖ ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｒｉ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｒｉ（６０ｇ・ｋｇ～ａｎｄ ９０ｇ・ｋｇ～，ｉｇ）ａｎｄ ａｓｐｉｒｉｎ ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ ｐａｉｎ ｌａｔｅｎｃｙ ｉｎ ｍｉｃｅ，ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｗｒｉｔｈｉｎｇ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｉｎ— ｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｇａｌ－ｅｄｅｍａ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｘｙｌｅｎｅ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｎｄ ｐａｗ ａｎｋｌｅ ｓｗｅｌｌｉｎｇ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｂｙ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｒｉ ａｎｄ ａｓｐｉｉｎ．Ｃｏｎｃｌｒｕｓｉｏｎ Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｄ ｈａｓ ａｎａｌｇｅｓｉｃ ａｎｄ ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｒｂａ Ｌｅｏｎｕｒｉ： Ａｎａｌｇｅｓｉｃ ｅｆｆｅｃｔ； Ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ 益母草为唇形科植物益母草Ｌｅｏｎｏｒｕｓ ｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌａｓ的全草。 ２．２ 热板法测定益母草的镇痛作用 取筛选合格的雌性 主要含有益母草碱、水苏碱等多种生物碱，具有活血祛淤、调经及 小鼠４０只，随机分为４组，即生理盐水组、阿司匹林组（０．２ ｇ 利水消肿之功效，为妇科经产要药，主要具有兴奋子宫、改善血流 ｄ ）、益母草低剂量组（６０ ｇ生药・ｋｇ‘。・ｄ ）和 动力学、保护缺血心肌、抗血栓形成、利尿及防治急性肾小管坏死 益母草高剂量组（９０ ｇ生药・ｋｇ～・ｄ‘。）。各组动物灌胃给 等药理作用 Ｊ。本实验应用热板法和扭体法以及急性炎症模型 药，１次／ｄ，灌胃量为２０ ｍｌ・ｋｇ～，连续７ ｄ。分别于给药后 观察了益母草对疼痛和炎症的影响。 第３天，５天和７天灌胃后１ ｈ，４ ｈ测定各鼠疼痛反应潜伏期 １ 材料与仪器 （痛阈值）。如果小鼠在６０ ｓ仍无反应，即将小鼠取出，痛阈 １．１ 动物昆明种小鼠，雌雄兼有，体重１７～２３ ｇ，；Ｗｉｓｔａｒ大 值按６０ ｓ计算。 鼠，雄性，体重１５０～１８０ ｇ。购白天津药物研究院，合格证号为： ２．３扭体法测定益母草的镇痛作用 小鼠雄性４０只，雌性２０ 津实动准第Ｏ２号。 只，分组及给药方法同“２．２”。在末次给药３０ ｍｉｎ后，各鼠腹腔 １．２ 药品和试剂益母草，河北祁新中药颗粒饮片有限公司 注射０．６％醋酸溶液０．２ ｍｌ，观察并记录１０ ｍｉｎ内，２０ ｍｉｎ内小 生产，批号０６ｌ２３０１；乙酰水杨酸，天津石英钟厂霸州市化工 鼠扭体反应的次数，计算疼痛抑制率。疼痛抑制率（％）＝［１一 分厂生产，批号２００３１１０２；无水乙醇，天津市华东试剂厂生 （实验组扭体次数／对照组扭体次数）］×１００％ 产，批号２００６１１２４；乙醚，天津市北联精细化学品开发有限公 ２．４ 二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察益母草的抗炎作用 小鼠 司生产，批号：２００４０９１０；Ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ，美国ＳＩＧＭＡ公司生产， ５２只，雌雄兼用，分组及给药方法同“２．２”。在末次给药６０ ｍｉｎ 批号０２１０Ｓ０４；１００％二甲苯，天津市化学试剂二厂生产，批号 后，逐一用乙醚麻醉后，将二甲苯均匀涂在小鼠右耳的前后两面， ９６０７２５；角叉菜胶，广州市凯星食品工业有限公司生产，批 每只鼠０．０２ ｍｌ。３．５ ｈ后，尾静脉注射台＿ｌｊ；｝蓝，观察小鼠耳廓颜 ・ ・号２００５１２２５。 色的变化。致炎４ ｈ后将小鼠处死，剪下左右两耳，用打孔器（９ １．３仪器ＴＤ２００１电子天平，天津市天马仪器厂生产；ＤＧＧ一 ｍｍ）分别在两耳同一部位打下圆形耳片，再用分析天平称取耳片 １０１—３电热鼓风干燥箱，天津市天宇实验仪器有限公司生产；游 的质量，计算各组小鼠的耳片肿胀程度。耳片肿胀程度＝致炎 标卡尺，上海量具刃具厂生产，量程：０～１５０ ｍｍ，精密度０．０２ 侧耳片质量（右耳）一对照侧耳片质量（左耳）。 ｍｍ；ＡＵＹ１２０电子分析天平，日本岛津公司生产。 ２．５ 益母草对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响＂ 雄性大鼠２７ 只，随机分为３组，即生理盐水组、阿司匹林（０．１４ ｇ・ｋｇ～・ ２．１ 益母草有效成分的提取 取益母草药材，干燥后加水煎 ｄ ）组和益母草（６０ ｇ生药・ ・ｄ ）组。各组动物每天灌 煮两次，分别为１２倍量水和８倍量水各煎１．５ ｈ，合并滤液，浓缩 胃给药两次，灌胃量为１５ ｍｌ・ｋｇ～，连续７ ｄ。于末次给药１ ｈ 至４．５ ｇ（生药）・ｍｌ 备用。 后分别给每只大鼠左后足跖皮下注射０．５％角叉菜胶溶液０．１ ２方法 ｍｌ，于致炎后５ ｍｉｎ，３０ ｍｉｎ，１ ｈ，２ ｈ，４ ｈ和６ ｈ分别观察并测量每 收稿日期：２００８－０１－１５；修订日期：２００８－０４－２８ 只大鼠两后肢踝周长及足跖厚度，分别计算踝和足跖的相对肿胀 作者简介：王丽娟（１９６１一），女（汉族），江苏泰州人，现任天津商业大学药 度及肿胀抑制率，经ｔ检验比较组间差异的显著性。踝相对肿胀 理学教授，硕士学位，主要从事药理学、药物毒理学教学与科研工作． 度＝（左踝周长一右踝周长）／右踝周长；足跖相对肿胀度＝（左 －６４５・ 时珍国医国药２００９年第２０卷第３期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００９ＶＯＬ．２０ ＮＯ．３ 足跖厚度一右足跖厚度）／右足跖厚度；踝肿胀抑制率（％）＝［（１ ３．１ 益母草对热刺激所致小鼠疼痛反应的影响益母草高、低 给药组踝相对肿胀度／对照组踝相对肿胀度）］×１００％；足跖 剂量组均能明显延长小鼠对热刺激的疼痛反应潜伏期（痛阈 肿胀抑制率（％）：［１一（给药组足跖相对肿胀度／对照组足跖相 值），药后第５天，痛阈值明显延长。与生理盐水组比较，痛阈值 对肿胀度）］×１００％。 差异有显著性（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），镇痛效果与阿司匹林相近（Ｐ 一３结果 ＞０．０５）。结果见表１。 表１ 益母草对热刺激所致小鼠疼痛反应潜伏期的影响（ ±ｓ） ｓ 与生理盐水组比较， Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．０１；ｎ＝１０ ３．２ 益母草对醋酸所致小鼠扭体反应的影响益母草低剂量组 对小鼠扭体反应无抑制作用，而益母草高剂量组能减少２０ ｍｉｎ 内小鼠的扭体次数，与生理盐水组比较，Ｐ＜０．ｏｌ。结果见表２。 ３．３益母草对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响小鼠右耳涂抹二 甲苯后颜色加深，呈粉红色；注射台盼蓝后，小鼠全身被蓝染，右 耳比左耳蓝染明显。益母草高、低剂量组均能有效地抑制二甲苯 型 ｝ 一 簧 皿 ＊ 美 叫 所致的小鼠耳廓肿胀，与生理盐水组比较，小鼠耳廓肿胀度差异 均为Ｐ＜０．０１；而与阿司匹林组比较，小鼠耳廓肿胀度差异也较 明显，说明益母草具有一定的抗炎作用，但效果不如阿司匹林。 结果见表３。 表２益母草对醋酸所致小鼠扭体反应的抑制作用（ｉ±ｓ） ●生理盐水；▲阿司匹林；◆益母草；Ｉ标准差 图２益母草对大鼠足跖（厚度）相对肿胀度的影响 表４肿胀高峰期（４ ｈ）各组的足相对肿胀度（ｉ ｓ） 与生理盐水组比较， Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．Ｏ１；ｎ＝１０ 表３益母草对二甲苯致耳廓肿胀的抑制作用（ ± ） ４讨论 实验结果显示，益母草对二甲苯诱导的耳廓肿胀及角叉菜胶 诱导的足跖肿胀均有明显的抑制作用，表明益母草具有明显的抗 类似 与生理盐水组比较， Ｐ＜Ｏ．０５，一Ｐ＜０．０１；与阿司匹林组比较， Ｐ 炎作用。热刺激法是通过热刺激足部的感觉神经末梢致痛，＜０．０５ 于急性锐痛。扭体法是通过化学刺激致痛，类似于炎性疼痛。益 母草高剂量（９０ ｇ・ｋｇ～・ｄ。。）和低剂量（６０ ｇ・ｋｇ一・ｄ ）均可 ３．４益母草对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响注射角叉菜胶 较明显地延长小鼠对热刺激的痛阈值，但起效较慢，药后５ ｄ才 后，大鼠足部开始肿胀，并逐渐加重，在４ ｈ达到高峰，之后逐渐 开始使痛阈值明显延长。益母草高剂量组能减少２０ ｍｉｎ内小鼠 消退。益母草能有效地抑制角叉菜胶所致的大鼠足肿胀，并且使 的扭体次数，扭体反应抑制百分率在２０ ｍｉｎ内为５０．８％，与生理 肿胀消退时间略前移。与生理盐水组比较，各时间点的大鼠踝肿 盐水组比较，扭体次数差异显著（Ｐ＜０．０１），与阿司匹林组接近 胀度均差异显著（Ｐ＜０．０５），与阿司匹林组比较，作用相近或较 （Ｐ＞０．０５），表明益母草具有一定程度的镇痛作用，对急性锐痛 弱。结果见图１—２和表４。 和慢性钝痛均有一定的作用。 从以上实验结果分析，益母草的抗炎作用可能与其改善局部 血液循环，减少渗出，加速吸收有关。益母草在两种镇痛模型中 的镇痛效果相近，提示其镇痛作用可能与其抑制末梢神经对疼痛 刺激的敏感性及抗炎作用有关。进一步可以通过检测炎症局部 的花生四烯酸、前列腺素、缓激肽等的含量分析其抗炎作用是否 与抑制环加氧酶有关。益母草的抗炎镇痛作用及其作用机制有 贺 待于深入研究。 ｝ 一 Ⅱ＊ 蟹 参考文献： ［１］ 沈映君．中药药理学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００２：６７９． ［２］赵瑞芝，袁小红，林爱华，等．均匀设计法筛选益母草提取工艺［Ｊ］． 中药材，２００６，２９（１１）：１２４４． ［３］徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［Ｍ］．北京：人民卫生出 版社，２００３：８８６． ●生理盐水；▲阿司匹林；◆益母草；Ｉ标准差 图ｌ益母草对大鼠足踝（周长）相对肿胀度的影响 ６４６・ ・
