高效液相色谱仪
验 证 方 案
规格型号 设备编号 使用岗位 制造厂商
目录
1. 参与验证的相关部门及其职责............................................................................... 1
1.1验证小组成员及职责....................................................................................... 1 1.2验证方案起草................................................................................................... 1 1.3验证方案批准................................................................................................... 1 2. 验证目的................................................................................................................... 2 3. 验证依据判断标准：............................................................................................... 2
3.1验证依据........................................................................................................... 2 3.2验证评判标准................................................................................................... 2 4.验证内容..................................................................................................................... 2
4.1安装环境的确认............................................................................................... 2 4.2运行确认........................................................................................................... 3 4.3性能确认........................................................................................................... 4 4.4 柱温箱温度设定值误差ΔTS和控温稳定性TC的检定 ............................. 6 4.5 紫外检测器...................................................................................................... 7 4.6整机性能........................................................................................................... 8 5.验证结果及分析评价................................................................................................. 9 6.再验证要求................................................................................................................. 9
6.1再验证周期....................................................................................................... 9 6.2 再验证内容.................................................................................................... 10
本公司所用的( )高效液相色谱仪是由工作站软件（ ）、二元泵( )、手动进样器（ ）、控制器( )、柱温箱( )、紫外检测器（ ）以及相关管路等组成。主要用于本公司在原辅料、半成品、产品的含量检测。
1. 参与验证的相关部门及其职责
1.1验证小组成员及职责
验证人员 质量部 工程部
1.2验证方案起草 起草部门 质量部
1.3验证方案批准 批 准 人
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部门 职务 组长 化验员 化验员 验证分工 负责起草验证方案审核、组织协调验证 负责撰写（ ）型高效液相色谱仪及验证报告 保证设备正常运转 负责设备的安装 签 名 日期 年 月 日 签 名 日 期 年 月 日
2. 验证目的
确认（ ）高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。
3. 验证依据判断标准：
3.1验证依据
3.1.1《药品GMP指南》2010年版
3.1.2《（ ）型高效液相色谱仪标准操作规程》 3.1.3《（ ）型高效液相色谱仪安装使用说明》 3.1.4《中国药典》2015年版四部 3.2验证评判标准
3.2.1安装环境确认判断标准
确认安装符合《（ ）型高效液相色谱仪安装使用说明》说明书要求。 3.2.2运行确认判断标准
安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。 3.2.3性能确认判断标准
使用样品检测符合《中国药典》2015年版四部附录要求和（ ）型高效液相色谱仪性能指标。
4.验证内容
4.1安装环境的确认
项 目 要 求 检查情况 2 第 2 页 共 10 页
位 置 洁净度 环 境 温度 光线 相对湿度 电 路
电源 接地 应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火 室内应保持清洁,无腐蚀性气体 15～35℃，全天温度变化较小 无阳光直射 45～85% AC220V±22V、50HZ±1HZ 应接地 单项结论：_________________________________________________________
检测人： 日期： 年 月 日 复核人： 日期： 年 月 日
4.2运行确认：
严格按《（ ）高效液相色谱仪标准操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。
操作 步骤 合 格 标 准 1.打开电源，仪器自动完成初始化 2.将排液阀旋钮逆时旋转以打开排液阀，按“PUN/STOP”，泵运行，泵指示灯亮 操作前准备 3.清洗完成后，按“PUN/STOP”，泵停止运行，顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀，按“MODE”调节流速，待ML/Min指示灯亮，按▲或▼以改变流速，将流速设定为1ml/min, 4.按“pun”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pun”，泵停止，泵指示灯灭 5.以上程序完成后，操作的准备工作完成 检查压力值 1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中。 2.打开排液阀，逆时方向旋转排液阀旋钮，按“MODE”，待Psi指3 第 3 页 共 10 页
结 果
示灯亮后，检查显示压力值是否在-0.3至0.3MPa之间 3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求 4.按“PUN/STOP”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“PUN/STOP”泵停止，泵指示灯灭
单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
4.3性能确认 4.3.1 泵性能确认 1) 流量准确性确认
泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR 流量设定值（ml/min） 测量次数 流动相收集时间（min） 允许误差 SS SR 0.5 3 10 5% 3% 1.0 3 5 3% 2% 2.0 3 5 3% 2% 启动仪器，按上表的要求设定流量，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集上表规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1）、（2）计算SS和SR，结果记录在下表中； 流量（ml/min） 次数 1 0.5 2 3 1 1.0 2 3 2.0
W1 W2 W2-W1 SS SR 1 4 第 4 页 共 10 页
2 3 注：Ss=(—100% 式（1） Fm-Fs)/Fs×
100% 式（2） SR=(Fmax-Fmin)/ —Fm×
式中：Fm ——Fm=(W2-W1)/(ρ•t)，流量实测值，ml/min； W2—— 容量瓶+流动相的质量，g；W1—— 容量瓶的质量，g；
ρ—— 试验温度下流动相的密度，g/mL；t—— 收集流动相的时间，min； — —— 同一组测量的算术平均值，mL/min；FS—— 流量设定值，mL/min；
Fm
Fmax ——同一组测量中流量最大值，mL/min；Fmin ——同一组测量中流量最小值，ml/min。
单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
2) 压力范围
可执行标准：±0.2MPa设定值
测试方法：在进样阀的出口接一个管道，再将管道的用拇指封住。启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。
次数 设置压力 （Mpa） 1 2 3 10 20 30 停止压力 （Mpa） 误差 （Mpa） 单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
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4.4 柱温箱温度设定值误差ΔTS和控温稳定性TC的检定
将温度计（已校验，分度值为0.1℃）放置在柱温箱内，选择35℃、40℃和45℃进行检定，按仪器说明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值，平均值与设定值之差为ΔTS，7次读数中最大值与最小值之差为控温稳定性TC，结果记录在下表，柱温箱温度设定值误差ΔTS≤±3℃，TC≤±1℃； 设定温度 （℃） 次数 1 2 3 35℃ 4 5 6 7 1 2 3 40℃ 4 5 6 7 1 2 45℃ 3 4 5 6 首测温度 （℃） 平均温度 （℃） ΔTS （℃） TC 结 果 6 第 6 页 共 10 页
7 单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
4.5 紫外检测器
4.5.1 基线噪音和基线漂移
选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，二极管阵列检测器的波长设定为254nm，待仪器稳定后，记录基线30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度，计算基线噪音，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线噪音应不超过（ ）； 衰减倍数 注：Nd=KB
式中：K：衰减倍数；B：测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度 基线漂移在1h内偏离原点的值为 （AU/h），应不超过5×10-3AU/h。
测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度 基线噪音 结 果 单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
4.5.2最小检测浓度
采用盆炎净胶囊分析色谱条件，进样量10µl；取适量的芍药苷，用甲醇稀释制成0.2ug/ml的溶液，连续进样6次，记录盆炎净胶囊的色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰—峰高，按下式来计算最小检测浓度（CL），应不超过0.2ug/ml，结果记录在下表；
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盆炎净胶囊的称样量 依替巴肽稀释倍数 的色谱峰高 平均峰高 最小检测浓度 结 果 注：CL=
2Nd×c×V H×20
式中：Nd：基线噪声峰—峰高；c：标准溶液浓度；H：标准溶液的色谱峰高；V：进样体积
单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
4.6整机性能
在4.4.2所记录的色谱图中，按下式计算Rsd值，Rsd≤2.0%，并将结果记录在下表中； 品 名 项目指标 分离度（R）≥1.5 称样量 实 验 结 果
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结 果
图谱文件名 Rsd≤2% 峰面积（A） 平均数（M错误！未指定书签。） Rsd值 结 果 注：M错误！未指定书签。=(A1+A2+……An)/n (A Rsd=
1M)2n1M
式中：M：峰面积平均数；A：峰面积；n：测量次数
单项结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
5.验证结果及分析评价
结论：
检测人： 日期： 年 月 日
复核人： 日期： 年 月 日
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6.再验证要求
6.1再验证周期
6.1.1 设备大修后需再校验。
6.1.2 由于检修、调整、迁移或其它原因，可能对设备的安装情况、主要技术参数和功能有影响时，应进行再验证。
6.1.3 高效液相色谱仪的验证周期为一年，更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证。 6.2 再验证内容
进行设备的再校验，可针对设备性能中部分必须的项目进行再验证，而不一定要进行全面的验证。
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