乙型肝炎病毒诊断中分子诊断技术的应用探讨
根据不完全数据统计，我国患有乙型肝炎病毒患者占有较大比重，全国约有将近9300万人。乙型肝炎病毒属于DNA病毒的一种，具有较强的传染性，但是其并不遗传。乙型肝炎病毒携带者的正常工作、学习、生活均会受到较大影响，探寻该病毒的有效诊断方法显得尤为重要。
标签：乙型肝炎病毒 病毒诊断 分子诊断技术
就目前而言，我国乙型肝炎病毒感染者多属于慢性肝炎，该病毒具有较强的生存能力，能够耐高温、耐寒，甚至对紫外线和高浓度消毒剂等也具有明显抗性，该病毒能够在人体存活几年、几十年，临床治疗难度较大。[1]患病时间越长患者患有原发性肝癌或者肝硬化风险越高。近年来，将分子诊断技术应用于乙型肝炎病毒的临床诊断中，这对于探寻新的预防、治疗方法具有重要意义[2]。
一、乙型肝炎病毒的结构特点
乙型肝炎病毒属于DNA病毒的一种，这种病毒主要感染于人体，并且具有比较活跃、强烈的复制能力，传染率高[3]。乙型肝炎病毒的结构特点包括很多方面，首先基因序列具有明显的多变性；其次结果不是完全统一的，也不是完全雙链环状的；最后，在该病毒的蛋白质编码区的不同病毒结构活跃性明显，能够进行序列调整[4]。
二、分子诊断技术
首先，PCR技术。分子诊断技术包括不同方面，其中最值得一提的技术即为PCR技术，这一技术主要用于扩增，在病毒诊断实验中要保证其阴阳性放置正确，并且相互对应放置。可以用于测定的方式包括普通的PCR技术、竞争性PCR技术和实验研究比较常用的两种技术即套式PCR和免疫杂交PCR技术[5]。将PCR技术应用于实验研究中，有研究专家选取两种不同的检测技术对乙型肝炎病毒进行测量诊断[6]，其中一项检测技术即为本文提到的PCR技术，与之对照实验研究的另一项技术即为常规定性法，实验结果显示PCR技术检测结果更准确，其对于病毒的活性及特征等方面指标检测灵敏度更高，更能够准确判断患者的实际患病情况和传染情况。
其次，核酸杂交技术。这一项检测技术的最大优点即为对于技术要求和设备要求均较低。通常检测人员只需要选取实验所需的标本即可，将其放置于实验所需的纤维素薄膜上即可，观察所选标本的形态并将其详细准确记录。检测人员将乙型肝炎病毒DNA寡核酸探针放置于选取的实验样本中，保证两者能够相互融合，实现杂交效果。经过这一实验操作后检测人员能够直观的看出所选的检测标本中是否存在乙型肝炎病毒，根据两者融合情况能够对病毒进行半定量测量。将这一检测技术方法与上述提到的PCR检测方法相比较而言，其虽然检测结果的特异性较好，但是从检测结果或者是病毒的活性检测灵敏度方面来看的话
较差，而且这一检测方法的另一局限性是检测步骤较多、更为繁琐，一旦出错将会影响整个实验的检测结果。
最后，支链DNA技术。这一项检测技术与上述两项检测技术均不相同，其在行检测操作过程中需要共同应用支链DNA分子和另外一项比较重要的探针，这里需要重点提到的即为探针部分，其主要由三种不同探针组成，其中包括靶探针1和2，还有另外一个捕获探针。在乙型肝炎病毒诊断中这三个探针具有重要作用，检测人员选取待测核酸样本，靶探针1和2在实验检测操作中分别与样本-捕获探针和样本-支链DNA分子进行相互融合、杂交活动。完成上述操作后能形成酶催化反应，从而进一步判定样本的核酸含量情况，对乙型肝炎病毒进行有效判定。支链DNA技术的优势主要表现在其在行乙型肝炎病毒检测实验过程中能够保证实验反应的稳定性，同时这一检测技术涉及到三种不同探针，能够进行重复病毒检测，根据每次不同检测结果进行对比分析，能够判断最终有效检测结果，能够保证实验结果的可靠准确性。但是相对应的这一检测方法也存在一定局限性，其检测成本较高，同时其与PCR技术最大的差异就是放大倍数过少，不能够将这种检测方法适用于临床所有病症的诊断中，检测范围过于狭窄。目前，我国仅有较大的部分医院能够进行支链DNA技术检测操作。
三、分子诊断技术应用于乙型感染病毒诊断的意义
首先，可以用于乙型肝炎病毒感染的早期诊断。从传统意义上来讲，我国大部分医院在进行乙型肝炎病毒感染的临床诊断中多参考临床比较常见的免疫学指标变化情况，其中主要包括抗HBc指标、抗HBs指标和临床病症判断参考比较重要的HBsAg指标等。相关研究专家表明[7]，对于一般典型的乙型肝炎病毒感染患者的临床诊断是可以参考免疫学指标变化情况的，但是进一步研究发现，其仅能够检测出病毒的表型指标情况，应用于病症的临床诊断中存在误诊或者漏诊的风险，对于病症较轻或者刚感染的患者早期诊断是不利的。当前，将分子诊断技术应用其中，能够最大程度提高乙型肝炎病毒感染对早期诊断准确性，这种检测方法甚至可以检测到患者体内的一个病毒颗粒，在病症早期临床诊断中应用具有重要意义[8]。医护人员可以根据检测结果判定患者的实际患病情况，对其及时制定合理有效的解决方案，这对于患者病情控制甚至临床治疗均具有一定促进作用。
其次，应用于治疗效果监测。乙型肝炎病毒感染接受正规、有针对性的临床治疗可以被治愈，但是临床治疗时间较长，过程较为复杂。患者在接受临床治疗的过程中，医护人员需要对患者的病情变化情况予以监测，以此判断其治疗效果，同时也能够对后续治疗方案的调整提供一定指导。当前，分子诊断技术被逐渐应用于乙型感染病毒感染治疗效果监测中，其中检测指标107copies/mL和另外一项指标104copies/mL两者分别表示病毒活跃性较强和病毒被抑制，病症好转，通过该检测指标能够判断患者的具体治疗效果[9]。
最后，治疗方案的拟定。从上述文章阐述内容中能够明确，乙型肝炎病毒具有一定传染性，主要是由于该病毒具有灵活的拷贝复制能力，从而出现人与人之间的传染情况。有相关研究专家提出结论[10]，称可以将分子诊断技术应用于乙
型肝炎病毒感染的临床诊断中，根据检测结果能够看出患者乙型肝炎病毒的拷贝复制活性程度，通常情况下，其活性程度越高说明患者的病症越严重，感染体的传染性越明显，进一步来讲患者的干组织结构受损程度越严重，患者患有肝硬化或者肝炎的风险就越大。医护人员要根据这一指标为患者制定合理有针对性的治疗方案，有利于在最短时间内控制病情发展，达到预期临床治疗效果。
结束语
当前，将分子诊断技术应用于乙型肝炎病毒诊断中，能够有效提高病症早期诊断效果及临床治疗效果监测等，对于临床治疗具有重要意义。
参考文献
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