刘伍香等 １，２，４－三氯苯对成年斑马鱼和幼鱼几种酶活性的影响 １，２，４一三氯苯对成年斑马鱼和幼鱼 几种酶活性的影响＊ 刘伍香 杜青平 李彦旭 彭 润 （１．广东工业大学环境科学与工程学院，广东广州５１０００６；２．中山大学环境科学与工程学院，广东 广州５１０００６） 摘要 实验室条件下，通过１，２，４－三氯苯（１，２，４－ＴＣＢ）染毒对成年斑马鱼及幼鱼体内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶 （ＣＡＴ）和碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性进行测定和比较，从而确定１，２，４－ＴＣＢ暴露对斑马鱼的毒性机制。结果发现，低质量浓度（２、４、８ ｍｇ／Ｉ ）１，２，４－ＴＣＢ处理对ＳＯＤ活性有～定的应激作用，且在第８天明显高于对照组；１６ ｍｇ／Ｉ １，２，４－ＴＣＢ对ＳＯＤ活性明显抑制。 ４～１０ ｄ时４ ｍｇ／Ｉ玻 理组ＣＡＴ活性与对照组呈显著差异，２、４、８ ｍｇ／Ｌ处理组ＣＡＴ活性随时间延长先升高后降低。各处理组ＡＫＰ 活性在前４ ｄ基本无显著变化，２、４ ｍｇ／Ｉ 处理组ＡＫＰ活性在第８天与对照组呈极显著差异；１６ ｍｇ／Ｉ 处理组ＡＫＰ活性低于对照 组。斑马鱼胚胎暴露１，２，４－ＴＣＢ孵化第６天后，３．４６ ｍｇ／Ｉ 处理组幼鱼蛋白质与对照组呈显著差异，其他处理组与对照组无显著差 异。各处理组幼鱼体内ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＡＫＰ活性与对照组基本无显著变化。幼鱼比成年斑马鱼对１，２，４－ＴＣＢ影响更加敏感。 关键词 １，２，４－三氯苯 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶碱性磷酸酶斑马鱼 Ｓｅｖｅｒａｌ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏ ｅｘｐｏｓｅｄ ｔｏ １，２，４－ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ ＬＨ Ｗｕｘｉａｎｇ ．ＤＵ Ｑｉｎｇ— ｐｉｎｇ ，ＬＩ Ｙａｎｘｕ ，ＰＥＮＧＲｕｎ ．（１．Ｆａｃｕｌｔｙ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＧｕａｎｇｚｈｏｕＧｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０００６；２．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ＇Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｕｎ Ｙａｔ—ｓｅｎ Ｕ－ ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０００６） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ １，２，４－Ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ（１，２，４－ＴＣＢ）ｔｏ ａｄｕｌｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｖ ｓｔａｔｉｃ ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ．Ｓｅｖｅｒａ１ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｓｕｃｈ ａｓ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ），ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ）ａｎｄ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＡＫＰ），ｉｎ ａｄｕｌｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ １，２，４－ＴＣＢ ｗｅｒｅ ｄｅ ｔｅｃｔｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｔｏｘｉｃａｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｌｏｗ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ １，２，４ ＴＣＢ（２，４，８ ｒａｇ／Ｌ）ｈａｄ ｃｅｒ－ ｔａｉｎ ｓｔｒｅｓｓ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｔｈｅ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ ｏｎ ８ ｄ ｐｏｓｔ—ｅｘｐｏｓｕｒｅ．Ｈｉｇｈ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ １，２，４ ＴＣＢ（１ ６ ｍｇ／Ｌ）ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ．ＣＡＴ ａｃｔｉｖｉ— ｔｉｅｓ ｉｎ ４ ｍｇ／Ｉ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｈａｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ ｄｕｒｉｎｇ ４－１０ ｄ；ＣＡＴ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ２，４， ８ ｍｇ／Ｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｆｉｒｓｔ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｗｉｔｈ ｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｔｉｍｅ．ＡＫＰ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｏｎ ４ ｄ ｐｏｓｔ ｅｘｐｏｓｕｒｅ。ｗｈｉｌｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ＡＫＰ ａｃｔｉｖｉ— ｔｙ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ２ ａｎｄ ４ ｍｇ／Ｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｏｎ ８ ｄ．Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ＡＫＰ ｉｎ １６ ｍｇ／Ｌ ｅｘｐｏｓｕｒｅ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｅｍｂｒｙｏｓ ｅｘｐｏｓｅｄ ｔｏ １，２，４ ＴＣＢ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ａｆｔｅｒ ｈａｔｃｈｉｎｇ ｆｏｒ ６ ｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｅｘｃｅｐｔ ３．４６ ｍｇ／Ｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ＳＯＤ， ＣＡＴ ａｎｄ ＡＫＰ ｉｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｓｈｏｗｅｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅ ｅｍｂｒｙｏ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｓｅｎｓｉ— ｒｉｖｅ ｔｏ １，２，４－ＴＣＢ ｔｈａｎ ａｄｕｌｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ： １，２，４－ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ；ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ；ｃａｔａｌａｓｅ；ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ；ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｌ，２，４一三氯苯（１，２，４一ＴＣＢ）是典型持久性有机 一定的急性毒性，同时也不能忽视其亚慢性毒性效 污染物之一，由于具有高脂溶性，且不易降解，在自 应。报道称，斑马鱼暴露于ｌ，２，４－ＴＣＢ ２４ ｈ的半数 然环境和工业生产中广泛存在，主要用于纺织工业 致死质量浓度（ＬＣ 。）为４．３３ ｍｇ／Ｌ。能引起成年斑 与染料的合成，该类企业废水的大量排放，造成水体 马鱼呼吸急促、反应迟钝等症状，甚至死亡；能引起 中１，２，４－ＴＣＢ污染相当严重，目前国内外还没有统 斑马鱼胚胎发育畸形或抑制胚胎发育；还能引起蚯 一的环境排放标准。１，２，４－ＴＣＢ已被发现对鱼类有 蚓氧化损伤及超微结构损伤［３］。虽然在水中检测到 较高毒性ｌ＿１］和生物蓄积性ｌ＿２］。１，２，４－ＴＣＢ对鱼类有 １，２，４－ＴＣＢ浓度不高，但是通过食物链在生物体内 第一作者：刘伍香，女，１９８５年生，硕士研究生，研究方向为水污染控制。 ＊国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ．４０９７１２５１）。 ・ ２７ ・ 环境污染与防治 第３４卷 第６期２０１２年６月 １．３试验方法 可被生物富集及生物放大。因此，对水生生物低剂 量长期暴露可导致不可逆损伤。 毒性实验大都通过测定酶活性来标定毒性影 响。碱性磷酸酶（ＡＫＰ）广泛存在于各种生物体内， 具有机体防御、离子分泌和免疫调节等重要生理作 成年斑马鱼急性染毒：每一水族缸中加人４ Ｉ 药液，设４个质量浓度（２、４、８、１６ ｍｇ／Ｉ ）处理组及１ 个对照组，每组受试鱼２５尾，试验期间不喂食，每 ２４ ｈ更换一半试验溶液，在染毒后的第２、４、６、８、１０ 天分别从各组随机取５尾，用双蒸水清洗３次，用滤 纸吸干表面水分后称量，加人４℃ＰＢＳ缓冲液（每 克鱼加１０ ｍＩ ）冰浴中高速匀浆，在４℃、１０ ０００ 用 ｝。超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性与生物体的免疫 水平密切相关，对增强吞噬细胞的防御能力和整个 机体的免疫功能有重要作用，常用来评判免疫调节 剂对机体非特异性免疫力的影响。过氧化氢酶 （ＣＡＴ）是一种酶类清除剂，它可促使Ｈ （）。分解为分 子氧和水，清除体内的Ｈ。Ｏ。，从而使细胞免于遭受 Ｈ Ｏ 的毒害，是生物防御体系的关键酶之一［５］。 本研究通过测定成年斑马鱼及幼鱼体内几种免 疫相关的ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＡＫＰ活性，估计不同浓度 １，２，４－ＴＣＢ对成年斑马鱼及幼鱼几种重要酶活性的 ｒ／ｍｉｎ下离心２５ ｍｉｎ，取上清液测定。 胚胎毒性：取正常囊胚期的胚胎进行染毒，在预 试验基础上设置浓度梯度为０、１／２ ＬＤ 。（半数致死 剂量）、１／４ ＬＤ 。、１／８ ＬＤ 。、１／１０ Ｉ Ｄ 。，即０、１．３８、 １．７３、３．４６、６．９２、１３．８４ ｍｇ／Ｉ ，光照培养箱培养（温 度为（２８±１）℃，光照周期为１４ ｈ光照、１０ ｈ黑暗）， 由于斑马鱼受精卵经２～３ ｄ可孵出仔鱼，再经２ ｄ 影响，进而探讨１，２，４－ＴＣＢ对鱼类毒性作用及致毒 机制和估计水体受１，２，４－ＴＣＢ污染程度。 １材料与方法 １．１ 药品与溶液配制 仔鱼开始游动觅食。因此，在第６天取样，匀浆离心 取上清液测定。 １．４ 生化指标测定 蛋白质含量采用考马斯亮蓝Ｇ一２５０染色法对蛋 白质含量进行测定 ］，以牛血清白蛋白为标准蛋白。 ＳＯＤ采用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯三酚测 活法 ］，酶活性单位为Ｕ／ｍＩ 。ＣＡＴ测定采用徐镜 波等 的方法，酶活性单位为 ｇ／ｍｉｎ。ＡＫＰ采用对 硝基磷酸苯二钠测定法 ］，酶活性单位为Ｕ／ｇ。 １．５ 数据分析 １，２，４－ＴＣＢ（纯度＞９９ ）购自Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ Ａ Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙ公司；牛血清白蛋白与考马斯亮蓝 Ｇ一２５０为分析纯；丙酮（分析纯）用作助溶剂。ｌ，２，４一 ＴＣＢ用丙酮助溶后，用双蒸水配制成１ ０００ ｍｇ／Ｉ 储 备液备用，临用时再稀释到所需浓度（丙酮的体积分 数不超过１ ）。ＰＢＳ缓冲液：ＮａＣ１ １３７ ｍｍｏｌ／Ｉ ， ＫＣ１ ２．７ ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｎａ２ＨＰＯ４ ４．３ ｒｅｔｏｏｌ／Ｉ ，ＫＨ ２ＰＯ４ １．４ ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ ７．４。 １．２ 受试生物 用Ｅｘｃｅｌ软件进行数据整理，用ＳＰＳＳ１７．０软件 进行单因素方差分析，并进行组问的Ｑ检验。 ２结果与分析 ２．１ １，２，４一ＴＣＢ对成年斑马鱼几种酶活性影响 斑马鱼，购自广州市珠江水产研究所，平均体长 （３．２５±０．３５）ｅｍ，选择头小体阔、鳞片完整舒展、行 动活泼、反应灵敏、逆水性强、外观正常、个体均匀的 健康鱼。试验前在自然光照下用曝气４８ ｈ以上的 自来水驯化７～１０ ｄ。斑马鱼每天喂３次市售颗粒 ２．１．１ １，２，４－ＴＣＢ对成年斑马鱼Ｓ（）Ｄ活性的影响 １，２，４一ＴＣＢ诱导斑马鱼体内ＳＯＤ活性变化如 表１所示。从表１可见，不同浓度１，２，４－ＴＣＢ处理 后，斑马鱼体内ＳＯＤ活性随着时间延长，总体呈现 食物，试验前一天不喂食。 先升高后降低的趋势，且处理第８天后，２、４ ｍｇ／Ｌ处 表１ １，２。４－ＴＣＢ对斑马鱼ＳＯＤ活性的影响” Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｌｅｅｔｓ ｏｆ １，２，４一ＴＣＢ ｏｎ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ Ｕ／ｍＩ 注：”样本数（Ｎ）为５；数值为平均值±标准差；＊表示显著性差异（ｐ＜Ｏ．０５），＊＊表示极显著性差异（ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。表２和表３同。 ・ ２８ ・ 刘伍香等 １，２，４一三氯苯对成年斑马鱼和幼鱼几种酶活性的影响 理组ＳＯＤ活性与对照组相比，增加３倍左右。１６ 见图１。 ｍｇ／Ｌ处理组ＳＯＤ活性与对照组相差不大。从不同 ３．１５ 处理浓度来看，Ｓ０Ｄ活性也呈现先升高后降低的趋 —３．１０ 势，且８ ｍｇ／Ｌ处理组ＳＯＤ活性与对照组均呈显著 差异。 望３．０５ ０ ２．１．２ １，２，４－ＴＣＢ对成年斑马鱼ＣＡＴ活性的影响 禧３．００ １，２，４－ＴＣＢ诱导斑马鱼体内ＣＡＴ活性变化如 Ⅲ 嘲２表２所示。从表２可见，１，２，４－ＴＣＢ处理后，２、４、８ ．９５ ｍｇ／Ｌ处理组ＣＡＴ活性随时间延长，呈现先升高后 ２．９０ ０ ｌ ３８ １．７３ ３．４６ ６．９２ ｌ３．８４ 降低的现象，而１６ ｍｇ／Ｌ处理组，ＣＡＴ活性逐渐下 １，２，４－ＴＣＢ／（ｍｇ・Ｌ ） 降。不同浓度１，２，４－ＴＣＢ处理后，ＣＡＴ活性随着 （ａ）蛋白质 １，２，４－ＴＣＢ浓度的增加先增加，到４ ｍｇ／Ｌ时达到 口ＳＯＤ ●ＡＫＰ ■ＣＡＴ 最大值，随后降低。１６ ｍｇ／Ｌ处理组４ ｄ后的ＣＡＴ 活性低于对照组。ＣＡＴ活性与１，２，４－ＴＣＢ处理之 间呈现一定的时间一效应和剂量一效应关系。 ２．１．３ ｌ，２，４－ＴＣＢ对成年斑马鱼ＡＫＰ活性的影响 １，２，４－ＴＣＢ诱导斑马鱼体内ＡＫＰ活性变化如 表３所示。从表３可见，低质量浓度（２、４、８ ｍｇ／Ｌ） １，２，４－ＴＣＢ处理后，ＡＫＰ活性随时问延长呈现先升 高后下降的趋势，但高质量浓度（１６ ｍｇ／Ｌ） ｌ，２，４－ＴＣＢ／（ｍｇ－Ｌ－Ｉ） １，２，４－ＴＣＢ处理后，ＡＫＰ活性随着时间延长逐渐下 ㈣酶活性 降；２ ｍｇ／Ｌ处理组在第６天时ＡＫＰ活性与对照组 图１ １，２，４－ＴＣＢ对幼鱼蛋白质及ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＡＫＰ活性影响 Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ １，２，４－ＴＣＢ ｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ 呈显著差异，第８天时呈极显著差异；４ ｍｇ／Ｌ处理 ｉｍｍｕｎｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＡＫＰ）ｉｎ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ 组在第６、８天时ＡＫＰ活性与对照组呈极显著差 由图１（ａ）可知，幼鱼体内蛋白质含量随１，２，４一 异，ＡＫＰ活性为对照组的３倍多。 ＴＣＢ质量浓度的增加先增加后降低，在３．４６ ｍｇ／Ｌ ２．２ １，２，４一ＴＣＢ对幼鱼蛋白质及几种酶活性影响 时蛋白质含量达到最大，且与对照组呈显著差异 对１，２，４－ＴＣＢ染毒胚胎后第６天的幼鱼体内 （ ＜０．０５），其他处理组与对照组无显著差异。由 蛋白质及ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＡＫＰ活性进行测定，结果 图１（ｂ）可看出，与对照组相比，１，２，４－ＴＣＢ处理幼 ・ ２９ ・ 环境污染与防治 第３４卷 第６期 ２０１２年６月 鱼体内ＡＫＰ活性变化不明显，但也表现了一定的 应激反应；ＳＯＤ活性在１．７３ ｍｇ／１ 时有一定的促进 作用，当质量浓度超过３．４６ ｍｇ／Ｉ 时ＳＯＤ活性受到 抑制作用；ＣＡＴ活性在低于３．４６ ｍｇ／Ｌ￣ｇ有一定的 促进作用，高于６．９２ ｍｇ／Ｉ 时ＣＡＴ活性受到抑制； ３种酶活性与对照相比基本无显著变化。 ３讨 论 鱼类作为低等脊椎动物，其免疫系统包括先天 性的或非特异性的防御系统，鱼类非特异性防御系 统是机体抵抗外界异源物质的第一道防线，几种非 特异性相关酶（Ｓ（）Ｄ、ＣＡＴ和ＡＫＰ）在有效清除和 降解异源物中发挥重要的作用【 。 ＳＯＤ—ＣＡＴ系统为生物体的抗氧化损伤提供第 一道防线。研究结果表明，斑马鱼在低质量浓度（２、 ４、８ ｒａｇ／Ｉ ）１，２，４－ＴＣＢ短期暴露（＜８ ｄ）时，ＳＯＤ 活性随１，２，４一ＴＣＢ浓度的增加和时间的延长而增 加，机体通过增加ＳＯＤ活性歧化过多的活性氧自由 基，伴随Ｓ（）Ｄ增加的同时，总体上ＣＡＴ活性也随 之增加，催化Ｈ （） 等生成水和氧气，以减少对斑马 鱼伤害。Ｓ（）Ｄ活性随着１，２，４－ＴＣＢ质量浓度继续 增加到１６ ｒａｇ／Ｉ 而下降，ＳＯＤ清除活性氧能力减 弱，活性氧自由基过度积累，表现为ＳＯＤ和ＣＡＴ 活性都下降。结果与ＯＲＢＥＡ等 利用多环芳烃 （ＰＡＨｓ）和多氯联苯（ＰＣＢｓ）对鱼类抗氧化酶活性研 究结果一致。 ＡＫＰ是一种重要的水解酶，直接参与磷酸 基团的转移，对细菌等异物在溶酶体内的消化降解 具有重要作用，并在免疫反应中发挥作用，一直以来 ＡＫＰ都被作为一个重要的免疫指标在动物免疫学 中被广泛研究。研究结果表明，低质量浓度（２、４、８ ｍｇ／Ｉ ）１，２，４ ＴＣＢ短期暴露时，斑马鱼体内ＡＫＰ 活性随时间延长逐渐增加，可能是１，２，４－ＴＣＢ暴露 后促使鱼体内产生的补偿机制是由于非特殊抗氧化 系统综合比例的增加 １ 。随着１，２，４－ＴＣＢ浓度增 加和时间的延长，由于氧化损伤而导致ＡＫＰ活性 下降，细胞免疫功能下降。这与之前的一些鱼类的 毒性试验ｌ＿】 有一定类似。 大多数鱼类在其仔鱼阶段特异性免疫器官尚未 发育完全，主要是通过抗体等在卵子中的积累将免 疫力传递给子代，依靠母源性免疫和自身的非特异 性免疫来抵抗各种外界条件［１ 。 。研究结果发现， 斑马鱼胚胎暴露１，２，４－ＴＣＢ ６ ｄ后，幼鱼在低浓度 １，２，４－ＴＣＢ时其Ｓ（）Ｄ、ＣＡＴ和ＡＫＰ表现一定的应 ・ ３ｆ） ・ 激反应，当浓度增加时，其对应的ＳＯＤ、ＣＡＴ和 ＡＫＰ受到不同程度的抑制，免疫下降，生长速度 缓慢。 幼鱼比成年斑马鱼对环境污染物的影响更加敏 感，这种易感性可能是：（１）幼鱼的代谢功能尚未成 熟，对环境毒物更加敏感；（２）幼鱼的生长发育快，其 免疫系统较脆弱，不能修复环境毒物造成的损伤。 因此，发育中的大脑或免疫体一旦被毒物倾入就会 有持久性和不可逆性破坏。本研究也发现，ｌ，２，４ ＴＣＢ处理第６天后的幼鱼几种酶活性变化比成年 斑马鱼更加敏感。 ４ 结 语 （１）１，２，４ ＴＣＢ对成年斑马鱼机体ＳＯＤ、ＣＡＴ 和ＡＫＰ均呈现一定的时间一效应和剂量效应的 关系，在低浓度１，２，４－ＴＣＢ胁迫下斑马鱼还呈现出 “毒性兴奋效应”，而高浓度１，２，４－ＴＣＢ下斑马鱼体 内免疫功能受到损害。 （２）１，２，４ ＴＣＢ影响胚胎正常生长发育和繁 殖，对幼鱼免疫功能造成一定损害。 （３）幼鱼比成年斑马鱼对ｌ，２，４ ＴＣＢ影响更 为敏感。 参考文献： ［１］杜青平，黄彩娜，贾晓珊．１，２，４ 氯苯对斑马鱼急性毒性及其 胚胎毒性作用［Ｒ］．北京：持久性有机污染物论坛２００８暨第 ｉ 届持久性有机污染物全国学术研讨会，２００８． ［２］ＩＡＹ Ｊ Ｐ，ＳＣＨＡＵＥＲＴＥ Ｗ，ＭＵＩ ＥＲ Ａ，ｅｔ ａＩ．Ｌｏｎｇ ｔｅｒｍ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ １，２，４ ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅ ｏｎ ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ ｐｌａｎｋｔｏｎ ｉｎ ａｎ ｏｕｔｄｏｏｒ ｒｏｏｄ ｅｌ—ｅｃｏｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ｂｕｌ１．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｃｏｎｔａｍ． Ｉｂｘｉｃｏ１．，１ ９８５，３４（５）： ７６１－７６９． ［３］ ｗｕ Ｓｈｉｊｉｎ，ＺＨＡＮＧ Ｈｕａｘｉｎｇ，ＨＵ Ｙａｎ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ １，２．４ ｔｒｉｃｈｌｏｒ０ｂｅｎｚｅｎｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｎｄ ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｅａｒｔｈｗｏｒｍ Ｅｉｓｅｎｉａ ｌ＇ｅｔｉｄａＥＪ］．Ｅｃｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｃｎ ｔａｌ Ｓａｆｅｔｙ，２０１ ２，７６（１）：１ ７５—１８１． ［４］ＰＯＥＩ ＳＴＲＡ Ｋ，ＢＡＫＫＥＲ Ｗ Ｗ，ＫＩ ＯＫ Ｐ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｐｈｏｓｐｂｏ ｒｙ ｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｂｙ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｓｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ｒ Ｊ］．Ａ ｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｌ９９７，１ ５１（４）：１１ ６：３ １ １ ６９． ［５］ＧＡＲＣＩＡ Ｓ Ｆ，ＤＥ ＬＩＭＡ Ｂ ｃ，ＴＩＥ ＯＢＡ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｄｅｆｅｎｓｅｓ ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｐａｃｕ（Ｐｉａｒａｃｔｕｓ ｍｅｓｏｐｏｔａ ｍｉｃｕ８）ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔＯ ｓｉｎｇｌｅ ａｎｄ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｃｏｐｐｅｒ ａｎｄ ｈｙｐｏｘｉａ ｅｘｐｏｓｕｒｅ［Ｊ］．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ Ｐａｒｔ Ｃ：Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００８，ｌ４７（１）：４３ ５１． ［６］ＧＡＳＰＡＲＯＶ Ｖ Ｓ，ＤＥＧＴＩＡＲ’Ｖ Ｇ．Ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｂｙ ｂｉｎｄｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｙｅ Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ ｂｒｉｌｌｉａｎｔ ｂｌｕｅ Ｇ一２５０［Ｊ］．Ｂｉｏ ｋｈｉｍｉｉａ（ＭＯＳＣＯＷ，Ｒｕｓｓｉａ），１ｇ； ，５９（６）：７６３－７７７． ［７］静天玉，赵晓瑜．用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯 酚测活 法＿Ｊ］．生物化学与生物物理进展，１ ９９５，２２（１）：８４ ８６． （下转第３６页） 环境污染与防治 第３４卷第６期 ２０１２年６月 ＥＲ Ａ ｊ，ｊＥＮＫ１ＮＳ Ｄ．Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒ ［２１］ ＳＣＨＵＩ｜ｕｓ ｒｅｍｏｖａｌ ｆｒｏｍ ｗａｓｔｅｗａｔｅｒ ｂｙ ｂｉｏｍａｓｓ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｈｏｓ— ｐｈｏｒｕｓ ｃｏｎｔｅｎｔｓ（ｐａｒｔ １）：ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｉｓｍｓ ｉｎ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ ｒｅｍｏｖａｌ ｓｙｓｔｅｍｓ ｗｉｔｈ ａｃｅｔａｔｅ ａｎｄ ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ ａｓ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅｓ［Ｊ］．Ｊ．Ｂｉｏｔｅｅｈｎｏ１．， ２００６，１ ２３（１）：２２ ３２． ［８］ＺＨＯＵ Ｙａｎ，ＭＡ Ｐｉｊｕａｎ．Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ＴＣＡ ｃｙｃｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｎｇ ｏｒｇａｎ— ｗｉｔｈ ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｍｏｄｅｌｓ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｒｅｓ．，２００３，７５ （６）：４８５—４９８． ｉｓｍｓ（ＰＡ（）ｓ）［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９，４３（５）：１３３０—１３４０． ［９］ＷＡＮＧ Ｘｉｕｈｅｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｋｕｎ，ＲＥＮ Ｎａｎｑｉ，ｅｔ ａ１．Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ｍｉｃｒｏｂｉａＩ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｓｕｃｃｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｎ Ａ／ｏ ＳＢＲ ［２２］ 马斌，彭永臻，王淑莹，等．强化生物除磷系统中聚磷菌菌群特 性［Ｊ］．化工学报，２ Ｏ】０，６１（５）：１２８２—１ ２８５． ＷＡＣＨＴＭＥＩＳＴＥＲ Ａ，ＫＵＢＡ Ｔ，ＶＡＮＩ ＯＯＳＤＲＥＣＨ Ｍ Ｃ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａ ｓｌｕｄｇｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ａｅｒｏｂｉｃ ａｎｄ ｓｅｎｔ ［２３］ ｄｕｒｉｎｇ ｓｔａｒｔ ｕｐ ｐｅｒｉｏｄ ｕｓｉｎｇ ＰＣＲ ＤＧＧＥ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｎｖｉ— ｒｏｎｍｅｎｔａ１ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００９，２１（２）：２２３ ２２８． ｔｒｉｆｙｉｎｇ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｓｌｕｄｇｅ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ｌ ９９７，３１（３）：４７ｌ一４７８． ｒ１（）］ ＣＲＯＣＥＴ ＦＩ Ｇ Ｒ，ＨＵＧＥＮＨ（）Ｉ ＴＺ Ｐ，ＢＯＮＤ Ｐ Ｉ ，ｅｔ ａ１．Ｉｄｅｎ— ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｎｇ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ ａｎｄ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｈｕａ，ＰＥＮＧ Ｙｏｎｇｚｈｅｎ，ＨＵＡＮＧ Ｈｕｉｊｕｎ，ｅｔ ａ１．Ｅｆ— ［２４］ ＧＵＯ Ｊｉｏｆ １６Ｓ ｒＲＮＡ ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｐｒｏｂｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅｉｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｑｕａｎｔｉｔａ— ｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｐｐ１．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏ１．，２０００，６６（３）：１１ ７５—１１８２． ｒ１１］ＷＯＮＧ Ｍ Ｔ，ＭＩＮＯ Ｔ，ＳＥＶＩＯＵＲ Ｒ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｉｎ ｓｉｔｕ ｉｄｅｎｔｉｆｉ－ ｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｓｔｒｕｃ— ｔｕｒｅ ｏｆ ｆｕｌｌ ｓｃａｌｅ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ ｒｅｍｏｖａｌ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ Ｊａｐａｎ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００５，３９（１ ３）：２９０１— ２９１４． ［ｉ２］ＺＥＮＧ Ｒ Ｊ，ＳＡＵＮＤＥＲＳ Ａ Ｍ，ＹＵＡＮ Ｚｈｉｇｕｏ，ｅｔ ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｉ— ｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ａｅｒｏｂｉｃ ａｎｄ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｐｏｌｙｐｈｏｓ— ｐｈａｔｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｎｇ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ［Ｊ￣．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇｉ— ｎｅｅｒｉｎｇ，２００３，８３（２）：１４０—１４８． ［１３］Ｉ Ｕ Ｈｕａｂｉｎｇ，ＯＥＨＭＥＮ Ａ，ＶＩＲＤＩＳ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｏｂｔａｉｎｉｎｇ ｈｉｇｈｌｙ ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ａｃｃｕｍｕｌｉｂａｃｔｅｒ ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｌｔｅｒｎａｔｉｎｇ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅｓ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ２００６．４Ｏ（２Ｏ）：３８３８—３８４８． ｒ１４］Ｉ ＯＰＥＺ ＶＡＺＱＵＥＺ Ｃ Ｍ，ＯＥＨＭＥＮ Ａ，ＨＯ（）ＩＪＭＡＮＳ Ｃ Ｍ， ｅｔ ａ１．Ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｔｈｅ ＰＡＯ ＧＡＯ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ：ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅ，ｐＨ ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９，４３ （２）：４５０－４６２． ｒｌ ５］ＨＥ Ｓ。ＧＵ Ａ Ｚ，ＭＣＭＡＨＯＮ Ｋ Ｄ．Ｆｉｎｅ—ｓｃａｌｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｂｅ ｔｗｅｅＤ．Ａｃｃｕｍｕｌｉｈａｃｔｅｒ ｌｉｋｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ｎ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ ｒｅｍｏｖａｌ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｓｌｕｄｇｅ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎ ｏ１．，２００６，５４（１）：１１１－１１７． ［１６］ ＫＵＢＡ Ｔ．ＶＡＮＩ （）ｏＳＤＲＥＣＨＴ Ｍ Ｃ Ｍ，ＨＥＩＪＮＥＮ Ｊ Ｊ．Ｐｈｏｓ ｐｈｏｒｕｓ ａｎｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｗｉｔｈ ｍｉｎｉｍａｌ ＣＯＤ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｂｙ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｎｉｔｒｉｆｙｉｎｇ ｄｅｐｈｏｓｐｈａｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｉｔｒｉｆｉｃａ ｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｔｗｏ—ｓｌｕｄｇｅ ｓｙｓｔｅｍ￣Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９６，３０（７）： １ ７Ｏ２ １ ７１０． ［１７］ Ｂ（）ＵＣＨＥＺ Ｔ，ＰＡＴＵＲＥＡＵ Ｄ，ＤＡＢＥＲＴ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｓｕｃｃｅｓｓｆｕ１ ａｎｄ ｕｎｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ ｂｉｏａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｍｏｎｉｔｏｒｅｄ ｂｙ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏ１．， ２０００，４１（１ ２）：６１ ６８． ［１８］ ＳＭ（）Ｉ ＤＥＲＳ Ｇ Ｊ Ｆ，ＶＡＮＤＥＲＭＥＩＪ Ｊ，ＶＡＮＩ （）０ＳＤＲＥＣＨＴ Ｍ Ｃ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｔｈｅ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｏ— ｌｏｇｉｃａｌ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ ｒｅｍｏｖａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ—‘ｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ ｐＨ ｉｎ—— ｆｌｕｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏ１．Ｂｉｏｅｎｇ．，１９９４，４３（６）：４６ｌ一４７０． ［１ ９］ 国家环境保护总局《水和废水监测分析方法》编委会．水和废 水监测分析方法［Ｍ］．４版．北京：中国环境科学出版社， ２００２． ［２０］ Ｉ Ｕ Ｈｕａｂｉｎｇ，ＯＥＨＭＥＮ Ａ，ＶＩＲＤＩＳ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｏｂｔａｉｎｉｎｇ ｈｉｇｈｌｙ ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ Ａｃｃｕｍｕｌｉｂａｃｔｅｒ ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｌｔｅｒｎａｔｉｎｇ ｃａｒｂｏｎ ｓｏｕｒｃｅｓ［Ｊ］．Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ２００６，４０（２０）：３８３８—３８４８． ・ ３６ ・ ｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｒｏｂｕｓｔ ｐａｒｔｉａｌ ｎｉｔｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ ｎｉｔｒｉｔｅ ｂｙ ｒｅａｌ～ｔｉｍｅ ａｅｒａｔｉｏｎ ｄｕｒａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ａｎ ＳＢＲ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｄｏｍｅｓｔｉｃ ｗａｓｔｅｗａｔｅｒ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２００９，４４（９）：９７９—９８５． ［２５］ ＫＩＳＨＩＤＡ Ｎ，ＫＩＭ Ｊ Ｈ，ＣＨＥＮ Ｍｅｉｘｕｅ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ０ｆ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ—－ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｄ ｐＨ ａｓ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ａｎｄ ｃｏｎ— ｔｒｏ［ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｆｏｒ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｒｅｍｏｖａｌ ｉｎ ｓｗｉｎｅ ｗａｓｔｅｗａｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｂｙ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｂａｔｃｈ ｒｅａｃｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｊ．Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｅｎｇ．， ２００３，９６（３）：２８５－２９０． 编辑：丁 怀 （修改稿收到日期：２０１１ １０ １０） （上接第３０页） ［８］徐镜波，袁晓凡，郎佩珍．过氧化氢酶活性及活性抑制的紫外分 光光度测定［Ｊ］．环境化学，１９９７，１６（１）：７３—７６． ［９］罗莉，李英文，林仕梅，等．半胱胺对草鱼酮体代谢、转氨酶和碱 性磷酸酶活性的影响［Ｊ］．饲料广角，２００３（１６）：３３—３５． ｒ１Ｏ］ ＢＯＷＤＥＮ Ｔ Ｊ．Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｆｉｓｈ ｂｙ ｔｈｅｉｒ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｆｉｓｈ ａｎｄ Ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ ｌｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００８， ２５（４）．３７３ ３８３． ［１１］ ＯＲＢＥＡ Ａ，（）ＲＴＩＺ ＺＡＲＲＡＧｏＩＴＩＡ Ｍ，Ｓ（）Ｉ Ｅ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｎ— ｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｅｎｚｙｍｅｓ ａｎｄ ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔ ｂｏｄｙ ｂｕｒｄｅｎｓ ｏｆ ＰＡＨｓ ａｎｄ ＰＣＢｓ ｌｎ ｂｉｖａｌｖｅ ｍｏｌ ｌｕｓｅｓ，ｃｒａｂｓ ａｎｄ ｆｉｓｈ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｕｒｄａｉｂａｉ ａｎｄ Ｐｌｅｎｔｚｉａ ｅｓｔｕａｒｉｅｓ （Ｂａｙ ｏｆ Ｂｉｓｃａｙ）［Ｊ］．Ａｑｕａｔ．Ｔｏｘｉｃｏ１．，２００２，５８（１／２）：７５—９８． ［１２］ ＦＡＩ ＦＵＳＨＹＮＳＫＡ Ｈ Ｉ，ＳＴ０Ｉ ＹＡＲ ０ Ｂ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｏｆ ｂｉｏ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｍａｒｋｅｒｓ ｉｎ ｃａｒｐ Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒｐｉｏ ｆｒｏｍ ｔｗｏ ｆｉｅｌｄ ｓｉｔｅｓ ｉｎ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｕｋｒａｉｎｅ［Ｊ］．Ｅｃｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓａｆｅｔｙ，２００９，７２（３）：７２９—７３６． ［１３］ ＳＷＡＩＮ Ｐ，ＮＡＹＡＫ Ｓ Ｋ．Ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｔｅｒｎａｌｌｙ ｄｅｒｉｖｅｄ ｉｍｍｕｎ； ｔｙ ｉｎ ｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｆｉｓｈ ａｎｄ Ｓｈｅｌｌｆｉｓｈ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００９，２７（２）：８９ ９９． ［１４］ ＷＡＮＧ Ｚｈｉｐｉｎｇ，ＺＨＡＮ（ Ｓｈｉｃｕｉ．ＴＯＮＧ Ｚｈｏｕ，ｅｔ ａ１．Ｍａｔｅｒｎａｌ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｔ ｈｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ Ｄａｎｉｏ ｒｅｒｉｏ［Ｊ］．Ｐｌｏｓ ０ｎｅ，２００９，４（２）：ｅ４４９８． ［１５］ ＨＡＮＩＦ Ａ，ＢＡＫＯＰＯＵＩ ＯＳ Ｖ，ＤＩＭ１ＴＲＩＡＤ１Ｓ Ｇ Ｊ．Ｍａｔｅｒｎａｌ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｏｆ ｈｕｍｏｒａｌ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｎｏｎ—－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ｐａｒａｍｅ—— ｔｅｒｓ ｔｏ ｓｅａ ｂｒｅａｍ（Ｓｐａｒｕｓ ａｕｒａｔａ）ｌａｒｖａｅ［Ｊ］．Ｆｉｓｈ ａｎｄ Ｓｈｅｌｌ ｆｉｓｈ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００４．１ ７（５）：４１ｌ ４３５． ［１６］ ＷＩＮＴＥＲ Ｍ Ｊ，ＶＥＲＷＥＩＪ Ｆ，ＧＡＲＯＦＡＩ （）Ｅ，ｅｔ ａＩ．Ｔｉｓｓｕｅ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ ｉｎ ｆｅｒａｌ ａｎｄ ｃａｇｅｄ ｃｈｕｂ（Ｌｅｕｃｉｓｃｕｓ ｃｅｐｈａｌｕｓ）ｆｒｏｍ ｒｉｖｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｗｅｓｔ Ｍｉｄｌａｎｄｓ，ＵＫ［Ｊ］．Ａｑｕａｔ．Ｔｏｘｉｃｏ１．，２００５，７３（４）：３９４—４０５． 编辑：陈泽军 （修改稿收到日期：２０１１－１２－０５）
