重访好题 名师力推 做了不后悔的名校名题
1．(2014·江苏押题卷Ⅰ)下列关于腐乳制作过程中后期发酵的叙述，不正确的是( )
A．后期发酵中腐乳风味形成与蛋白质的降解密切相关
B．后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程
C．盐的用量、酒的种类和用量、温度等均影响后期发酵
D．前期发酵过程中毛霉的生长情况对后期发酵无直接影响
答案：D
解析：前期发酵过程中毛霉的生长状况、盐的用量、酒的种类和用量、温度均影响后期发酵。
2．(2014·海南卷)已知泡菜中亚盐含量与泡制时间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚钠标准溶液、亚盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：
(1)请完善下列实验步骤：
①标准管的制备：用__________________________和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。
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②样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的______________________，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。
③将每个__________分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅__________的标准管，该管中亚钠含量即代表样品管中的亚盐含量，记录各样品管亚盐的含量。
(2)上图表示的是泡菜中__________________趋势。
(3)泡菜制作过程中产酸的细菌主要是__________(填“醋酸杆菌”或“乳酸菌”)。
答案：(1)不同浓度亚钠标准溶液 ②不同泡制天数的泡菜滤液 ②样品管 一致 (2)亚盐含量的 (3)乳酸菌
解析：(1)在亚盐的含量测定中，用不同浓度亚钠标准溶液和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管；用刻度移液管分别吸取一定量的不同泡制天数的泡菜滤液，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管；将每个样品管分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅相近的标准管，该管中亚钠含量即代表样品管中的亚盐含量，记录各样品管亚盐的含量。(2)据图可知，该图表示亚盐的含量随发酵时间的变化曲线。(3)制泡菜时使用的微生物是乳酸菌。
3．(2014·四川卷)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺
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隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。
图甲
图乙
(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_______四类，该实验所用的选择培养基
只
能
以
苯
磺
隆
作
为
唯
一
碳
源
，
其
原
因
是
______________________________________________________
________________________________________________________。
(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。
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(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_____________________________________
________________________________________________________。
(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是____________________，该实验设计是否合理？为什么？_____________________________
________________________________________________________。
答案：(1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖 (2)细胞素 母液 (3)接种环 ①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始 (4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理，缺少空白对照
解析：知识：本题考查微生物培养、纯化、植物组织培养、实验设计等知识。能力：考查对微生物培养基的组成成分、植物组织培养基的成分以及微生物纯化方法的理解能力、对实验设计的评价能力。试题难度：中等。(1)微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。根据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是探索其降解机制，因此，需要分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故选择培养时为了排除其他碳源的干扰，培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基需要添加生长素和细胞素，用于调节植物细胞再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培养后，发现第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接
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种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。(4)根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测，实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。
4．(2014·山东卷)玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：
(1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用________法或稀释涂布平板法计数。
(2)玉米胚芽油不易挥发，宜选用________法或________法从玉米胚芽中提取。
(3)玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。
(4)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的________催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、________和________三步。
答案：(1)碳源 显微镜直接计数 (2)压榨 萃取(注：两空可颠倒) (3)固定化酶 (4)(Taq) DNA聚合酶 (低温)复性(或退火) (中温)延伸
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解析：本题考查酒精生产、玉米胚芽油的提取、PCR技术等知识。能力：考查对生物技术实践的理解和应用能力。试题难度：较小。(1)玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物是葡萄糖，葡萄糖可为酵母菌的生长提供碳源。发酵过程中检测酵母菌数量可采用显微镜直接计数法或稀释涂布平板法计数。(2)不易挥发的玉米胚芽油宜选用压榨法和萃取法从玉米胚芽中提取。(3)固定化酶技术是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术。利用固定化酶技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。(4)利用PCR技术扩增目的基因时，需要用耐高温的
TaqDNA聚合酶催化。PCR每次循环包括(高温)变性、(低温)复性(或退火)、(中温)延伸三步。
5．(2014·课标卷Ⅱ)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过________灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是____________________________
_________________________________________________________。
(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
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(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质
解析：本题主要考查微生物的实验室培养等相关知识。能力：考查对微生物的实验室培养等知识的理解能力和对实验的推理、判断能力。试题难度：中等。(1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1 mL稀释液中平均有(39＋38＋37)/3＝38个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1＝380，则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100＝3.8×104，则每升水样中活菌数目为3.8×104×1 000＝3.8×107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图A和图B可以看出：A培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。
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