乙烯生物合成途径及其相关基因工程的研究进展(综述)

热带亚热带植物学撤　２００２。１　０（１）：８３　９８　Ｊｏｕ￣ｕｄ　Ｔｒ，ｑｄ￣＇ｄ　ｍｒ　５ｕｂｔｒｏｐｉｃｄ　Ｂｏｔａｎｙ　乙烯生物合成途径及其相关基因工程的研究进展（综述）　陈新建¨刘国顺　［１河南农业大学农学系陈占宽　郅玉宝　易明林　刘鸿先　蚵南部州４５０００２　２．ｆ　南农业科学院　点实验室，ｆｕＪ南郑州４５０００２；　３中国科学院华南植物研究所。广东广州５１０６５０）　摘要：在对植物激素乙烯生理功能作简要ｌ旦】顾的基础上着重对乙烯的生物合成途径中的关键酶，包括腺苷　蛋氨酸台成酶、ＡＣＣ合成酶及ＡＣＣ氧化酶的性质和基因的研究进展作了综述，同时展现出了与内源　乙烯生物台戒有关的基因Ｔ程的整体轮廓。　关键词：己烯：生物台成；基因Ｔ程　中图分类号：０９４６　８８５　７　文献标识码：Ａ　文章编号：１　００５—３３９５（２００２）０Ｉ一００８３—１６　Ａ　Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐａｔｈｗａｙ　ｏｆ　Ｅｔｈｙｌｅｎｅ　Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｒｅｌｅｖａｎｔ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ＣＨＥＮ　Ｘｉｎ—ｊ　ｉ　ａｎ　ＬＩＵ　Ｇｕｏ—ｓｈｕｎ。ＣＨＥＮ　Ｚｈａｎ—ｋｕａｎｚ　ＺＨＩ　ＹｕＩｂａ　ｃ　ｐ　Ｉ　ｐ　…ＹＩ　Ｍｉｎｇ－］ｉｎ２　ＬＩＩＪ　Ｈｏｎｇ－ｘｉａｎ３　ｔ１　Ｄｅｐ１．Ａ　榭忱ｈ　ＨｅｍＬ＇ｔ，４ｇｒｉｅｕｌｔｕｚｄ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ　４５０００２．Ｃｈｉｎａ；２．Ｈｅｍｍ　Ｋｅ）。Ｌｄ）　ｍ。　ｏｆ　｝Ｈｅｍｍ　４ｅｏｄｅｍ）ｏｆ　４ｇｒｉＩｔ＊Ｏｕｒｅ　ＳＨｅｍ　．Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ　４５０００２，Ｃｈｉｎａ；３　Ｓｏｕｔｈ　Ｃｈｉｎａ　ｒ¨　川　…　Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０６５０．Ｃｈｉｎａ）　ＩｌＬ￣ｔｉｍｔｅ　ｒ　Ｂｏ￣￣ｍｙ．ｔｈｅ　Ｃｈ　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ　ｒｅｖｉｅｗ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａ　ｂｒｉｅｆ　ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｈｏｒｍｏｎｅ，　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　Ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｅｓ　ｃｏｎｃｅｒｎｅｄ　ｔｈｒｅｅ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｅｎｚｙｍｅｓ：Ｓ￣ｄＶＩＳ，ＡＣＳ　ａｎｄ　ＡＣＯ　ｉｎ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎ—　ｔｈｅｔｉｃ　ｐａｔｈｗａｙ　ａｒｅ　ｈｉｇｈｌｉ曲ｔｅｄ　Ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ’ｓ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｒ　ｌｏｗｅｍ　ｆｂｙ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ａｒｅ　ｏｕｔｌｉｎｅｄ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒ￣：Ｅｔｈｙｌｅｎｅ；Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　乙烯（ｃ　Ｈ　）是五大类植物激素中结构最为简单的唯一的气态物质　它参与了从种子萌发到成　熟衰老的一系列生命过程的调节　（图１）。由于乙烯与植物的花、果的成熟和衰老有密切关系，控制　乙烯的生物合成就可延缓其衰老，因而有重要的商业价值，如抑制乙烯的产生可使许多重要农产　品的运输和贮藏更为方便，同时也延Ｋ了货架期，可以增值增效。随着植物生理生化及分子生物学　研究的深人，近年来对乙烯的生物合成途径及其基蚓工程的研究取得了一系列令人鼓舞的成果，　使之成为现代植物科学研究的热点之一　１乙烯的生物合成途径　阐ＨＪ］乙烯的生物合成途径不是一件容易的事　许多化台物都曾被作为前体物（ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ）提出，　如亚麻酸、丙醛、乙醇、丙烯酸、Ｂ一丙氨酸、Ｂ一羟基、Ｂ一羟基酸、延胡索酸、蛋氨酸等。真正的前体蛋氨　酸（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ）首先是由Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ和Ｍａｐｓｏｎ于１９６４年基于一个化学模式系统而提出的　，随后　他们　【叉证明　Ｃ．标记的蛋氯酸在苹果组织内转变成为　Ｃ标记的乙烯，由此可以看到蛋氨酸的确　可作为高等植物体内乙烯生物合成的前体物。蛋氨酸的ＣＨ　Ｓ基仍保存于体山，这对于维持体内蛋　收稿日期：２０００一Ｉ２－Ｉ５　接受日期：２０００—０５—２２　基金项目：围家娴草专卖局资助项目　维普资讯 http://www.cqvip.com

Ｂ４　热带亚热带植物学报　第１Ｏ卷　氨酸的水平是很重要的。因为与乙烯产生速率相　比较，正常情况下蛋氨酸含量是很低的。Ａｄａｍｓ和　Ｙａｎｇ证明　ｊ．蛋氨酸的硫被重新循环形成蛋氨酸，　以稳定乙烯形成的速率，蛋氨酸的ＣＨ　Ｓ基来源于　ｓ－腺苷蛋氨酸（Ｓ—ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ￣ＳＡＭ　ｏｒ　ＡｄｏＭｅｔ）．存在于甲硫腺苷（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ，　ＭＴＡ）中．然后迅速水解成为甲基硫核糖（ｍｅｔｈｙｌ—　ｈｉｔｏｆｉｂｏｓｅＭＴＲ）。ＭＴＲ中的ＣＨ３Ｓ经循环回到　蛋氨酸中。Ｙｕｎｇ等　证明ＭＴＲ中的核糖部分与　ＣＨ，Ｓ基一起转变成为蛋氨酸。整个循环的结果是　乙烯分子源于蛋氨酸的３，４位碳，ＣＨ　Ｓ基在循环　中保持不变，而蛋氨酸中的氨基丁酸由ＡＴＰ中的　核糖补充。因此最终形成乙烯分子的两个碳原子　实际上来自ＡＴＰ核糖残基的第４，５碳原子。此循　环称为蛋氨酸环，或称Ｙａｎｇ循环。　在乙烯生物合成途径中的一个重要的中间产物为１一氨基一１一羧基环丙烷（１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ—　ｌ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ，ＡＣＣ），是一种非蛋白氨基酸。乙烯由ＡＣＣ直接产生，其反应为：　ＡＣＣ＋Ｏ　———　Ｃ　Ｈ４＋ＣＯ２＋ＨＣＮ＋２Ｈ　Ｏ　图ｔ乙烯的主要生理效应０Ｉ　Ｆｉｇ　１　Ｍａｉｎ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　这里乙烯来源于ＡＣＣ的Ｃ．２和Ｃ一３，ＣＯ　来源于羧基。ＨＣＮ（氢氰酸）由ＡＣＣ的Ｃ—ｌ和氨基组成。　ＨＣＮ形成后会马上被代谢掉．它先形成Ｂ一氰丙氨酸，ｐ一氰丙氨酸继续代谢成为天冬氨酸或ｒ－谷氨酰　胺．　氰氨丙氨酸．从而清除了ＨＣＮ的毒害。因此即使在乙烯合成的高峰期也不会有ＨＣＮ的积累　。　ＡＣＣ除了ⅡＪ以形成乙烯外，还能被代谢成为丙二酰ＡＣＣ（Ｉ一（ｍａｌｏｎｙｌａｍｉｎｏ】ｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ一１一ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ，ＭＡＣＣ）。据分析在生理条件下ＩＶＩＡＣＣ难　逆转。但也有高水平的ＭＡＣＣ（烟草）在淹水条件下可　以转变成为ＡＣＣ的报道　．．ＭＡＣＣ的形成对解除过多乙烯的毒害可能具有一定的作用。　在乙烯生物合成过程中，有三个重要的酶已被鉴定和研究，这三个酶是：催化腺苷蛋氨酸形成　的腺苷蛋氨酸合成酶（ＳＡＭ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ，ＳＡＭＳ，ＡＴＰ：ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓ—ａｄｅｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｔｅｍｓｅ　ＥＣ２．５．１．６）；催　化ＳＡＭ生成ＡＣＣ的ＡＣＣ合成酶（ＡＣＣ　ｓ｝ａｌｔｈａｓｅ，ＡＣＳ或ＡＣＣＳ，Ｓ—ａｄｅｎｏｓｙｌ－ｋ　ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅａｎｅｔｈｙｌｈｉｔｏ。　ａｄｅｎｏｓｉｎｅ．１ｙａｓｅ，ＥＣ４．４．１．１４）；ＡＣＣ氧化酶（ＡＣＣ　ｏｘｉｄａｓ￣ＡＣＯ或ＡＣＣＯ）又称乙烯形成酶（ｅｔｈｙｌｅｎｅ—　ｆｏｒｍｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ，ＥＦＥ）．它催化ＡＣＣ形成乙烯。　１．１腺苷蛋氨酸合成酶（ＳＡＭＳ）　ＳＡＭＳ是植物体内物质代谢中一个重要的酶．催化Ｍｅｔ和ＡＴＰ形成ＳＡＭ。ＳＡＭＳ除了参与乙　烯合成外．还参与了多胺的生物合成　（图２）及甲酯化反应　。尽管它是乙烯生物合成途径中的第一　个酶，但是人们刘它的认识却较晚，从８０年代末期人们才注意到这个酶，因此对ＳＡＭＳ的研究远　没有ＡＣＳ和ＡＣＯ那样深入和广泛。ＳＡＭＳ是一个多基因家族＿＿　，其中一些基因是组成性表达，即　所谓管家（ｈｏｕｓｅ．ｋｅｅｐ）基因，而另一些基因的表达则受到了发育阶段或环境因素的严格控制。　ＳＡＭＳ的ｍＲＮＡ的水平在植物不同发育阶段中　及不同的植物组织中　有着显著的差异　同时在不同的环境因素中，ＳＡＭＳ的表达被提高，这些环境包括盐胁迫　真菌和细菌的诱发剂　维普资讯 http://www.cqvip.com

第ｌ期　陈新建等：乙烯生物合成途径及其相关基因Ｔ程的研究进展　８５　（ｅｌｉｃｉｔｏｒｓ）．臭氧处理及机械刺激　，所有这些都是已知的刺　激乙烯生成的因素　另外，植物激素也可以刺激ＳＡＭＳ的　转录。如ＧＡ，可以诱导麦胚和矮生豌豆突变体的ＳＡＭＳ　的转录，ＡＢＡ处理番茄可以诱导两种ＳＡＭＳ异构酶的产　生。Ｇｏｍｅｚ－Ｇｏｍｅｚ１１７］从豌豆中分离出了ＳＡＭＳ的基因　（ＳＡＭＳＩ和ＳＡＭＳ２基因）。这两个基因的编码区同源性很　高，但是在５’和３’的非编码区却有一定程度的变异。他们　…　用这两个非编码区作为特异的探针，来研究豌豆中　跗．ＭＳ１和ＳＡＭＳ２基因的表达情况。核酸酶保护分析披露　了它们不同的表达模式：ｓｄＭＳ１几乎在所有的组织（尤其　在根中）内都强烈表达．跗ＭＳ２表达较弱，即便在峰值时　也很弱。授粉后ＳＡＭＳＩ的表达则被特异地Ｉ：调　（ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ），而ＳＡＭＳ２是组成性地表达。用生长素处　图２乙烯和多胺生物合成之间的关系　Ｆｉｇ　２　Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ａｎｄ　理未授粉的子房，在子房的发育阶段ＳＡＭＳＩ也被上调，＾Ｄｃ：　ｉｎｅ　：ｄｅｃ　ａｘｙＩａｌｃ　接之而来的是乙烯的水平增加。在子房的衰老过程中Ｓ－ａｄｅｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ；ＤＦＭＡ：ｄｉｌｆｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌａｔｇｉｎｉｎｅ；　跗　ｓ，和ＳＡＭＳ２基因表达量均提高　用乙烯处理未授粉：　；　：兰　的子房也导致了ＳＡＭＳＩ　ｍＫＮＡ水平的提高，而蹦ＭＳ２　ＳＡＭＳ：ａｄｅｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｙａｔｈｅｔａｓｅ；ＳＰＤＳ：ｓｐｅｒｍｉ一　的表达却末发生变化。说明在子房衰老中诱导的ＳＡＭＳ２　ｄｉｎｅ　ｓｙ　与乙烯无关　原位杂交结果显示出跗ＭＳ　ｍＲＮＡ定位于发育果察的内果皮和衰老子房的胚珠中。　迄今．ｓＡＭＳ酶的结构和恬性调节尚未见报道．　．１．２　ＡＣＣ合成酶（ＡＣＳ）　萋１一｜∞　　ＡＣＣ合成酶的中文名字的译法值得商榷。它的英文名为ＡＣＣ　ｓｙｎｔｈａｓｅ（而不是ＡＣＣ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）：似乎应该译为ＡＣＣ合酶。但是在中文的文献中则多用ＡＣＣ合成酶，而未用ＡＣＣ合　酶。因此本文沿用了ＡＣＣ合成酶。　ＡＣＳ是植物体内乙烯生物合成的限速酶（ｒａｔｅ－ｌｉｍｉｔｅｄ），同时也是多基因家族。近年来人们对　ＡＣＳ的研究一直相当重视，已成为研究乙烯的重点。ＡＣＳ的种属差异，活性调节及基因序列等均在　研究之列，因此涉及ＡＣＳ研究的文献量是惊人的一　ｌ　２　ｌ纯化与鉴定　ＡＣＳ最早是在番茄的果皮组织中发现的　目。在多种情况下，它的活性了乙烯的形成，同时它　的活性也受到了乙烯及不同胁迫条件的刺激　９１。ＬｉＣＩ处理以及受伤可提高成熟番茄果皮内ＡＣＳ的水　平，常规方法和ＨＰＬＣ凝胶过滤得出这两种条件下所形成的ＡＣＳ同质，其分子量在５０—５７ｋ［　。用一　系列的色谱法将此酶纯化超过６　５００倍后，用双向凝胶电泳分析表明其分子量为５０　ｋＤ，纯化酶的　比话为４ｘｌ０　Ｕｎｉｔｓ　ｍｇ　蛋白（在３０￣Ｃ下每小时形成ｌ　ｎｍｏｌ的ＡＣＣ定义为ｌ　ｕｎｉｔ），为了更进一步研　究ＡＣＳ．Ｂｌｅｅｃｋｅｒ等１２＿。１生产出了ＡＣＳ的单克隆抗体．建立了灵敏的ＥＬＩＳＡ和ＲＩＡ分析法。免疫分析　和放射性标　已表明ＡＣＳ是在伤害组织中从头合成，确证了早期密度标记实验盼结果。在话体放射标　记的实验巾，单克隆抗体可以识别一个５６　ｋＤ的小多肽，同样在体外翻译中也产生了５６　ｋＤ的免疫　沉淀物　ｌ。结果说明ＡＣＳ在组织匀浆时被切割修饰。Ｒｏｔｔｍａｎｎ等１９９１年得出了类似的结果　。Ｖａｎ　维普资讯 http://www.cqvip.com

热带亚热带植物学报　第１０卷　Ｄｅｒ　Ｓｔｒａｅｔｅｎ等　基于氨基序列的数据提出ＡＣＳ羧基端将近８５个ａａ残基被切掉。　Ｐｒｉｖａ［［ｅ等１２１用ＮａＢ　Ｈ　还原醛亚氨的方法将酶与其辅酶（磷酸吡哆醛，ＰＬＰ）连接起来，用　ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析表明放射活性主要与５０　ｋＤ蛋白相联系。用单克隆抗体分离后再用ＮａＢ３Ｈ￣处理　的酶，得到了同样的结果１２１。用放射’｝生标记的Ａｄｏ（３．４－￣４Ｃ）Ｍｅｔ进行实验，发现放射性标记集中于　５０　ｋＤ的肽中。然而也有４５　ｋＤ和６７　ｋＤ的报道　】　从笋瓜提取纯化的ＡＣＳ与　述稍有差异。Ｈｙｏｄｅ等　从笋瓜受伤的果皮中分析到ＡＣＳ的活　性，经过纯化分离得到一个５０　ｋＤ的蛋　质，用番茄的抗体可以识别出一个５８　ｋＤ，说明笋瓜中这　个酶在提取和纯化过程同样被剪切，去陈一段　抗体能　４伤诱导的ＡＣＳ，却不能识别生氏素诱导　的ＡＣＳ，　兑明在笋瓜中有两个ＡＣＳ的同工酶，它们的差异足以引起免疫学的区分。　Ｓａｔｏ等　从笋瓜果实组织纯化到ＡＣＳ，经６　０００倍纯化后．用凝胶测其分子量为８６　ｋＤ，经ＳＤＳ—　ＰＡＧＥ测定为４６　ｋＤ，说明笋瓜ＡＣＳ是由两个同样亚基组成的二聚体　体外翻译，免疫沉淀，活体　标记等技术得到的ＡＣＳ，经过ＳＤＳ缓冲液煮沸后分子繁分别为５３和５５　ｋＤ，Ｐｊ＿一次说明此酶经过　了翻译后的加工处理　：此外，在用生长素处理的绿豆下胚轴及番茄　笋瓜、苹果等（Ｋｅｎｄｅ等１９９３）　多种植物中得到了ＡＣＳ，　１　２．２活性中心及催化机理的研究　利用磷酸吡哆醛作为辅酶的酶，通常通过　，Ｂ或Ｂ，　碳位消除而催化　氨基酸的消除性反应。　如果ＡＣＳ的情况也是如此，那么由ＡｄｏＭｅｔ向ＡＣＣ的转化，应包括一个丙烯菅氮酸的中间体。相反，　Ａｄａｍｓ等　提出通过　，　一消除反府，有一个环丙烯的中间产物。ＡＣＳ反应催化的　体化学过程证明　ＡｄｏＭｅｔ中Ｍｅｔ的碳Ｉ－．的Ｈ原子没有参与反应，说明ＡＣＣ的形成的确通过ｄ　－消除性反应　，　在ＡＣＣ合成酶Ｊ箍定的初期．Ｂｏｌｌｅｒ等　就注意到高浓度的底物可以降低酶的活性　Ｓａｔｏｈ等　注意到ＳＡ．Ｍ对ＡＣＳ的抑制是有时间性的，提ｍ高浓度的ＡｄｏＭｅｔ可以作为一个酶的抑制剂。　Ｓａｔｏｈ等　１提出在底物埘酶不可逆抑制中，至少ＡｄｏＭｅｔ的一部分共价地结合到ＡＣＳ上，放射性标　记的Ａｄｏ（３，４．１４Ｃ）Ｍｅｔ实验证明其属实　５０　ｋＤ的一个　白质被放射性所标记，这个蛋白质可以用　ＡＣＳ专一的单克隆抗体识别．进一步的宴验表明　ｄｏＭｅｔ的２一氨基－丁酸在酰陕活时结合到ＡＣＳ　上。鉴于此．Ｓａｔｏｈ和Ｙａｎｇ提出两个催化反府：通过　。　－消除反应形成ＡＣＣ和通过Ｂ，　一消除反应　形成一个高活性的中问体一乙烯　氨酸乙烯　氨酸共价地结合到ＡＣＳ上　基于动力学数据计算，　ｄ，　和Ｂ、　消除反应的比率为３００００：１。换言之，催化反应每生成３万分子的ＡＣＣ，便有一分子的　乙烯甘氢酸形成，－－￣）－子的酶被抑制　Ｓａｔｏｈ指出ＡＣＳ活性的这种抑制使得ＡＣＳ在植物组织中　迅速失活　然而至少有一种从番　叶片和培养细胞中胁迫诱导的ＡＣＳ没有这种不可逆的抑制。说　明不同的ＡＣＳ其作用机理可能有别．　．Ｙｉｐ等　ｉ用了两种力法标记ＡＣＳ的活性位点　成熟苹果ＡＣＳ经　述的ＮａＢ　Ｈ　还原醛亚氨的　方法使磷酸吡哆醛和酶问形成＿坝键　然后蛋白质用胰蛋白酶水解，用ＨＰＬＣ分离到被标记的氨基　酸序列为ＳＬＳ（Ｘｉ）ＤＬＧＬＰＧＦＲ　其中ｘｉ为未知的具放射性的ａａ衍生物　色渚和电泳表明这一来　知物的酸解产物与Ｎ　毗哆赖氨酸有相同的迁移率。　此上述的１２肽的第４位氨基酸为Ｌｙｓ（在　ＡＣＳ的Ｋ２７８）　ＳＬＳＫ序列是其他含吡哆醛晌酶的活性位点　成熟苹果ＡＣＳ的免疫纯化品，用上述　方法处理，同样得到１２肽，其中第４位具放射性标记的氨基酸又是一未知物（Ｘｉｉ），此１２肽经质谱　分析，经计算Ｘｉｉ的分子量等于用乙烯日　氢酸醛基化的Ｌｙｓ。这些结果说明此１２肽第４位的一ＮＨ　维普资讯 http://www.cqvip.com

第ｌ期　陈新建等：己烯生物合成途径及其相关基因丁程的研究进展　８７　通过醛亚氢与磷酸吡哆醛相连。也正是这个Ｌｙｓ的一Ｎｉｔ　通过醛化与ＡｄｏＭｅｔ的氨基丁酸相连，导　致该酶的不可逆失活。Ｙｉｐ等也标记了成熟番茄果皮组织受伤害诱导的ＡＣＳ。用（“Ｃ）ＡｄｏＭｅｔ标　记，分离到胰蛋白酶水解片段中同样含有此活性位点　苹果和番茄受成熟诱导的ＡＣＳ的两个ｌ２肽　完全一样．而诱导的ＡＣＳ的ｌ２肽第６位氨基酸由Ｍｅｔ代替了Ｌｅｕ。因此，伤害和成熟诱导了不同　类型的ＡＣＳ的同工酶。　ＡＣＳ划ＡｄｏＭｅｔ有严格的立体异构专一性一由于ＡｄｏＭｅｔ的Ｍｅｔ上的ｎ碳原子为不对称原　子，因此ＡｄｏＭｅｔ有Ｄ和Ｌ型之分，同时也有左旋右旋异构体。天然存在的都是（一）一Ｌ—ＡｄｏＭｅｔ。若　用非天然的（　）一Ｌ—ＡｄｏＭｅｔ作为底物．或用其外消旋体作为底物．ＡＣＳ对它完全无活性　。　近期，由于基因突变技术的应用．对酶的活性中心氨基酸有了更深入的认识。　“等　首先研究了番茄ＡＣＳ（４８６个ａａ）的几个缺臾突变体。从Ａｒｇ４２９开始缺失Ｃ一末端，该　酶完全没有了活性（缺失５６个ａａ）　从Ｃ一末端缺失４６—５２个ａａ残基后酶对底物的亲和力比野生　型的高出９倍　被截短的ＡＣＳ　单体形式出现（用凝胶过滤法测得其分子量为５２￣１　８　ｋＤ）话性更　高。在同样的条件下，野生型是以二聚体的形式出现这些结果表明ＡＣＳ的非保守的Ｃ・末端的存　在与否影响了二聚体的形成和酶的催化活性．．Ｗｈｉｔｅ等　‘ｉ在点突变研究中证明了苹果的ＡＣＳ存在　Ｌｙｓ－２７３，Ａｒｇ－４０７，和Ｔｙｒ一２３３点突变一其中Ｌｙｓ一２７３变为Ａｌａ的突变体，ＡＣＳ的活性完全丧失，说　明它催化了　碳位上质子的脱离　Ａｒｇ－４０７变为Ｌｙｓ亲和常数至少下降到５％，说明了与底物ｄ碳　位上的羟基结合有关。Ｔｙｒ＿２３３变为Ｐｈｅ导致了Ｋｍ值提高了２４倍，而最大反应速度不变，说明　Ｔｙｒ在活性中心只与辅酶ＰＬＰ的定向有关　为了决定氨基酸残基对酶的结构和功能的重要性，Ｔａｒｕｎ等［４ｏ１用了点突变技术和ＰＣＲ自由突　变技术对番茄的Ｌｅ—ＡＣＳ２同功酶进行了突变，突变件的筛选是通过Ｅ．ｃｏｌｉ的Ｉｌｅ营养缺损型菌株，　这个菌是～个表达了ＡＣＣ脱氨酶（来自Ｐｓｅｕｄｏｍｏａｃｚ￣ｓｐ．）的工程菌，它能在ＡＣＣ为唯一碳源的培　养基上生长　＝用这样的菌来鉴定ＡＣＳ的活性很方便。他们建立了一个突变文库，包括近ｌ　０００个　ＤＮＡ序列的突变克隆株　其中选用了３３４个单个　失意”（ｍｉｓｓｅｎｓｅ）突变体来进行分析。基于它们　在该Ｅ．ｃｏｌｉ中的活性将其分为三类一突变ｌ及突变２和野生型ＡＣＳ的表达水平相同，但是ＡＣＳ的　活性分别降低到野生型的０－５％和５％一５０％，突变３检测不到其蛋白质的表达和活性。这种方法的　建立为研究提供了极为方便的工具。Ｚｈｏｕ等　”用了突变技术对番茄Ｌ—ＡＣＳ２　Ａｒｇ２８６进行了位点　直接突变使之变为Ｌｅｕ，园二色分析表明突变体的整个三个－－－Ｎ结构和野生型没有明显的差异，荧　光色谱分析表明突变体对辅酶ＰＬＰ的亲和力则下降到４％一５％。动力学分析表明酶的转化数　（Ｋｅａｔ）由９　８５　Ｓ　。降低为８．２ｘ１０。Ｓ～，Ｋｍ值由１２０￣ｘｍｏＦＬ上升到７３０　ｍｏＩ，Ｌ，因此，突变体的整　个催化常数Ｋｃａｔ／Ｋｍ是对照的八千分之一。由此Ｚｈｏｕ等推测Ａｒｇ－ＮＨ！与ＰＬＰ的磷酸形成离子桥　对酶的活性影响极大，这些现象与在其他需ＰＬＰ的酶类中的研究一致。　此外，ＡＣＳ的结晶结构也在研究之中　１　ｌ　２　３　ＡＣＳ的基因及克隆　第一个ＡＣＳ基因序列是１９９０年Ｖａｎ　Ｄｅｒ　Ｓｔｒａｅｔｅｎ等从番茄果实的ｅＤＮＡ文库中分离得到的　。　Ｙｉｐ等　在Ｅ　ｃｏｌｉ中表达的ＡＣＳ的ｃＤＮＡ不能产生具酶活性的ＡＣＳ，但它的ｌ２肽活性位点的出　现，说明它是ＡＣＳ。用ＣＮＢｒ处理ＡＣＳ可以得到３个肽片段。除了全长ＡＣＳ的ｅＤＮＡ克隆外，Ｖａｎ　Ｄｅｒ　Ｓｔｒａｅｔｅｎ等还发表了具４２０　ｂｐ的部分核苷酸序列的克隆，它与全长ｅＤＮＡ克隆的对应区域显　维普资讯 http://www.cqvip.com

热带亚　带植物学报　第１０卷　示出８２％的相似性，这进一步表明番茄中ＡＣＳ的基因不止一个。接着Ｏ］ｓｏｎ等［４４１报道了第二条全　长的番茄果实ＡＣＳ　ｃＤＮＡ克隆，这两个克隆序列极为接近。之后Ｒｏｔｔｍａｎｎ等㈣又报道了番茄另外　ＡＣＳ的序列。Ｎａｋａｊｉｍａ等从笋瓜中得到了两个ＡＣＳ的基因序列及相应衍生的ａａ序列　ｌ蛔。所有　ＡＣＳ的编码区都有一定的同源性。ＤＮＡ序列的同源约为６０％，酶的ａａ序列变幅为４８％一９７％。截　止２０００年５月在Ｇｅｎｂａｎｋ注册的序列就多达１７０项之多。根据ＡＣＳ的进化关系，无疑还将有更　多的ＡＣＳ基因被分离测序　现已明确ＡＣＳ的多态性早于单双子叶植物的分歧时间。表１列出了部　分Ａｃｓ的基因。　表１部分已克隆到的ＡＣＳ基因　Ｔａｂｌｅ　Ｉ　Ｓｏｍｅ　ｏｆＡＣＳ　ｇｅｎｅｓ　ｃｌｏｎｅｄ　从ｃＤＮＡ克隆推断出的ＡＣＳ的一级结构表明不同来源的酶分子量极为接近，在５３－５８　ｋＤ之　问　Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹表明编码不同的ＡＣＳ基因的ｍＲＮＡ在１．８－２．１　ｋｂ之间　。不同的ＡＣＳ在分子内　存在着较高的同源性．而羧基端则差异很大。比较苹果、番茄和西葫芦果实中推断的ＡＣＳ氨基酸序　列，发现它们的相似性约８０％，有７个极为相似的高度保守区域，而且各区域的相对位置也大体相　同．这些保守区域至少有８个氨基酸残基．一致性高达８０％以上，保守区５被认为是活性中一ｔ５，它　含有一个赖氩酸残基．这个残基和结合辅酶ＰＬＰ并与依赖底物的酶的钝化有关。番茄果实ＡＣＳ基　因由４个外显子和３个内含子组成，它的５’－侧翼区含有与番茄基因Ｅ４的启动子共用的序列。Ｅ４　基因的表达由成熟或乙烯所诱导　应用ｃＤＮＡ克隆，人们可以研究两个重要问题，ＡＣＳ的调节发生在哪一水平上，发育、环境和　化学因素表达的是相同还是不同的ＡＣＳ基因？用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和ＲＮａｓｅ保护分析证明果实成熟、　花的衰败、外源信号的诱导（伤、生长素和细胞、乙烯）等明显地基于ＡＣＳ的ｍＲＮＡ的合成，即　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　陈新建等：乙烯生物合成途径及其相关基因Ｔ程的研究进展　在转录水平上的　。应用特异的探针，Ｏｌｓｏｎ等　表明了番茄果皮成熟和损伤诱导的ＡＣＳ的基　因有不同的表达。类似的情况有，番茄果实、细胞培养和胚轴表达的４种ＡＣＳ的基因也受到了成　熟、损伤和生长素的不同调节　伤诱导的番茄果实ＡＣＳ的转录产物受到了水扬酸（损伤信号传导的　抑制剂）和多胺（已知为乙烯生物合成抑制剂）的抑制　，两个ＡＣＳ基因在笋瓜中也受到了乙烯和　伤害的不同调节　。　也有报道ｔ￣６１ＡＣＳ基因的调节发生在转录后，即发生在成熟ｍＲＮＡ的形成过程中。　所有研究过的植物都含有一个以上ＡＣＳ基因　番茄至少有９个，其中６个为生长素诱导的，　绿豆下胚轴至少有５个，水稻３个，拟南芥５个等。近期，人们对同一植物不同ＡＣＳ表达的差异的　研究越来越多，使人们对此有了较为深入的认识。　Ｂｕｉ等研究了兰花授粉的信号激活了一连串的生理生化反应　，包括乙烯的生物合成。乙烯生物　合成的启动与加速伴随着３个不同的ＡＣＳ基因被调节。一个ＡＣＳ基因（　ＣＳＳ）受到乙烯的调节，　参与了授粉信号的放大及器官内的传播，另外的两个ＡＣＳ基因（Ｐ／ｕｄ－ＡＣＳ２和　ｎＭＣＳ３）最早是在柱　头和子房内表达　授粉后１　ｈ，Ｐｈａ！－ＡＣＳ２在花柱内积累，而　ｄＣＳ１授粉６　ｈ后才被探测出。Ｐｌｕｄ－　ＡＣＳ２和Ｐｈｄ－Ａ　ＣＳ３授粉后２　ｈ在子房内表达。外用生长素和用刺激模拟授粉，ＡＣＳ在柱头和子房中的　活性迅速提高，其中ＡＣＳ２和ＡＣＳ３也分别在柱头和子房中积累。这些结果提供了ＡＣＳ基因内源表达　的基本模式　授粉信号刺激后先表达的是Ｐｈａ／￣４　ＣＳ２和ＰＩｕＵ－Ａ　ＣＳ３，后表达是Ｐｈｄ－Ａ　ＣＳｆ　Ｏｅｔｉｋｅｒ等１９９７年研究了番茄悬浮培养中的７个ＡＣＳ基因嘲。他们用Ｒ］ｑａｓｅ保护分析方法研　究了用一个诱发剂后ＡＣＳ基因的转录情况。　Ａ　２、Ｌ　．ＡＣＳ５和Ｌ　１４ＣＳ６受这个诱发剂的强　烈诱导，相反ＬＥ－ＡＣＳ１Ｂ、　Ｅ．Ｊ４ＣＳ３和ＬＥ－ＡＣＳ４为组成性表达，ＬＥ－ＡＣＳｆＢ在所有的时间内都表达　出特别高的水平　因此，在番茄细胞内有两种类型的ＡＣＳ基因：诱导型和组成型。ＬＥ・ＡＣＳＩＡ没有　被探测到　在缺乏诱发剂的情况下尽管也出现ＬＥ．ＡＣＳ１Ｂ、ＬＥＡＣＳ２、ＬＥ．ＡＣＳ３、ＬＥ－ＡＣＳ４和ＬＥ．　ＡＣＳ５，但只有很少的乙烯产生。乙烯量的增加常常伴随着ＡＣＳ转录的积累，说明乙烯的产生是通　过ＡＣＳ基因在转录水平上的活化。然而，几种ＡＣＳ　ｍＲＮＡ的大量出现与乙烯形成诱发剂之间没　有严格的相关关系，因此他们指出ＡＣＳ的活性不仅只限于转录水平上的控制。　Ｍａｔｈｏｏｋｏ等研究了在Ｃｏ２胁迫下黄瓜果实ＡＣＳ基因的表达Ｎｔ。ｃ　对乙烯的诱导只与ＣＳ－ＡＣＳ１　的转录产物相一致，当ｃ　胁迫取消后，ＣＳ－Ａ　ＣＳｔ也消失，环已亚胺抑制Ｃ０２胁迫诱导的乙烯的产生，　但却引起较高ＣＳ－ＡＣＳ１转录产物的积累。较高浓度的环己亚胺还诱导了ＣＳ－Ａ　ＣＳ２和ＣＳ－ＡＣＳ３转录产　物的积累。在ｃ　和环已亚胺同时出现时ＣＳ－ＡＣＳ２转录产物的积累发生在１　ｈ内，３ｈ后消失。去掉　Ｃ　，ＣＳ－ＡＣＳ２却大幅度地增加。ＣＯ：胁迫诱导的乙烯肘这些∽ＣＳ２和ＡＣＳ３）基因的表达几乎没有效　应。结果说明ｃｓ　ＣＳｆ作为ＡＣＳ主要的基因在Ｃ０２胁迫时在黄瓜果实内负责提高乙烯的合成量。　柑橘表皮的颜色经过低温和高于１２．５℃的日变化处理后由绿变黄，乙烯在这个过程起了启动　的作用。为了研究颜色的变化是否因低温引起，Ｗｏｎｇ等从柑橘果皮中分离到两个低温诱导的　ＡＣＳ，ＣＳ－ＡＣＳｆ和ＣＳ－ＡＣＳ２两个基因　。ＣＳ－ｄＣＳｆ转录出１．７　ｋｂ的ＲＮＡ，编码４８３个氨基酸（Ｍｒ　５４　ｌ１５　ｐＩ６　６３），而ＣＳ．ＡＣＳ２转录出１．８　ｋｂ的ＲＮＡ　编码４７７个氨基酸（Ｍｒ　５３　２９１，ｐＩ６．７２），４￣Ｃ处　理变暖后两个基因在２．４　ｈ内都被迅速地诱导。室温２４　ｈ后，ＣＳ－ＡＣＳ　的ＲＮＡ回到冷处理前的水　平。冷诱导的乙烯和ＡＣＣ都可以测到。这两个基因还被伤害所诱导。蛋白质合成抑制剂环已亚胺　能促进这阿个转录产物在室温下的积累。３．３　ｋｂ的基因组分分析，ＣＳ－ＡＣＳ１由４个外显子和３个内　维普资讯 http://www.cqvip.com

热带亚热带植物学报　第１０卷　含子组成，这三个内含子很大（１．２　ｋｂ），明显地和线粒体ＤＮＡ同质。　ＡＣＳ启动子的结构也已开始研究。在不同的耐贮性的苹果品种中得到了不同的ＡＣＳ的等位　基因克隆。Ｓｕｎａｋｏ等　在成熟苹果（栽培种为Ｇｏｌｄｅｎ　Ｄｅｌｉｃｉｏｕｓ）中发现了一对等位基因Ｍｄ－ＡＣＳ１一Ｊ　和Ｍｄ－ＡＣＳ１－２　基因研究表明两者的编码区有７个不同的核苷酸，但只有一个ａａ被改变。一个１６２ｂｐ　的片段作为一个短的分散重复单元反向转座子被插在ＡＣＳ１—２的５　侧翼区，此区对应于ＡＣＳ１一　的一７８１处．定位于ＡＣＳ１—２　３　端的预期编码区Ｘｈｏｌ位点没有被发现（用ＲＴ—ＰＣＲ法），在Ｇｏｌｄｅｎ　Ｄｅｌｉｃｉｏｕｓ苹果成熟时只有ＡＣＳ１一　进行转录　ＤＮＡ凝胶印迹和ＰＣＲ分析清楚地表明苹果栽培品　种要么是ＡＣＳ１一Ｊ和ＡＣＳ１—２的杂合子，或者是每一种的纯合子。ＲＮＡ凝胶印迹分析表明Ｆｕｊｉ品种　为ＡＣＳＩ一２的纯合子（这种品种产生很少的乙烯，因此有较长的贮存期），在成熟期ＡＣＳ１—２的转录　水平很低。Ｙｏｏｎ等Ｉ　Ｉ研究了绿豆胚轴生长索诱导的ＡＣＳ基因（ＶＲ—Ａｃｓ６），它的启动子的活性在转　基因烟草中进行了检查。这个克隆含有１　６１２　ｂｐ长度的５’非翻译区，其编码序列由三个外显子和　两个内含子组成。基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交说明ＶＲ－Ａ　ＣＳ６是一个单拷贝基因。转录开始于翻译起点密　码上游的２３１－碱基处，此处的碱基为Ｃ　ＶＲ－ＡＣＳ６启动子含有与已鉴定的不同功能的生长素反应　元同质。为了证明这个启动子区域的响应性，用了１　７１９　ｂｐ的ＶＲ—ＡＣＳ６启动子和Ｇ　基因相连　接，然后将构建好的基因转人烟草。用生长素处理转基因植株的叶和黄化幼苗胚轴引起了Ｇ　基　因的强烈表达　ＣＴＫ提高了报告基因受生长素诱导后基因的表达量，而ＡＢＡ和乙烯则抑制这种表　达　ＶＲ－ＡＣＳ６启动子在转基因植物里的活动特点与在绿豆胚轴中的表达高度一致。组织化学染色　表明Ｇｗ活性可在用生长素处理的黄化或正常的幼苗中检测到。ＣＴＫ增加了生长素诱导的ＧⅢ的　染色强度和扩大了染色区，而ＡＢＡ和乙烯则恰好相反　综上所述ＡＣＳ基因的表达极为复杂，有不同的诱导方式，其调节主要发生在转录水平上．也可　在翻译水平｝‘，相信随着研究的深人，会有越来趟多ＡＣＳ的基因被克隆，基因的调节方式被披露，　基因的启动子被发现。　１．３　ＡＣＣ氧化酶（ＡＣｏ）　ＡＣＯ是乙烯合成途径中的最后一个酶。此酶最早被Ｙａｎｇ及其同事定名为乙烯形成酶　（ＥＦＥ）。直到９Ｏ年代初才阐明了这个酶的反应特征，它需要抗坏血酸和氧作为辅助底物　（ｃｏｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ），Ｆｅ　和ＣＯ　作为辅助因子，据此把ＥＦＥ称为ＡＣＣ氧化酶（ＡＣＯ）更适合。把外源的　ＡＣＣ供给植物组织就能使乙烯的生成量增加，表明这个酶是组成性的，不构成乙烯生物合成的限　速酶。　ｌ　３ｌ　ＡＣＯ基因的克隆　ＡＣＯ的鉴定远比ＡＣＳ困难得多，因为不能用通常的生物化学方法分离无细胞提取液中的　ＡＣＯ。用分子克隆的办法来鉴定ＡＣＯ，克服了直接从植物组织中提取ＡＣＯ的困难，使ＡＣＯ的研　究柳岸花明。虽然不能用传统的生化方法分离出这个酶，但是可以鉴定与成熟有关的ｃＤＮＡ克隆　的功能性表达。Ｇｒｉｅｒｓｏｎ等　。ｌ从不同成熟阶段的番茄中分离到了ＡＣＯ的ｍＲＮＡ，并使之在兔子网　状细胞裂解液系统中翻译。用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析翻译产物，他们发现有４—８个翻译产物的水平在成　熟过程中提高，其中一个是ＰＧ，而其他的功能不知　其中一个为３５　ｋＤ。Ｓｌａｔｅｒ等提取了成熟时番茄　Ｐｏｌｙ（Ａ）　ＲＮＡ，建立了ｃＤＮＡ文库　。用完全成熟的番茄和成熟的绿色番茄的ｅＤＮＡ作为探针进行　差异杂交筛选。用此方法鉴定出的与成熟有关的ｃＤＮＡ克隆，其中６个编码多肽的分子量与　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　陈新建等：乙烯生物台成途径及其相关基因Ｔ程的研究进展　９　Ｇｒｉｅｒｓｏｎ体外翻译的一致。其中一条克隆编码３５　ｋＤ的蛋白被命名为ｐＴＯＭＩ３。在番茄成熟过程中　和绿果及叶受伤后，编码３５　ｋＤ的蛋白质的ｍＲＮＡ的出现与乙烯合成量的增加相一致　用　ｐＴＯＭ１３作为探针在成熟、损伤未成熟的果实及受伤叶片的ＲＮＡ中筛选出的ｍＲＮＡ，体外翻译时　同样产生３５ｋＤ的蛋白．但在未受伤的果和叶中，却未得到相应的蛋白。于是Ｓｍｉｔｈ等提出ｐＴＯＭ１３可　能是一个与乙烯生物合成有关的酶［７３１　用ｐＴＯＭＩ３　ｅＤＮＡ作为探针对番茄的基因组ＤＮＡ进行的　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹表明，在基因组中有低拷贝数目的基因与ｐＴＯＭＩ３同质。鉴定ｐＴＯＭ１３是ＡＣＯ的第　个有突破性进展的是来自ｐＴＯＭ１３的转化实验　Ｈａｍｉｌｔｏｎ等将ｐＴＯＭ１３的１．１　ｋｂ片段在　ＣａＭＶ３５Ｓ启动子的控制下反义地转入番茄植物体内（７４１。在转基因植物体内，损伤的叶片或成熟的　一果实与ｐＴＯＭＩ３同质的ｍＲＮＡ的积累被大幅度降低，甚至难以测出。由于推测的ｐＴＯＭ１３的氨基　酸序列与黄烷酮一３一羟化酶的氨基酸有５８％的同源性．Ｈａｍｉｌｔｏｎ提出ｐＴＯＭ１３编码的是乙烯形成　酶，其催化模式与羟化酶类似，这与Ｙａｎｇ等根据由羟化酶通过Ｎ－羟基－ＡＣＣ作为中间体把ＡＣＣ　氧化成乙烯和氰基甲酸而提出的ＡＣＯ反应机理相一致　。最初试图在酵母中表达ｐＴＯＭ１３未成　功，因为在ｐＴＯＭ１３的插入片段５’。端缺少了两个碱基，故ｍＲＮＡ不能翻译，经过修正的ｃＤＮＡ克　隆导人酵母，成功表达了ＡＣＯ活性，抗环血酸可提高其活性，ＣｏＣＩ：及铁鳌合剂菲咯啉可抑制其活　性，从而证实ｐＴＯＭ１３翻译的产物是ＡＣＯ１７￣。几乎在同时，Ｓｐａｎｕ等　从病原激发因子处理的番茄　细胞中提取的ＲＮＡ，然后，注入到爪蟾卵细胞中，使其获得了转变ＡＣＣ为乙烯的能力，并且该酶的　动力学、需铁及立体专一性与所期望的真实的ＡＣＯ一致。反义的ｐＴＯＭＩ３和番茄细胞ＲＮＡ一起　注入到爪蟾卵细胞中，抑制了ＡＣＯ的表达，因此，指导合成ＡＣＯ的ＲＮＡ与ｐＴＯＭ１３有同源区，　从病原菌诱发因子所诱导而准备的ｃＤＮＡ文库中得到了与ｐＴＯＭ１３有高同源－睦的几个克隆株，其　中的一个为ｐＴＯＭ５，它所编码的ＡＣＯ与ｐＴＯＭ１３转录产物有８８％的同源性。　除了番茄外，从其他多种植物中获得了ＡＣＯ基因（表２）。像ＡＣＳ一样，ＡＣＯ也为多基因家族　所编码：如从番茄中已分离到了３个不同ＡＣＯ基因。用专一的基因探针研究表明，这些基因在成　熟果实和伤害叶片里表达有差异，不同植物ＡＣＯ基因的同源性比ＡＣＳ高．一般在蛋白质水平上　同源性都在８０％以上。　１．３　２　ＡＣＯ的生物化学性质　由于从ｐＴＯＭ１３推测的ａａ序列与黄烷酮一３－羟基化酶的序列类似，Ｖｅｒｖｅｒｉｄｉｓ等利用与提取　和分析黄烷酮一３－羟基化酶相同的条件进行试验　目，首先报道了从甜瓜果实匀浆中提取到具活性　的ＡＣＯ。这些条件包括在　下、加铁和抗坏血酸。这些条件使ＡＣＯ活性完全恢复，并具有一定的　立体专一性　离心分离时，酶存在于可溶性成分中。基于这些结果，Ｖｅｒｖｅｒｉｄｉｓ认为１７ｓ］，ＡＣＯ与２一氧　谷氨酸的双氧酶相类似，所有这些酶都要求Ｆｅ　和抗坏血酸。进一步研究表明，用凝胶过滤测得酶　的Ｍｒ为４１　ｋＤ，Ｋｍ为６０　ｇＭ，最适ｐＨ７．５。尽管类似于２一氧谷氨酸的双氧酶，但ＡＣＯ不要求２一　氧谷氨酸为辅基，ＡＣＯ反应机理可能类似干异青霉素合成酶和ＧＡ　３Ｂ一羟化酶，这些酶都需Ｆ　，　但不需要２－氧谷氨酸［７９１。Ｃｏ－￣￣ＳＨ一试剂、自由基淬灭剂和ＥＤＴＡ可以抑制ＡＣＯ的活性。ＥＤＴＡ可　能是鳌合介质中的自由铁离子。１，２－二羟萘是ＡＣＯ活性最强的抑制剂，因为它与铁有很强的结合　能力。１．１０－菲咯啉也是Ｆｅ　的鳌合剂，所以也可以抑制ＡＣＯ　２一氨基异丁酸为ＡＣＯ竞争性抑制　剂。氧化磷酸化的偶联剂（ＤＮＰ和ＣＣＣＰ）也能抑制酶活　维普资讯 http://www.cqvip.com

９２　热带亚热带植物学报　第１　０卷　在苹果的匀浆中ＡＣＯ与颗粒组分相结合Ｉ　。从苹果中纯化的溶解状态的ＡＣＯ表现出了均一　性，凝胶过滤法测得其分子量为３９　ｋＤ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量为３５　ｋＤ，表明它是一种单体。部　分的氢基酸序列与ｐＡＥ１２克隆片段推测的序列极为吻合　在苹果呼吸峰之前．用乙烯处理，不管在　体内或离体情况ＡＣＯ的活性都与乙烯的形成相吻合。纯化的ＡＣＯ绝对需要Ｆｅ　和Ｖｃ，但不需２一　氧谷氢酸。在许多植物中ＡＣＯ活性随ＣＯ　浓度的升高而提高。空气中的ＣＯ　浓度达０．５％时酶活　性达到其最大活性的一半．当ＣＯ　为２％一４％时．酶活达到最大。　Ｄｏｎｇ等建立了由ＡＣＣ到乙烯反应的化学计量　：　ＡＣＣ＋Ｏｚ＋抗坏血酸———　一Ｃ　２｝Ｌ—ＣＯ２＋ＨｃＮ＋脱氢抗坏血酸＋２Ｈ２Ｏ　ＡＣＯ氧化的确切机理仍有待于进一步研究。　１．３．３　ＡＣＯ在细胞中的定位　在乙烯生物合成途径未被阐明之前，人们都已广泛相信，至少一部分的乙烯形成酶应定位于　膜上，因为人们发现　乙烯生物合成对渗透溶液敏感，被Ｃａ＂　所稳定。当发现ＡＣＣ是乙烯生物合　成的直接前体后，两个与乙烯合成有关的特异催化酶被提出，ＡＣＯ在细胞中的定位被重新提出。在　番茄果实中ＡＣＳ为可溶性酶．并且没有证据说明它在其他植物中定位于膜上，而大量证据都证明　乙烯的生物合成要求具完整性的膜　Ｉ。Ｊｏｈｎ等提出ＡＣＯ的活性偶联质子的跨膜运输，乙烯的形成　要求维持一定的膜势　Ｉ。然而这个理论没有被实验所证实　，从蚕豆叶片分离到具有中心液泡的原　生质体或从原生质体分离到的液泡都能把外施的ＡＣＣ转变为乙烯，无液泡的原生质体丧失了　ＡＣＯ活性，当无液泡的原生质一但重新形成液泡，ＡＣＯ活性就恢复，说明ＡＣＯ可能定位于液泡膜　上［９３１。转基因的酵母经差速离心．发现ＡＣＯ是一种颗粒状，与１　８　０００￣ｇ的离心区段相联系。由于　ＡＣＯ是以颗粒形式出现，因此，ＡＣＯ可能与膜蛋白形成蛋白与蛋白的复合体。从ＡＣＯ氨基酸序列　上从１１　３—１　３４位（甚至到１４５）氨基酸有很大可能形成含有多个Ｌｅｕ的两性的ａ一螺旋体，定位于疏　水一端，这个假设的Ｌｅｕ拉链的出现在所有已知的ＡＣＯ中是保守的，这可　解释ＡＣＯ在酵母中　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　陈新建等：乙烯生物合成途径及其相关基因丁程的研究进展　９３　以颗粒状出现的原因，也可以解释早期认为ＡＣＯ与植物膜相联的原因。由于有不同的实验证据，　ＡＣＯ的定位至今尚末解决。可能是不同的ＡＣＯ有不同的定位。　此外、如前所述ＡＣＣ也可以在ＡＣＣ丙二酰转移酶（ＡＣＣ　Ｎ－ｍａｌｏｎｙｔｒａｓｆｅｒａｓｅ）的作用下代谢成　为丙二酰ＡＣＣ（１一（ｍａｌｏｎｙｌａｍｉｎ　ｏ）ｃｙｃｌ０ｐｒｏｐａｎｅ一１－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ，ＭＡＣＥ）。ＭＡＣＣ实际上是ＡＣＣ的　结合形态。ＭＡＣＣ的形成可调节植物体内乙烯的水平。植物体内乙烯的水平也可以通过乙烯的降　解来调节　由于本文主要集中于乙烯的生物合成途径，所以这些问题在此不拟详述。　２与乙烯有关的基因工程　通过阻断乙烯生物合成或使乙烯受体不　敏感从而达到延迟果实的成熟和花的衰败是　采后生理研究的主要目标。近年来由于对乙烯　分子生物学的研究逐步深人，使人们可以从多　种途径，多方位地控制乙烯以延迟成熟。用遗　传工程的方法达到这一目标、有五种不同的途　径（图３）　第一种途径就是通过ＳＡＭ水解酶　（ＳＡＭａｓｅ），分解ＳＡＭ，使之成为ＭＴＡ和高丝　氨酸；第二种途径就是用反义的ＡＣＳ、抑制　ＡＣＣ的产生，或用正义的ＡＣＳ，通过同源共抑　制而抑制内源的ＡＣＳ基因的表达；第三种途　径是反义的ＡＣＯ，从而不能产生乙烯，或用正　义的ＡＣＯ，通过同源共抑制而抑制内源的　ＡＣ０基因的表达；第四种途径就是ＡＣＣ脱氨　酶，将ＡＣＣ分解成为一酮丁酸和氨；第五种途径是乙烯受体突变体的应用，使植物对乙烯反应迟　钝或使乙烯信号中断，从而达到保鲜之目的　Ｚ，ｌ　ＳＡＭａｓｅ　ＲｅＧｅｐｔｏ　ｒ　ｍｕｔａｎｔ＠　图３用基因工程的方法控制乙烯台成的可能途径　Ｆｉｇ　３　Ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｐａｌｈｗａｙｓ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ａｎｄ　ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ　ｔｏ　ｅｎｈａｎｃｅ　ｓｈｅｌｆ－ｌｉｆｅ　ａｎｄ　ｍａｒｋｅｔ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆｆｒｕｉ￣ｏｒ　ｌｏｗｅｒｓ　ｆｂｙ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｍ舟　㈨一　通过控制ＳＡＭ（或ＡｄｏＭｅｔ）（乙烯生物合成中的第一步）来控制乙烯生物合成的试图没有成功，　因为至少有三种不同的ＡｄｏＭｅｔ合成酶，另外已知ＡｄｏＭｅｔ生成的抑制剂对哺乳细胞都是剧毒旧，但　通过分解ＳＡＭ，使台成途径形成短路，即不能台成ＡＣＣ，（图３中①）却是可能的。在大肠杆菌的Ｔ３中　有一种酶，称为ＡｄｏＭｅｔ水解酶（ＡｄｏＭｅｔａｓｅ或ＳＡＭａｓｅ）能够将ＳＡＭ分解成高丝氨酸和ＭＴＡ。由于　ＡｄｏＭｅｔ是乙烯台成的单一前体，它的分解直接降低了乙烯的生物合成。ＳＡＭ分解后形成的ＭＴＡ又　是ＡＣＳ的一个抑制剂，所以ＳＡＭａｓｅ的转入，起到了一箭双雕的作用，既减少了前体物又抑制了ＡＣＳ　的活性将ＳＡＭａｓｅ的基因转人植物中，转基因植物的花和果实的衰老得到了明显的抑制　。　２．２反义的ＡＣＳ　萋　Ｏｅｌｌｅｒ等１９９１年首先将ＡＣＣ基因反义地转人番笳，使番茄的成熟被推迟，外用乙烯又可以恢　复其正常成熟　。在其他的植物中也有用ＡＣＳ的反义基因，如苹果　等。此外，也有正义表达，利用　同源共抑制现象控制内源乙烯合成　。　维普资讯 http://www.cqvip.com

热带亚热带植物学报　第１　０卷　２．３反义的ＡＣ０　Ｈａｍｉｌｔｏｎ等　先把ｐＴＯＭ１３（ｉｔｐＡｃｏ￣／人番茄植株，获得了反义ＲＮＡ转化植株　该植株受伤叶　片和果实成熟过程的乙烯生成均受到明显的抑制，不转化的对照果实乙烯最高释放量为６．５ｎｍｏｌｇｈ’，　而转化植株果实仅为０．２５　ｎｍｏｌ　ｇ－…ｈ－。对照受伤叶片乙烯产量最大释放量为９　５　ｎｍｏｌ　Ｉｒ’，转化植　株仅为ｌ　０　ｎｍｏ］　ｈ－，。用反义的ＡＣＯ基因控制花果的成熟和衰老受到科学家的重视，在许多植物上　均有尝试，如在番茄　’ｏｃｔ、香瓜　ｌ、椰菜［１ａｚｌ、三角杨”　及康乃馨　等均有应用，取得了较为满意的效　果　２．４　ＡＣＣ脱氨酶　ＡＣＣ脱氨酶是从土壤的假单孢菌（Ｐ￣ｅｕｄｏｍｏｎｏｓ　ｓｐ．）中分离出来的一种可以将ＡＣＣ分解成为　酮丁酸和氨的酶。在ＡＣＣ为唯一碳源的培养基上筛选菌株，能正常生长的菌株中含有ＡＣＣ脱　氨酶　Ｋｌｅｅ等首先将此酶转入番茄植物中”　，获得了转基因的番茄果实，乙烯生物合成的抑制率达　９７％，从而果实成熟明显延迟。ＡＣＣ脱氨酶的优势之处在于它破坏ＡＣＣ，而不是靠反义抑制，因此，　它具有通用性，可用于不同的作物，扩大了使用范围。而反义的ＡＣＣ和ＡＣＯ只能用于同种植物，　如番茄中的ＡＣＳ和ＡＣＯ只能用于番茄。最近Ｊｉａ等人［１ｃ６．１　又从青霉菌（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）中得到了ＡＣＣ　脱氨酶，发现它与已发现的Ｐ．￣ｅ１１￣ｏｌｒｌｏｌ？ｏｓ　ｓｐ圾土星汉逊酵母（Ｈａ￣ｓｅｎｕｌａ　ｍｒｎⅢ）中的ＡＣＣ脱氨　酶分别有５０％和５４％的同源性　可见自然界中也存在着多种类型的ＡＣＣ脱氨酶，目前至少发现了　三种，但在植物中尚未发现。　２．５乙烯受体突变体　近年来乙烯受体的研究为利用基因工程控制植物对乙烯的感知，开辟了一条延迟花果衰老的　新途径［ＩＣ￣．ｔｅｇ］。拟南芥ｅｒｒ．　是一个乙烯受体的显性突变体。突变体是由于乙烯受体的氨基酸改变，使　之结合乙烯的能力下降（如前所述），从而阻碍了植物对乙烯信号的感知及传导途径，因而突变体　对乙烯不敏感。将ｅｒｒ・必的基因转人番茄和矮牵牛，使转基因植物的花果的成熟及衰老明显地推　迟，从而起到了保鲜之目的（图３中⑧）。　２．６其他　以上都是利用抑制乙烯．起到果实保鲜作用。但是，在农业生产上有时需要促进成熟，以提高品　质或促进早熟利于下茬作物的播种，如烟草成熟度好，品质就好，因此需要乙烯的正义表达。然而，　这方面的研究极为鲜见　笔者已构建了在Ｐｓａｇ　！控制下的兰花ＡＣＳ基因，并在烟草中得到表达Ｃ艾　章待发）、以图获得成熟度好的烟草新品种。此基因也可用于棉花等作物的催熟，有利于收获。　综上所述，近年来人们对乙烯的研究取得了长足的进展，乙烯生物合成途径中的关键酶基因已　相继被克隆、被鉴定　通过基因工程的方法人为乙烯的生物合成已初步显示出诱人的前景。相　信随着研究的不断深入，技术的不断完善，会有更多、更好的通过内源乙烯生物合成的转基因　的新品种出现，人类生活也将会因此而增色。　参考文献：　Ｉｌｌ　Ｊｏｈｎｓｏｎ　Ｐ　Ｒ　ＥｃｋｅｒＩ　Ｒ　Ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇａｓ　ｓｉｇｎａ￣ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ　ｐａｔｈ￣ａｙ：ａ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ【ＪＪ．Ａｎｎｕ　Ｒｅｖ　Ｇｅ　．１９９８．３２：２２７—　２５４　【２］Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ　Ｍ，Ｍａｐｓｏｎ　Ｌ　Ｗ　Ｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｌＪＪ　Ｎａｔｕｒｅ，１９６４，２０４；３４３～３４５．　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　陈新建等：乙烯生物合成途径及其相关基因丁程的研究进展　［３］３　Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ　Ｍ，Ｋｕｎｉｓｈｉ　Ａ，Ｍａｐｓｏｎ　Ｌ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆｅｔｈｙｌｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｅｏｎ　ｉｎ　ａｐｐｌｅ　ｄｓｓｕｅ　ｓｌｉｃｅｓ　ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ田Ｐｈｙ￣ｉｏ１．１９６６，４１：３７６－３８２　ｐｌａｎｔ　Ｊ　Ａｄａｍｓ　Ｄ　Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ　Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｍａｔａｂｏｌｆｇｍ　ｉｎ　ａｐｐ／￣ｔｉｓｓｕｅ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓ－ｄｅｎｏｓｙｌｏｍｅ￣ｉｏｎｉｎｅ　ａｓ　ａｌｌ　ｉｎｔｅｒｍｅｄｌｔｅ　ｉａｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ　ｏｆｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｔｏ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ【　ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ，１９７７，６０：８９２—８９６　［５］５　Ｙｕｎｇ　Ｋ　Ｈ，Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ，Ｓｃｈｌｅｎｋ　Ｆ　Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｏｍ　５－ｆｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏｒｉｂｏｓｅ　ｉｎ　ａｐｐｌｅ　ｔｉｓｓｕｅ【Ｊ】．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉ０ｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕａ，　１９８２，１０４：７７１—７７７　【６】ＹｉｐＷＫ，Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｒ．ｃｙａｎｉｄｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎ　ｒｅｌａｔｉｏｎｔｏ　ｅｔｈｙｌｅｎｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ　ｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓⅡ】Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９８８，９８：４７３－４７６．　【７］ＪｉａｏＸ三Ｐｈｉｌｏｓｏｐｈ－ＨａｄａｓＳ．Ｓｕ　ＬＹ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ　ｏｆ１－（ｍａｌｏｎｙｌａｎｍｉｎｏ）ｃｙａｌｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒ＇ｏｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄｔｏ１－ａｒｎｉｎｏｅｙｅｌ￣ｐｍｐａｎｅ　Ｉ－　ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄｉｎ　ｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｓ［ＪＩ．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｆｏ１．【９８６．８ｌ：６３７—６４【　ｆｇＪ　Ｈｅ时Ｏ．Ｐｅｒｓｓｏｎ　ＬＭｏｌｅｃｕｌａｒ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ｏｆｐｏｌｙａｍｉｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎ　ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ　ｃｅｌｌｓ『Ｊ］ＴｒｅｎｄｓＢｉｏｃｈｅｍ　Ｓｅｔ，１９９０　１５：１　５３～Ｉ　５８　【９】Ｔａｂｏｒ　Ｃ　Ｗ．Ｔａｂｏｒ　Ｈ　Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ａｘｌｅｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）ａｎｄ　５－ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｄｅｅａｒｂｏｘｙｌａｓｅ　［Ｊｌ　Ａｄｖ　Ｅｎｚｙｍｏｌ，１９８４，５６：２５１—２８２　【１　０】Ｔｈｏｍａｓ旺Ｓｕ￣ｉｎ－Ｋｏｒａｎ　Ｙ　ＳＡＭＳ］，ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｇｏｎｅ　ｆｏｒ　ｏｎｅ　ｏｆｔｈｅ　Ｓ－ａｘｌｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｌｏｎｉｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ　ｉｎ　ｓ　＾∞ｗ州　……　“　［Ｊｌ　Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，ｉ９８７　２６２：１６７０４—１６７０９．　Ｉ】Ｐｅｉｅｍａｎ　Ｊ，ＳａｉｔｏＫ　Ｃｏｔｔｙｎ　Ｂ　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎａｌｙｓ幅ｏｆｔｈｅ　Ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ　ｇｏｎｅｆａｍｉｌｙｉｎ　Ａｒａｂｉｄｏｐｘｉ￣　ｔｈａｌ６ａｕ￣【Ｊ＿Ｇｅｔｔ￣，Ｉ９８９，８４：３５９—３６９　［１２］ＷｏｏｄｓｏｎＷ　Ｒ．ＰａｒｋＫＹ，ＤｒｏｒｙＡ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｐａｔｈｗａｙｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓｉｎ　ｓｅｎｅｓｃｉｎｇ　ｃａｒｎａｔｉｏｎｆｉｏｗｅｒｓ朋Ｐｔａｍｔ　Ｐｈｙｓｉｏ１．１９９２，９９：５２６－５３２　【ｌ　Ｂｏｅｒｊａｎ　Ｗ，Ｂａｕｗ　Ｇ，Ｖ　Ｍｏｎｔａｇｕ　Ｍ　Ｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｐｈｅｎｏｔ）￣ｅｓ　ｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｂｙ　ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆＳ－ａｄｅｎｏｓｙｌ－Ｌ－ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｒｅｖｅａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ｐａｔｔｅｒｎｓ　ｏｆｇｅｎｅ　ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ　ｉｎ　ｔｏｂａ￣ｏ【　Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ，１９９４，６：１４０１—１４ｉ４　【ｌ４】ＩｚｈａｋｉＡ，ＳｈｏｓｅｙｏｖＯ，ＷｅｉｓＤ．Ａ　ｐｅｔｕｎｉａ　ｃＤＮＡ　ｅｎｃｏｄｉｎｇＳ－ａｘｌｅｎｏｓｙｌ—ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｙａｔｈａｓｅ【Ｊ】．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，Ｉ９９５，１０８：８４１—８４２．　【ｌ５】Ｄｅｋｅｙｓｅｎ　Ｒ　Ａ，Ｃｈｅｓ　Ｂ，Ｄｅ　Ｒｙｅｋｅ　Ｒ，ａｔ　ａｌ　Ｔｒａｎｓｉｎｔｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｉｎｔａｅｔ　ａｎｄ　ｏｒｇａｎｉｚｅｄ　ｔｉｓｓｕｅｓ　】Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ，１９９０，２：５９１一　∞２　［１６］Ｅｓｐａｒｔｅｒｏ　Ｊ，Ｐｉｎｔｏｒ－Ｔｏｒｏ　Ｊ　Ａ，Ｐａｒｄｏ　Ｊ　Ｍ　Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｉｍｅｔｈｉｏｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ　ｉｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ｓａｌｔ　ｓｔｒｅｓｓ【　Ｐ　ＬａｎｔＭｏｌ　Ｂｉｏ１．］９９４，２５：２ｔ７－２２７　【１７】Ｇｏｍｅｚ－Ｇｏｍｅｚ　Ｌ，Ｃａｒｒａｓｃｏ　Ｐ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　Ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｌ・Ｌ－ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ￣ｄｕｒｉｎｇ　ｐｅａ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ叨　Ｐｌｎｔａ　Ｐｈｙｓｉｏｉ，１９９８，１　Ｉ　７：３９７－４０５　［１８］Ｙｕ　Ｙ　Ｂ，Ａｄａｍｓ　Ｄ　Ｏ，Ｙａ岵Ｓ　Ｆ卜ａｍｉｎｏｃｙｃＩｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ￣ａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓ．ｅ．ａ　ｋｅｙ　ｅｎｚｙｍｅ　ｉｎ　ｅｔｈｙｌｏｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ】．Ａｒｃｈ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐ时　Ｉ９７９，１９８：２８０—２８６．　ｓｙｎｔｂａｓｅ　ｂｙ　ｉｔｓ　ｓｕｂｓｔｒａｔｃ，Ｓ－ａｄｅ￣ｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｆ＾　／ａ：１２ｔｈ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ　０ｎ　Ｐｌｎｔａ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｆｃ］Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ：Ｉｎｔ：Ｐｌａｎｔ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｓｕｂｓ￣ｎｅｅｓ　Ａｓｓｏ％１９８５，３６　【Ａｂｓｔｒ）　［２Ｏ】Ａｃａｓｔｅｒ　Ｍ　Ａ，Ｋａｎｄｅ　Ｈ．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｐａｒｔｉａｌ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９８３，７２：１３９—１４５　ｆ２１］ＢＩｅｅｃｋｅｒ　Ａ　Ｂ，Ｋｅｎｙｏｎ　Ｗ　Ｈ，Ｓｏｍｅｒｖ…ｅ　ｇ　Ｃ．Ｕ　ｏｆ　ｍｏｎｏｃＩＯｔｌａ；Ｉ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｉｉ１　ｔｈｅ　ｐｕｒｉｆｒ￣ｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ—ａｍｉｎｏ—　ｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ４－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ，ａｎ　ｅｎｚｙｍｅｉｎ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ『Ｊｊ　ＰｒａｅＮａｔｌ　Ａｅａｄ　ＳｃｉＵＳＡ，１９８６，８３：７７５５－７７５９．　［２２Ｊ　Ｅｄｅｌｍａｎ　Ｈ，Ｋｅｎｄｅ　Ｈ　Ａｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆｆ－ａｍｉｎｏｃｙｃｆｏｐｒｏｐａｎｅ—ｆ－ｃａｒｂｏｘｙｌ￣ｅｉｎ　ｖｉｔｒｏｔｒａｒＪｓｆａｔｉｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔａｎｄ饥　面　ｆｅ　ｌｄ　ｅｐｒｏｔｅｆｎ　ｉｎ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ｔｏｍａｔｏ　ｍ　Ｐｉｎａｔａ．Ｉ９９０，１　８２：６３２—６３８　【２３］ＲｏＩ￣ｍａｎｎ　Ｗ　Ｈ，Ｐｅｔｅｒ　Ｇ　Ｅ，０￣１ｌｅｔ　Ｐ　Ｗ，吼ａｉ　１－Ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ—ｌ－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓ￣ｉｎ　ｔｏｍａｔｏ　ｉｓ　ｅｎｃｏｄｅｄ　ｂｙ　ａ　ｍｕｌｔｉｇｅｎｅ　ｆａｍｉｌｙｗｈｏｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ＿ｓｉｎｄｕｃｅｄｄｕｒｉｎｇ　１ｔ　ａｎｄｆｌｏｒａｌ　ｓｅｎ￣ｃｅｎｃｅ［Ｊ　Ｊ＿ＪＭｏｌＢｉｏｌ，１　９９ｌ　２２２：９３７—９６１　【２４］Ｖａｎ　Ｄｅｒ　Ｓｔｒａｃｔｅｎ　Ｄ．Ｖａｎ　Ｗｉｅｍｅｅｒｓｃｈ　Ｌ＇Ｇｏｏｄｍａｎ　Ｈ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ　Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐａｒｔｉｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉａｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ－ａｍｉｎｏｃｙｅｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－　ｃａｒｂｏｘｙ／ａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅｆｒｏｍｔｏｍａｔｏｐｅｒｉｃａｒｐｌＪ】．Ｅｕｒ　ＪＢｉ￣ｃｈｅｍ，Ｊ９８９．１　８２：６３９—６４７　［２５】Ｖａｎ　Ｄｅｒ　Ｓｔｒａｅｔｓｎ　Ｄ，Ｖａｎ　Ｗｉｅｍｅｅｒｓｃｈ　Ｌ，Ｇｏｏｄｍａｎ　Ｈ　Ｍ，ｃｔ　ａ１．Ｃｌｏｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆｔｗ０　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃＤＮＡｓ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ　Ｉ－ａｍｉｎｏ－　ｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１－ｃａｒｂｏｘ＇ｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅｉｎｔｏｍａｔｏ［Ｊ］ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄ　ＳｃｉＵＳＡ，１９９０，８７：４８５９－４８６３　【２６】Ｐｒｉｖａｌｌｅ　ＬＳ，Ｇｒａｈａｍ　Ｊ　Ｓ．Ｒａ￣ｉ／ｏ－ｌａｂｅｌｉｎｇｏｆａｗｏｕｎｄ－／ｎｄｕｃｉＭｅ　ｏｙｒｉｄｏｘａｌ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｕｔｉｌｉｚｉｎｇｅｎｚｙｌｌｌｅ￣ｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒ　Ｌｔｓｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｓ　ＡＣＣ　ｓｙｎｔｈａ．ｓｅ　ｆＪ１　Ａｒｃｈ　Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙ￣，１９８７，２５３　３３３－３４０　【２７】Ｈｙｏｄｏ　Ｈ，Ｔａｎａｋａ　Ｙ，　Ｗａｔａｎａｂｅ　Ｋ．　Ｗｏｕｎｄ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　１－ａｍｉｏｃｙｃｌｎｏｐｒｏｐａｎｅ－ｌ－ｃａｒｂｏｘｙｌｔｅ　ｅｅｙｎｔｈａｓｅ　ｉｎ　ｍｅｓｏｃａｒｐ　ｔｉｓｓｕｅ　ｏｆｗｉｎｔｅｒ　ｓｑｕａｓｈ　ｆｒｕｉｔ＿Ｊ＿．Ｐｌａｎｔ　Ｃａｔｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，Ｉ９８３，２４：９６３－９６９　【２８】ＳａｔｏＴ．ＯｃｌｉｅｒＰＷ，ＴｈｅｏｌｏｇｉｓＡ　Ｔｈｅ１－ａｍｌｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｔｅ　ｓｙａｎｔｈａｓｅｏｆ０　－ｎｎｃｈｅｒｉｃｈｉ￣ｌ　ｃｏｌｔ，ａｎｄｐｒｉｍａｒｙｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　．ｎｍ　Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ，ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｅｘｐｒ￣ｓｉｏｎ　ＤＮＡ￣９ｕｅｍｃｅａｎａｌｙｓｉｓＩ　Ｊｊ＿ＪＢｉｏｉＣｈｅｍ，ｌ９９１，２６６：３７５２－３７５９　［２９】　Ａｄａｍｓ　Ｄ　Ｏ．Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ．Ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：ｉｄｅｎｔｉｉｔｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ－ａｍｉｎｏｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｓ　ｎ　ｉａｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｖｅｒｓｉｏｎ　ｏｆｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｔｏ　ｅｔｈｙｌｏｎｅＤ】ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄ　ＳｃｉＵＳＡ．１９７９，７６：１７０—１７４　口０１　Ｒａｍａｌｉｎｇａｍ　ＬｅｅＫＭ，Ｗｏｏｄａｒｔ　Ｒ　ｅｔａｌ　Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ＣＯＩＪｒＳｅｏｆｔｈｅｒｅａｃｔｉｏｎ　ｃａｔａｌｙｚｅｄｂｙｔｈｅ　ｐｙｔｉｄｏｘａｌ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｅｎｚｙｍｅ　Ｉ．删ｉｎｏｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂ￣ｘｙｌａｔ￣ｓｙｎｔｈａｓｅ＿Ｊ＇Ｐｍｃ　ＮａｔＩ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵｇＡ，Ｉ９８５．８２：７８２０—７８２４　维普资讯 http://www.cqvip.com

９６　热带亚热带植物学报　第１　０卷　］Ｂ０】】ｅｒ　Ｊ　Ｂ．ＨｅｒｎｅｒＲＣ，Ｋｅｎｄｅ　Ｈ　Ａｓｓａｙ　ｒ０ｒ　ａｎｄ　ｅｎｚｙａ＇ｎａｔｉｃｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆａｔｈｙｌｅｎｅ　ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ，Ｉ－ａｍｌｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎ￣－１・ｃａｒｂｏｘｙｌｌｃ　ａｃｉｄ　ｆＪＪ　Ｐｌａｎｔａ．１９７９．１４５：２９３—３０３　Ｓａｔｏｈ　Ｓ．Ｅｓａｓｈｉ　Ｙ　Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔ－ａｍｉｎｏｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ・Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌｔａｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｏｆａｔｉｏｔａｔｅｄ　ｍｕｎｇ　ｂｅａｎ　ｈｙｐｃ￣ｏｔｙｌ　ｓｅｇｍｅｎｔｓ　ｂｙ　ｉｔｓ　ｓｕｂｓｆｆａｔｅ，Ｓ－ａｄｅｎｏｓｙ１．Ｌ－ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｆＪＩ．Ｐｌａｎｔ　Ｃ￣１１　Ｐｈｙｓｉｏ１．Ｉ９８６，２７：２８５　２９Ｉ　［３３】Ｓａｔｏｈ　Ｓ．Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ　Ｓ－Ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｆｏｎｉｎｅ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｉｎｇ　ｏｆ　Ｉ－ａｍｉｎｏｃｙｃｆｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｉｓｏｔａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｏｍａｔｏ　ｆｒｕｉｔｓ　ｆＪＪ　Ｐｌｎａｔ　Ｐｈｙｓｆｏｔ，１９９８．８ｇ：ｌ０９—１　Ｉ４　［３４］Ｓｍｏｈ　Ｓ，Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ　Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｂｙ　Ｌ－ｖｉｎｙＩｇｌｙｃｉｎｅ　ａｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ－ｂａｓｅｄ　ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ｅｎｚｙｌｎｅ　ｂｙ　Ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｌ・Ｌ・ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ【Ｊ１　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，［９９９，９１：１０３６－１０３９　［３５】Ｓａｔｏｈ　Ｓ，Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ　Ｓｌ￣ｃｉｆｉｃｉ　ｏｆＳ－ａｄｅｎｏｓｙ］・Ｌ－ｍａｔｈｉｏｎｉｎｅｉｎｔｈｅｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｌａｂｅｌｉｎｇ　ｏｆＩ・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅｉｓｏｌａｔｅｄ仟０ｍｔｏｍａｔｏｆｒｕｉｔｓｆＩＩ．ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ．１９９９．２７１：１０７．【Ｉ２　［３６】Ｙｉｐ　Ｗ　Ｋ　Ｄｕｎｇ　Ｊ　Ｇ　Ｋｅｎｎｙ】Ｗ．ｅｔ　ａｌ　Ｃｈａｍｃｔｅｒｉａｚｔｆｏｎ　ａｎｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｓｉｔｅ　ｏｆ　Ｉ－ａｍｉｎｏｃｙｃｆｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎ￣ｅ｝Ｊ＿Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ．Ｉ９９０．８７：７９３０　７９３４　［３７】ＫｅｎｄｅＨ　Ｅｎｚｙｍｅｓ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｆ】Ｊ＿ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏ１．１９８９　９１：Ｉ一４　［３８】ＬｉＮ，Ｍａｌ￣ｏｏＡＫ　Ｄｅｌｅｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ｃａｒｂｏｘｙｌ・ｔｅｒｍｉｎａｌ　ｒｅｇｉｏｎ　ｏｆＩ・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ・Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ，ａ　ｋｅｙ　ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｈｅ　ｂｉｏ￣ｍｔｈｅｓｉｓ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ，ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎ　ｃａｒｏｌｙｔｉｃａｌ　ｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｅ　ｍｏｎｏｍｅｒｉｃ　ｅｎｚｙｍｅ【ＪＩ＋Ｊ　Ｂｆｏ　Ｃｈｅｍ，１９９４．２６９：６９０ｇ一６９１　７　［３９】ＷｈｉｅｔＭ　Ｆ．Ｖａ．￣ｌｕｅｚ　Ｊ．ＹａｎｇＳ　Ｆ．ａｔ　ａｌ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆａｐｐｔｅＩ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ・Ｉ　ｃａｒｂｏｘｙＬａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｚｅｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ：　Ｋｉｎｅｔｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆｗｉｌｄ・ｔｙｐｅａｎｄ　ａｃｔｉｖｅ－ｓｉｔｅｍｕｔａｎｔｆｏｒｍｓｆＪＩ　ＰｒｏｅＮａｔｌＡｃａｄ　ＳｃｉＵＡＳ，１９９４，９１：１２４２ｇ一１２４３２　［４０】Ｔａｒｕｎ　Ａ　Ｓ　Ｌｅｅ　Ｊ　Ｓ．Ｔｈｅｏｌｏｇｉｓ　Ａ．Ｒａｎｄｏｍ　ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　１・ａｍｉｎｏｃｙｃｆｕｐ　ｒｏｐａｎｅ・【－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈ￣：Ａ　ｋｅｙ　ｅｎｚｙｍｅ　ｉｎ科ｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［ＪＩ．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ．Ｉ９９ｇ．９５ｆ１　７）：９７９６　９ｇ０１．　【４Ｉ】Ｚｈｏｕ　Ｈ．Ｗａｎｇ　Ｈ　Ｗ．２７ａｕ　Ｋ　ｅｔ　ａｌ　Ｔｈｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｒｏｌｅｓ　ｏｆｃｏｎｓｅｒｖｅｄ　ａｒｇｉｎｉｎｅ　２８６　ｏｆａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ・Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｚｅ．　ｃｏ＠ｎｚｙＨｑｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ．ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ａｎｄ　ｂｅｙｏｎｄ｝Ｊ＿Ｐｌｎａｔ　Ｐｈｙｓｆｏｌ，２０００．Ｉ２１：９１　３－９１９．　［４２】Ｃａｐｉｔａｎｉ　Ｇ　Ｈｏｈｅｎｅａｔｅｒ　Ｅ．Ｆｅｎｇ　Ｌ．ｅｔ　ａｌ　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　１・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ・【・ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈ￣ｋｓｅ．ａ　ｋｅｙ　ｅｎｚｙｍｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ［ＪＩ．ＪＭｏｌ　Ｂｉｏ１．Ｉ９９９．２９４：７４５—７５６　【４３】Ｈｏｈｅｎｅｓｔｅｒ　ｅ　Ｗｈｉｔｅ　Ｍ　Ｆ．Ｋｉｒｓｃｈ　Ｊ　Ｆ．ｅｔ　ａｌ　Ｃｒｙ＇ｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐ　ｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　Ｘ－ｒｙｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｉ・ａｍｉｎｏｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ　１一ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈ￣ｆｒｏｍ　ａｐｐｌｅ，ａ　ｋｅｙ　ｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆｐｌｎａｔ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ［ＪＩ　Ｊ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏ．１９９４，２４３：５９４・５９９　｛４４】Ｏｌｓｏｎ　Ｄ　Ｃ．Ｗｈｉｔｅ　Ｊ　Ａ，Ｅｄｅｌｍａｎ　Ｌ’ｅｌ　ａｌ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｔ　ｇｅｎｅｓ　ｆｏｒ　Ｉ・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｉｎ　ｔｏｍａｔｏ　ｆｒｕｉｔｓ｝Ｊ＿Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，［９９【．８８：５３４０　５３４４．　［４５】Ｎａｋａｇｉｍａ　Ｎ，Ｍｏｒｉ　Ｈ，Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｋ．Ｍｏｔｃｅｕｌａｒ　ｃｌｏｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆａ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ　ＤＮＡ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ【－ａｍｉｎｏｃｙｎｔｏｐｒｏｐａｎｅ—Ｉ—　ｃａｒｂｏｘｙｔａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｚｅｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙｔｉｓｓｕｅｗｏｕｎｄｉｎｇ『ＪＪ　ＰｌｎａｔＣｅｌｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，１　９９０，３【：１０２１一１０２９．　［４６】Ｎａｋａｇｉｍａ　Ｎ，Ｍｏｒｉ　Ｈ，Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｋ　Ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆ　ａ　ｃｏｍｐｔｅｍｅｎｔａｒｙ　ＤＮＡ　ｆｏｒ　ａｕｘｉｎ・ｉｎｄｕｃｅｄ　Ｉ・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙＬａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｆｉａｔ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ＇ｔｈｅ　ｇｅｎｅ　ｂｙ　ａｕｘｉｎａｎｄｗｏｕｎｄｉｎｇ　ｐ】ＰｌａｎｔＣｅｌｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，Ｉ９９【，３２：ｌ１　５３一【Ｉ６３　ｆ４７】Ａｂｅｌ　Ｓ，Ｎｇｕ￣ｎ　Ｍ　Ｄ，Ｃｈｏｗ　Ｗ．ｅｔ　ａｌ　ＳＣ４．ａ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｉｎｄｏｌｅａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ—ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｇｅｎｅ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ　ｌ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏ・　ｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｉｎ　Ａ，　【　Ⅲｔｏｆｄｉ　ｒ￣ｉ　Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．ｅｘｐｒｅｓｉｏｎ　ｉｎ　Ｅｓｃｈｅｒｌｒｈｂｚ　ｎａｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｉｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏ　ａｕｘｉｎ　ｐ］．Ｊ　ＢｉｏｌＣｈｅｍ．Ｉ９９５．２７０：【９０９３一【９０９９　［４８】Ｖｏｇｅｌ　Ｊ　Ｐ，ＷｏｅｓｔｅＫＥ　ＴｈｅｏｌｏｇｉｓＡ．ｅｔ　ａｌ　Ｒｅｃｅｓｓｉｖｅ　ａｎｄ　ｄｏｍｉｎａｎｔｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｇｅｎｅ＾ＣＳ５　ｏｆｈｒａＭｄｎｐ￣ｉｓ　ｔｈｄｌｆ￣ｃｏｎｆｅｒ　ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ—ｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉ　ａｎｄ　ｅｔｈｙｌｅｒｉｅ　ｏｖｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ【ＪＪ　Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ．Ｉ９９８，９５：４７６６－４７７Ｉ　［４９】Ｂａｎｇａ　Ｍ，Ｓｌａａ　Ｅ　Ｊ，Ｂｌｏｍ　Ｃ　Ｗ　Ｐ　Ｍ．ｅｔ　ａｌ　Ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｕｎｄｅｒ　ｄｒａｉｎｅｄ　ａｎｄ　ｓｕｂｍｅｒｇｅｄ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　Ａ　ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆｔ￣ｏＲｕｍｅｘ　ｓｐｅｃｉｅｓｆＪＪ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏ１．１９９６．Ｉ１２：２２９—２３７　［５０】Ｃｏｈｅｎ　Ｅ，ＫｅｎｄｅＨ．Ｉｎ　ｌ：ｉｔ：ｏ　Ｉ・ａｍ［ｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－【－￣ａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓｙｎｔｈｍｅ　ａｃｔｉｖｉｙｔｉｎｉｎｔｅｒｎｏｄｅｓ　ｏｆｄｅ　ｐｗａ　ｒ　ｒｉｃｅ【』Ｊ　Ｐｌｎａｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，　１９８７，８４：２８２—２８６　［５Ｉ】Ｂｏｔｅｌｌａ　Ｊ　Ｒ．ＡｙｔｅｃａＲ　Ｎ．Ｆｒａｎｇｏｓ　ＪＡ．Ａｍｅｃｈａｎｉｃａｌ　ｓｔｒａｉｎ・ｉｎｄｕｃｅｄ【・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ・Ｉ－￣ａｔｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ［ＪＩ　Ｐｒｏｅ　ＮａｔｌＡｃａｄ　ＳｃｉＵＳＡ　１９９５．９２：Ｉ　５９５—１５９８　［５２】Ｙｉ　Ｈ　Ｃ．ｄａｏ　Ｓ．Ｌｅｅ　Ｊ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ　Ａｕｘｉｎ　ａｎｄ　ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ　ｒｅｇｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｔｈｒｅｅ　ｍｅｍｂｅｒｓ　ｏｆｔｈｅ　Ｉ・ａｍｉｎｏｃｙ￣ｌｏ・　ｐｒｏｐａｎｅ　ｌ・ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎｍｕｎｇ　ｂｅａｎｆＪ】ＰｌａｎｔＭｏｌＢｉｏｌ，Ｉ９９９，４１：４４３　５４　［５３］ＴｅｒａｉＨ　Ｂｅｈａｖｉｏｒｓ　ｏｆＩ・ｍａｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１・ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ（ＡＣｑａｎｄＡＣＣ　ｓｙｎｔｈａｚｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ　ｎｏｒｍ￣　ｎａｄｍｕｔａｎｔ｛～ａｎｄ　ｒｉｕ）ｔｏｍａｔｏｆｒｕｉｔｓ　ａｔ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ｓｔａｇｅｓｆＪＪ　Ｊ　Ｊｐｎ　ＳｏｃＨｕｎ　Ｓｃｉ．Ｉ９９３，６Ｉ：８０５—８１２　【５４】Ｏｌｓｏｎ　Ｄ　Ｃ．Ｏｅｔｉｋｅｒ　Ｊ　Ｈ，Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆａ　１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐ　ｒｏｐａｎｅ・Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆｔｏｍａｔｏ　ｐｌｎａｔｓ［ＪＩ　Ｊ　Ｂｉｏｔ　Ｃｈｅｍ．Ｉ９９５，７０：Ｉ４０５—１４０６　ｆ５５】Ｔｕｏｍａｉｎｅｎ　Ｊ，Ｂｅｔｚ　Ｃ，Ｋａｎｇ　ａｒｖｉ　Ｊ．ｅｔ　ａｌ　Ｏｚｏｎｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｔｏｍａｔｏ　ｐｌａｎｔｓ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓｆｏｒｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｅｎｚｙｍｅｓｆＪＪ　Ｐｌａｎｔ】，１９９７．Ｉ２：Ｉ１　５Ｉ一１１６２．　【５６】ＢｕｉＡＱ．Ｏ＇Ｎｅｉｌｌ　ＳＤ　Ｔｈｒｅｅ１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓ）￣ｔｈｍｅ　ｇｅｎｅｓ　ｒ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第ｊ期　陈新建等：乙烯生物合成途径及其相关基因Ｔ程的研究进展　９７　［５８ｌ　Ｉｍａｍｕｒａ　Ａ，Ｈａｎａｋｉ　Ｎ．Ｕｍｅｄａ　Ｈ．ｅｔ　ａｊ　Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｉｍｐｌｉｃａｔｅｄ　ｉｎ　Ｈｉｓ－ｔｏ－Ａｓｐ　ｐｈｏｓｏｈｏｔｓａｎｓｆｅｒ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｉｎ　ＡｒａＭｄｏｐｓ￣ｐｌ　ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄ　ＳｃｉＵＳＡ，ｊ９９８９５：２６９Ｉ一２６９６　，［５９ｌ　Ｓｃｈｌａｇｎｈａｕｆｏｒｅ　Ａｒｔｅｃａ　Ｒ，Ｐｅｌｔ　Ｅ　Ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｔｖ，ｏ１・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅＩ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓ￣ｇｏｎｅｉｎｌ＇ｅ￣ｏｏｌｌｓｅ　ｔｏ　ｂｉｏｔｉｃ　ａｎｄ　ａｂｉｏｔｉｃ　ｓｔｒｅｓｓｅｓｉｎ　ｐ０ｔｍｏｌｅａｖｅｓ＿Ｊｌ　ＰｌａｎｔＭｅｌＢｉｏｌ】９９７．３５：６８３—６８８　【６０ｌ　Ｓｕｎａｋｏ　Ｊ．Ｓａｋｕｒａｈａ　Ｗ，Ｓｏｎｄｅ　Ｍ　Ａｎ　ａｌｌｅｌｅ　ｏｆｔｈｅ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ－ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ＡＣＳ１　ｉｎ　ａｐｐｌｅ　ｆｒｕｉｔ　ｗｉｔｈ　ａ　Ｌｏｎｇ　ｓｔｏｒａｇｅ　ｌｉｆｅ　１９９９．Ｉ１９：Ｌ２９４一】３０４．　ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，　【６Ｉｌ　Ｌｅｌｉｅｖｒｅ　Ｊ　Ｍ．Ｔｉｃｈｉｔ　Ｌ，Ｄａｏ　Ｐ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｈｉｌｌｉｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔ　Ｌｃ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　Ｐａｓｓｅ－Ｃｒａｃｓａｎ　ｐｅａｒ　ｆａｕｌｔｓ　ＰｌａｎｔＭｏｌ　Ｂｉｏｌ，１９９７．３３：８４７—８５５　【６２】Ｔｒｅｂｉｓｔｈ　Ｔ，Ｓｔａｕｂ　Ｊ　Ｅ，Ｏ＇Ｎｅｉｌｌ　Ｓ　Ｄ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ　ｔ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎ￣ｌｉｎｋｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｆｅｍａｌｅ（Ｆ】　ｌｏｃｕｓｔｈａｔ　ｅｎｈａｎｏｅｓｆｅｍａｌｅ　ｓｅｘ　ｅｘｐｅｓｓ［ｏｎ　Ｌｎ　ｃｕｃｕｍｂｅｒ＿Ｊｌ　ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏ１．Ｉ９９７．１ｊ　３：９７８—９９５　【６３】Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｍ　Ｋ，Ａｈｂｏ　Ｓ．Ｕｅｎｇ　Ｐ　Ｐ　Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆｔｗｏ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｗｈｅａｔ１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅＩ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓ￣　ｇｅｎｅ　ｃＤＮＡｓ　ａｎｄｔｈｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｏｎｅｏｆｔｂｅｉｒｇｅｎｅｓｗｉｔｈ　ｒｏｏｔ－ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ『　Ｐｌａｎｔ　ＭｏｌＢｉｄ。Ｉ９９６．３１：１００９—１０１２．　［６，１ｌ　Ｋｅｎｄｅ｝Ｉ　Ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　Ａｎｎｕ　Ｒｏｙ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ　Ｐｌａｎｔ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ，Ｉ９９３。４４：２８３—３０７　【６５ｌ　Ｌｉ　Ｎ．Ｐａｒｓｏｎｓ　Ｂ　Ｌ’Ｌｉｕ　Ｄ．ｅｔ　ａｌ　Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆｗｏｕｎｄ．ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　ＡＣＣ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ　ｉｎ　ｔｏｍａｔｏ　ｆｒｕｉｔ　ｉｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｂｙ　ｓａｌｔｅｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｍｎｉｎｅ　１．Ｐｌａｎｔ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏ１．１９９２，Ｉ８：４７７￣．８７　【６６ｌ　Ｃｈａｐｐｅｌｌ　Ｊ，Ｈａｈｌｂｒｏｃｋ　Ｋ．ＢａｉｌｅｒＴ　Ｒａｐｉｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｐａｒｓｌｅｙ　ｃｅｌｌｓ　ｂｙ　ｆｏｒＩ酬ｅｌｉｃｉｔｏｒａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｔｏｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅａｌｍｍｏｎｉａｌｙａｓｅｌＪ＿Ｐｌａｎｔａ，】９９４．Ｉ６Ｉ：４７５－４８０．　【６７】Ｏｅｔｉｋｅｒ　ＪＤ　Ｄｉｆｏｆｍｎｔｉａｌｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｖｅｎ　Ｉ－ａｍｉｎｏｗｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－】－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｏ　ｓｙｎｔｈａｓ￣ｇｅｎｅｓ　ｂｙ　ｅｌｉｃｉｔｏｒｉｎ　ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｔｏｍａｔｏ｛Ｌｙｒｏｐｅｒ￣ｉｒ　ｒ…　ｕｌｅｎｔｕｍ）ＩＪ＿ＰｌａｎｔＭｏｌ　Ｂｉｏｌ，１９９７，３４：２７５—２８６　【６８ｌ　Ｍａｔｈｅｅｋｅ　Ｆ　Ｍ．ＭｗａｎｉｋＩ　Ｍ　Ｍ，Ｎａｋａｔｓｕｋａ　Ａ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ＣＳｔ，ＣＳ－ＡＣＳ２　ａｎｄ　ＣＳ－Ａ　ＣＳ３．ｔｈｒｅｅ　ｍｅｍｉ￣＇ｌＴ，ｏｆｔｈｅ　ＣＳ　ｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎ　ｃｕｃｕｍｂｅｒｆｒｕｉｔ　ｕｎｄｅｒｃａｒｂｏｎ　ｄｉｏｘｉｄｅ　ｓｔｒｅｓｓＩ］１＿ＰｌａｎｔＣｅｌ１．】９９９，４０：】６４一Ｉ７２　ｆ６９】Ｗｅｎｄ　Ｗ　Ｓ，Ｎｉｎｇ　Ｗ，Ｘｕ　Ｐ　Ｌ　Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆｔｗｏ　ｃｈｉｌｌｉｎｇ・ｒｅｇｕｌａｔｅｄ】－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ】・ｃａｒｈｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓ￣ｇｅｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｃｉｔｒｕｓ　ｆｒｕｉｔ　ｆＪｌ　Ｐｌａｎｔ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏ１．１９９９，４１：５８７￣５００　Ｆ０】Ｙｏｏｎ】Ｓ，ＰａｒｋＤ　Ｈ－Ｍａｒｔ　Ｈ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆａｎ　ａｕｘｉｎ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅｌ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓ￣ｇｏｎｅ，ＦＲ－ＡＣＳ６．　ｏｆｍｕｎｇ　ｂｅａｎ　ａｎｄ　ｈｏｒｍｏｎａｌｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｎｔｈｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｔｏｂａｃｃｏ【Ｊｌ　ＰｌｎａｔＣｅｌｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，】９９９．４０：４３】＿４３８　『７１ｌ　Ｇｒｉｅｒｓｏｎ　Ｓｌｔａｅｒ　Ａ，Ｓｐｅｉｒｓ】，ｅｔ　ａｌ　Ｔｈｅ　ａｐｐｅａｒａｎｃｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｓｅ　ｍＲＮＡ　ｉｎ　ｔｏｍａｔｏｅｓ：ｏｎｅ　ｏｆａ　ｓｅｒｉｅｓ　ｏｆｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｇｎｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｄｕｒｉｎｇ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ｌ　Ｊｌ　Ｐｉａｎｔａ．】９８５，】６３：２６３－２７Ｉ　【７２】Ｓｌａｔｅｒ　Ａ，Ｍａｕｎｄｅｒ　Ｍ　Ｊ，Ｅｄｗａｒｄｓ　ｔｅ　ａｌ　Ｉｓｏｌｔａｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅＤＮＡ　ｃｌｏｎｅｓ　ｆｏｒ　ｔｏｍａｔｏ　ｐｏｌｙｇａｌａｃｌｕｒｏｎ￣ｅ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ［－ｑ　ＰｌａｎｔＭｏｌ　Ｂｉｌａ，】９８５，５：Ｌ３７—１４７．　【７３】Ｓｍｉｔｈ　Ｃ　Ｊ　Ｓ，Ｓｌａｔｅｒ　Ａ，Ｇｒｉｅｒｓｏｎ　Ｄ　Ｒａｐｉｄ　ａｐｐｅａｒａｎｃｅ　ｏｆａｎ　ｍＲＮＡ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ￣ｍｈｅｓｉｓ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ　ａ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｏｆｍｏｌｅｃｕｌｒａ　ｗｅｉｇｈｔ　３５０００【Ｊ＿Ｐｌａｎｔａ，］９８６，１６８：９４—１００　［７４ｌ　Ｈａｎａｉｌｔｏｎ　Ａ　Ｊ，Ｌｙｃｅｔｔ　Ｇ　Ｗ，Ｇｒｉｅｒｓｏｎ　Ｄ　Ａｎｔｉｓｅｎｓ￣ｇｅｎｅ　ｔｈａｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆｔｈｅ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｉｎ　ｔｓａｎｓｇｅｎｉｃ　ｐｈｕｌｔ［　．Ｎａｔｕｒｅ，　１９９０，３４６：２９４—２ｇ７　ｌ　Ｙ“ｇ　Ｓ　Ｆ，ＨｏｆｆｍａｎＮ　Ｅ　Ｅｔｈｙｌｏｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｉｓｔ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｉｎ　ｈｉｇｈｅｒ　ｐｌａｎｔｓ【Ｊ１＿ＡｎｎＲｅｖＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏ１．１９８４，３５：１５５一Ｉ８９　［７６ｌ　ＨａｍｉｌｏｔｎＡ　Ｊ．ＢｏｕｚａｙｅｎＮＩ，Ｇｒｉｅｒｓｏｎ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｅｒａｔｏｍａｔｏ　ｇｅｎｅｆｏｒｔｈｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ・ｆｏｒｍｉｎｇ　ｅｎｚｙｎｌｅ　ｅｘｐｒｅｓｉｏｎｉｎ　ｙｅａｓｔ『Ｊｌ　Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ．１　９９１　８８：７４３４—７４３７　［７７】Ｓｐａｎｕ　Ｐ　Ｒｅｉｎｈａｒｄｔ　Ｄ，Ｂｏｉｌｅｒ　Ｔ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆｔｈｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ－ｆｏｒｍｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ　ｆｒｏｍ　ｔｏｍａｔｏ　ｂｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆｉｔｓ　ｍＲＮＡｉｎ　ｎ　ｂ￣ａｌ＊ｏｏｃ）￣ｅｓ　】ＥＭＢＯ　Ｊ，１９９Ｉ，１０：２００７—２０１　３　ＵＳ１　Ｖｅｒｖｅｒｉｄｉｓ　Ｐ，Ｊｏｈｎ　Ｐ　Ｃｏｍｐｌｅｔｅ￣ｃｏｖｅｒｙｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ－ｆｏｒｒｔｌｉｎｇｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖ［ｔｙ叭Ｐｈｙｔｅｃｂｅｍ，ｌ９９１，３０：７２５—７２７．　【７９】Ｓｍｉｔｈ』Ｊ　Ｖｅｒｖｅｒｉｄｉｓ　Ｐ　Ｊｏｈｎ　Ｐ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ・ｆｏｒｍｉｎｇ　ｅｎｚｙｎｌｅ　ｐａｒｔｉａｌｌｙ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｆｒｏｍ　ｍｅｌｏｎ『Ｊ１．Ｐｈｙｔｏｅｈｅｍ，　１９９２．３１　１４８５一】４９４　［ｓｏ】Ｄｏｎｇ　Ｊ　Ｇ，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ－Ｍａｃｕｌｅｔ】Ｃ．Ｙａｎｇ　Ｓ　Ｆ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉａｚｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃ＆ｒｂｏｘｙ］ｔａｅ　ｏｘｉｄａｓ￣ｆｒｏｍ　ａｐｐｌｅ　ｆｒｕｉｔ【　Ｐｒｏ￣Ｎａｔｌ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ　ＵＳＡ，】９９２，８９：９７８９—９７９３　【８１】Ｋｉｅｂｅｒ　Ｊ】．ＲｏｔｈｅｎｂｏｒｇＭ．ＲｏｍａｎＧ，ｅｔａ１．ＣＴＲ１，ａ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｏｆｔｈｅ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｒ￣ｐｏｎｓｅ　ｐａｔｈｗａｙｉｎ＾　．ｅｎｃｏｄｅｓ　ａ　ｍｅｍｂｅｒ　ｏｆｔｈｅＲａｆｆａｍｉｌｙ　ｏｆｐｒｏｔｅｉｎ　ｋｉｎａｓｅｓｌＪ＿Ｃｅｌｌ，１９９３．７２：４２７—４４Ｉ　【８２ｌ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　Ｐ　Ｊ，ＬｙｅｅｔｔＧＷ，Ｒｏｂｅ￣ｓ　Ｊ　Ａ，ｅｔａｌ　Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｊ・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ・ｃａｒｂｏｘｙｌｉｅ　ａｃｉｄ　ｏｘｉｄａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎ　ｓｈｏｏｔｓ　ｏｆｆｌｏｏｄｅｄ　ｔｏｍａｔｏ　ｐｌｎａｔｓ　ｒａｉｓｅｓ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ　ａｃｔｉｖｅｌｅｖｅｌｓ＿Ｊ　ＪｌＰｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏ］，１９９５，】０９：１４３５・Ｉ４４０．　ｆ８３Ｊ　Ｏ’Ｎｅｆｆ　ＳＤ、Ｎａｄｅａｕ　ＪＡ。ＺｈａｎｇＸ　Ｓ　Ｉｎｔｅｒｏｒｇａｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｇｅｎｅｓ　ｂｙ　ｐｏｌｌｉｎａｔｉｏｎｌ　Ｊｌ　ＰｌｎａｔＣｅ　ＬＬｊ９９３，５：４１９￣１３２　ｆ８４】Ｇｕｔ　ｓＭ，ＢｏｕｑｕｉｎＴ，Ｚｅｇｚｏｕｔｉ　Ｈ，ｅｔａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅ　ｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ１・ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎ￣－１－ｃｍ－ｏｂｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｇｅｎｅｓｉｎｍｅｌｏｎａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆｆｒｕｉｔ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ　ｎａ　ａｎｔｉｓｅｎｓｅ　ＡＣＣ　ｏｘｉｄａｓ￣ｇｏｎｅ　ｌＡ１．　Ｉｎ：　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆｔｈ￣Ｐｌｎａｔ　Ｈｏｒｍｏｎｅ　Ｅｔｈｙｌｅｎｅ［Ｍ】Ｄｒｄｒｅｃｈｔ．Ｔｈｅ　Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ：Ｋ］ｕｗｅｒ，Ｉ９９４　３２７—３３８　【８５】Ｈｙｏｄｏ　Ｈ．Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ　Ｃ，Ｍｏｒｏｚｕｍｉ　Ｓ，ｅｔ　ｌａ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉａｚｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ａｃｔｉｖ［ｔｙ　ｏｆ　Ｌ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｘｉｄ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热带亚热带植物学报　第１Ｏ卷　ｅｘｃｉｓｅｄ　ｍＨｎｇ　ｂｅａｎ　ｈ　Ｄ∞ｃｖｌｓ　ｍ　Ｐｌａｎｔａ，Ｉ９９４　ｌ９４：２２３—２２９　［８７ｌ　Ｃａｌｌａｈａｎ　Ａ　Ｍ，Ｍｏｒｇｅｎｓ　Ｐ　Ｈ，Ｗｒｉｇｈｔ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆＰｃｈ３１３（ｐＴＯＭｌ３　ｈｏｍｏｌｇ）ＲＮＡ　ａｎｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｄｕｒｉｎｇ　ｆｒｕｉｔ　ｓｏＲｅｎ￣ｎｇ　ａｎｄ　ｗｏｕｎｄｉｎｇ　ｏｆｔｗｏ　ｐｈｅｎｏｖｙｐｉｃａｌｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｅａｃｈ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ【Ｊ】Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏ１．１９９２，１００：４８２—４８８．　【８８ｌ　ＮａｋａｔｓｕｋａＡ，Ｍｕｒａｃｈｉ　Ｓ，Ｏｋｕｎｉｓｈｉ　Ｈ　Ｄｉｆｅ￣ｎｔｉａｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄｉｎｔｅｒｎａｌｆｅｅｄｂａｃｋ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆＡＣＳ　ａｎｄＡＣＯａｎｄ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｓ　ｉｎｔｏｍａｔｏｆｒｕｉｔｄｕｒｉｎｇ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ【Ｊ１　Ｐｌｎｔａ　Ｐｈｙｓｉｏ］，１９９８，Ｉｌ　８：１２９５一Ｉ３０５．　【８９ｌ　Ｃｌａｒｋ　Ｋ　ｂ　Ｌａｒｓｅｎ　Ｐ　Ｂ　Ｗａｎｇ　ｔ　ａｌａ　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ，４ｒａｂｉｄ．ｐｓｉ．￣ＣＴＲ］Ｒａｆ－Ｈｋｅ　ｋＬｎａｓｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＥＴＲ１　ａｎｄ　ＥＲＳ　ｅｔｈｙｌｎｅ　ｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ＿Ｊ】．ＰｒｏｃＮａｉｌＡｃｅｄ　ＳｃｉＵＳＡ．】９９８，９５：５４０１—５４０６　【９０］Ｌｆｅｂｅｎｎａｎ　Ｍ　Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆｅｔｈｙｌｎｅ【ｅＪＪ　Ａｎｎｕ】　Ｒｅｖ　Ｐｌｎｔａ　Ｐｈｙｓｉｏ］，Ｉ９７９，３０：５３３—５９１．　【９】ｌ　Ｊｏｈｎ　Ｐ　Ｔｈｅ　Ｃｏｕｐｌｉｎｇ　ｏｆｅｔｈｙｆｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｔｏ　ａｔｒａｎｓｍｅｒａｂｒａｎｅ　ｅｌｅｃｔｒｏｇｅｎｉｃ　ｐｒｏｔｏｎｆｌｕｘ　ＦＥＢＳＬｅａ，ｌ９８３，Ｉ５２：１４１一Ｉ４３．　［９２】Ｊｏｈｎ　Ｐ，Ｐｏｒｔｅｒ　Ａ　Ｊ　Ｒ，Ｍｉｌｌｅｒ　Ａ　Ｊ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆｔｈｅ￣ｔｈｙｌｎｅ－ｆｏｒｒａｉｅｎｇ　ｎｚｙｍｅ　ｍｅ￣ｕｒｅｄ　ｉｅＪｉｉＪｒ￣ａｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｃｅｌｌ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ　Ｊ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９８５，ｌ　２１：３９７—４０６　【９３ｌ　Ｍａｙｎｅ　Ｒ　Ｇ，Ｋｅｎｄｅ　Ｈ．Ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｖａｃｕｏｌｅｓ　ｏｆ　Ｖｉｃｉａ脚ｎ　Ｌ．－ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ　ｆｏｒ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｉｎｔｇｒｉｎｔｙ　１．Ｐｌｎｔａａ，　ｌ　９８６，】６７：Ｉ　５９　Ｉ６５　［９４ｌ　Ｆｅｆｆｏ　Ａ　Ｊ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｃｏｎｆｆｏｌ　ｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ　ｕｓｉｎｇ　Ｓ－ｅｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｌａｓｅ】９９５，Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　Ｐ＇ａｔｃｎｔ（Ｎｏ：　５４Ｉ６２５０）　ｒ９５】Ｏ￣［１ｅｒ　ＰＷ，ＴａｙｌｏｒＭＷ　Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｉｎｆｏｂｉｔｉｏｎ　ｏｆｔｏｍａｔｏｆｒｕｉｔ￣＇ｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｂｙａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ［Ｊ１．Ｓｃｉ，Ｉ９９Ｉ，２５：４３７－４３９　【９６】Ｄｏｎｇ　ＪＧ，ＫｉｍＷＴ．ＹｉｐＷＫａｔａｔ　Ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆａ　ｃＤＮＡ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ】－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎ￣￣ｌ—ｃａｒｂｏｘｙｔｉｃ　ａｃｉｄ　山嬲ｅ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　０ｆｉｔｓ　ｍＲＮＡ　ｉｎ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ａｐｐｌｅ　ｆｒｕｉｔ『Ｊ】Ｐｌａｎｔｚ￣Ｉ９９１，Ｉ　８５：３８－４５　【９７】Ｎａｇａｔａ　Ｍ，Ｍｏｒｉ｝Ｌ　Ｔａｂｅｉ　Ｙ．ｅｔ　ａｌ　Ｍｏｄｉｉｃａｔｆｉｏｎ　ｏｆｔｏｍａｔｏ　ｆｒｕｉｔ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ｂｙ　ｔｌｒａｎｓｆｏｒｒａａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｓｅｎｓｅ　ｏｒ　ａｎｔｉｓｅｎｓ￣ｃｈｉｍｅｒｉｃ　Ｉ－ａｍｉｎｏｅｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１一ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｓ３，ｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅｓ口】Ａｃｔａ　Ｈｏｒｔｉ．［９９５，３９４：２１　３－２】８．　【９８】Ａｔｋｉｎｓｏｎ　Ｒ　Ｇ，Ｂｏｌｉｔｈｏ　Ｋ　Ｍ，Ｗｒｉｇｈｔ　Ｍ　Ａ　Ａｐｐｌｅ　ＡＣＣ　ｏｘ　Ｊｄ￣￣ａｎｄ　ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｓｅ：ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｎａｌａｙｓｉｓ　ｉｎ　ｔｒａｎｇ．ｇｅｎｉｅ　ｔｏｍａｔｏ　ｌＪ１　Ｐｌａｎｔ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏ１．】９９８，３８：４４９－４６０　【９９】Ｈａｍｉｌｔｏｎ　Ａ　Ｊ，Ｂｒｏｗｎ　Ｓ，Ｈａｎ　Ｙ　Ｈ，ａｔ　ａｌ　Ａ　ｔｒａｎｓｇｅｎｅ　ｗｉｔｈ　ｒｅｐｅａｔｅｄ　ＤＮＡ　ｃａｕｓｅｓ　ｈｉ曲ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ，ｐｏｓｔ　ｔｒａｎｓｅｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＡＣＣ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｇｅｎ￣ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｔｏｍａｔｏ＿Ｊ１．Ｐｌａｎｔ　Ｊ，Ｉ９９８，ｌ　５：７３７—７４６　【Ｉｏｏ］Ｈｅｎｚｉ　Ｍ　ｘ，ＭｅＮｅｉ　ｌＤ　Ｌ．Ｃｈｒｉｓｔｅｙ　Ｍ　Ｃ，　ａｌ　Ａ　ｔｏｍａｔｏ　ａｎｔ［ｓｅｎｓｅ　ｌ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ　ｌ－ｅａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｘｉｄａｓ￣ｇｅｎｃ￣ｔｕｓｃｓ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　ｂｒｏｃｃｏｌｉ＿Ｊ］Ａｕｓｔ　ＪＰｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，ｌ　９９９，２６：ｌ７９一ｌ　８３．　［］０ｌ】Ａｙｕｂ　Ｒ　Ｇｕｉｓ　Ｍ，Ｂｅｎ　Ａｍｏｒ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆＡＣＣ　ｏｘｉｄａｓ￣ａｎｔｉｅｎｓｓｅ　ｇｅｎｅ　ｉｎｈｉｂｇｓ　ｒｉｐｅｎｉｎｇ　ｏｆｃａｎｔａｌｏａｐｅ　ｍｅｌｏｎ　ｆｒｕｉｔｓ［　．　Ｎａｔｕｒｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎ．１９９６　ｌ４：８６２一ｇ６６．　『】０２１　Ｈｅｎｚｉ　Ｍ　Ｘ　Ｃｈｒｉｓｔｅｖ　Ｍ　Ｃ，ＭｃＮｅｉｌ　Ｄ　Ｌ，ａｔ　ａ１　Ａｌ　础ｆ…肌ｒｈｉｚｏｇｅｎｅ￣ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｔ／ａ／ｉｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆｂｒｏｃｃｏｌｉ（Ｂｒａｓｓｉｃａ　删Ｌ　ｖａｒ．／ｍ／／￣．）ｗｉｔｈａｎａｎｔｉｓｅｎｓｅ】一ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎ￣Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｘｉｄａｓｅｇｅｎｅ【Ｊ】．Ｐｌａｎｔ　ＳｃｉＬｉｍｅｒ，１９９９，１４３：５５—６２．　［１０３】ＬｉＭＬ｝　Ｙ　Ｆ＿Ｌ　Ｌ，ａｔ　ａｌ　Ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆＡＣＣ　ｏｘｉｄａｓｅ　ｅＤＮＡａｎｄｉｔｓｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｂｙｉｔｓ　ａｌｌｔｉｓｅｎｓｅ　ＲＮＡｉｎ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　Ｐｏｐｎｌ￣ｄｅｌｔｏｉｄｅ．￣ｌＪ】．Ｆｏｔｅ￣Ｒｅｓ，１９９９，１２：２２３－２２８　［１０４ｌ　Ｓａｖｉｎ　Ｋ　Ｗ，Ｂａｕｄｉｎｅｔｔｅ　Ｓ　Ｃ，Ｇｒａｈａｍ　Ｍ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ　ＡＣＣ　ｏｘｉｄａｓ￣ＲＮＡ　ｄｅｌａｙｓ　ｃａｍａｔｉｏｎ　ｐｅｔａｌ　ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｉｆ］ＨｏｒｔＳｅｉ．１９９５．　３０：９７０—９７２　【１０５】Ｋｌｅｅ　Ｒ　Ｅ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｓｅｑｕｅｎｃｅ，ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ＡＣＰｇｅｎｅ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ　ｌ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｔｏｐａｎｅ　Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ　ｄｅａｍｉｎａｓ￣［Ｊ］Ｊ　Ｂａｃｔ￣ｔｉｏｌ，　ｌ９９ｌ　ｌ　７３：５２６０—５２６５　［［０６】ＪｉａＹ１，ＫａｋｕｔａＹ，ｇｎｇａｗａｒａＭ，ｅｔａｌ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆＩ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎ￣－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｂｙＰｅｎｂ＇ｉｌｌｉ￣ｃｉｔｒｉｒａｔｒａ　【　．Ｂｉｏｓｃｉ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，ｌ９９９，６３（３）：５４２—５４９　［ＩＯ刀ＪｉａＹ　Ｊ，【ｌｏ　Ｍａｔｓｕｉ｜Ｌ　ｅ１ａｌ　Ｌ－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－Ｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅｆ＾ＣＱ　ｄｅａｍｉｎａｓｅｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙＡＣＣ　ｓｙｍｈｅｓｉｚｄ　ｅａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄ　ｉｎ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｃｉｔｒｉｎｕｍ　ｉｎｔｒａｃ￣ｌｌｕｌａｒ　ｓｐａｃｅｓ＿Ｊ１．Ｂｉｏｓｃｉ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍ，２０００，￣ａ４（２）：２９９—３０５　［１０Ｂ】Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ　Ｊｑ　ＬａｎａｈａｎＭ　Ｂ，Ｙｅｎ　Ｈ　Ｃ，ａｔ　ａ１．Ａｎａｔｈｙｌｅｎｅ－ｉｎｄｕｃｉｂｋ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｏｆ　ｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ　ｅｎｃｏｄｅｄ　ｂｙ　卅咖　［　．　Ｓｃｉ．Ｉ９９５　２７０：ｌ　８０７一Ｉ　８０９．　［】０９］Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ　Ｊｑ　ＬａｒＬａｈａｎＭ　Ｂ，ＣｌａｒｋＤＧ，ｅｔ　ａｌ　Ａ　ｄｏｍｉｎａｎｔｍｕｔａｎｔｒｅｃｅｐｔｏｒｆｒｏｍ且　ｄ帅　ｃｏｎｆｅｒｓａｔｈｙｌｅｒｉｅｉｎｓｅｆａｋｉｒ　ｉｎ　ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ　ｐｌａｎｔｓ【Ｊ】Ｎａｔｕｒｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎ，Ｉ９７７，Ｉ５：５４４４—５４４７．