Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 中国兽医杂志２０１１年（第４７卷）第１Ｏ期 ３ 环介导等温扩增技术快速检测 猪细小病毒的试验 黄书林 一，付 萍 ，李佳禾 ，张跃伟 ，蒋 菲 ，张 侃 ，陈会玲 ，吴文学 （１．中国农业大学动物医学院，北京海淀１００１９３；２．中国牧工商（集团）总公司中牧研究院，北京丰台１０００７０） 摘要：利用环介导等温核酸扩增技术（ＬＡＭＰ），建立了一种灵敏、特异、快速的猪细小病毒（ＰＰＶ）检测方法。该方法针对 猪细小病毒非结构蛋白（ＮＳ一１）基因保守区域设计６条特异引物，在６３℃的等温条件下４５ ｍｉｎ即可完成反应。最低检测限量 为１Ｏ拷贝的ＰＰＶ目的基因，比常规聚合酶链式反应（ＰＣＲ）方法敏感１００倍，并具有良好的特异性。以钙黄绿素和Ｍｎ 作为 荧光指示剂，可快速、直观判定反应结果。通过对１４９份Ｉ 床样品进行检测比较，ＬＡＭＰ与ＰＣＲ检出阳性样本数分别为３３份 和２７份，表明ＬＡＭＰ方法阳性检出率高于ＰＣＲ。 关键词：环介导等温扩增（ＬＡＭＰ）；猪细小病毒（ＰＰＶ）；ＰＣＲ；荧光指示剂 中图分类号：￥８５２．６５。。９．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：０５２９—６００５（２０１１）１０—０００３—０４ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ ｂｙ ｌｏｏｐ—ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ＨＵＡＮＧ Ｓｈｕ—ｌｉｎ ，ＦＵ Ｐｉｎｇ ，ＬＩ Ｊｉａ—ｈｅ ，ＺＨＡＮＧ Ｙｕｅ—ｗｅｉ ，ＪＩＡＮＧ Ｆｅｉ ， ＺＨＡＮＧ Ｋａｎ ．ＣＨＥＮ Ｈｕｉ—ｌｉｎｇ 。ＷＵ Ｗｅｎ—ｘｕｅ （１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｉｎａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ［Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１９３，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｃｈｉｎａ Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００７０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｌｏｏｐ—ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ（ＬＡＭＰ），ａ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｗｉｔｈ ｓｉｘ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｒｉｍｅｒｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｒｅ— ｇｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ（ＮＳ一１）ｇｅｎｅ，ｔｈｅ ＬＡＭＰ—ｂａｓｅｄ ａｓｓａｙ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｍｐｌｅｔｅｄ ｗｉｔｈｉｎ ４５ ｍｉｎ ａｔ ６ ３℃．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔ ｏｆ ｔｈｅ ａｓｓａｙ Ｗ３Ｓ ｆｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅ １ ０ ｃｏｐｉｅｓ ｐｅｒ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄ ｐｌａｓｍｉｄ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｓｅｑｕｅｎｃｅ，ａｎｄ ｔｈａｔ １ ００一ｆｏｌｄ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ＰＣＲ ａｓｓａｙ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ， ｔｈｅ ＬＡＭＰ ｗａｓ ｈｉｇｈｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｏ ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ．Ａ ｍｉｘｔｕｒｅ ｏｆ ｃａｌｃｅｉｎ ａｎｄ Ｍｎ２＋ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｆｌｕｏｒｅｓ— ｃｅｎｔ ｒｅａｇｅｎｔ ｔＯ ｍａｋｅ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ＬＡＭＰ ｖｉｓｉｂｌｅ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ＬＡＭＰ ａｎｄ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａ１ ＰＣＲ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ａｓｓａｙｅｄ ｆｏｒ １４９ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ ｔＯ ｂｅ ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ａｓ ａ ｒｅｓｕｌｔ， ２２．１ （３３／１４９）ａｎｄ １８．１ （２７／１４９）ｏｆ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｏｎ ＬＡＭＰ ａｎｄ ＰＣＲ ａｎａｌｙｚｅｓ，ｒｅｓｐｅｃ— ｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈａｔ ＬＡＭＰ ｗａｓ ｍｏｒｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｔｈａｎ ＰＣＲ ｆｏｒ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＬＡＭＰ；ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ；ＰＣＲ；ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｒｅａｇｅｎｔ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＷＵ Ｗｅｎ—ｘｕｅ 猪细小病毒病是由猪细小病毒（ＰＰＶ）感染引起 环介导等温扩增技术（１ｏｏｐ—ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒ— ｍａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＬＡＭＰ）作为一种新兴的核酸扩 增技术 ，具有高特异性、高敏感性、快速、简便等优 点 。本试验针对猪细小病毒ＮＳ－１基因设计引 物，建立了猪细小病毒ＬＡＭＰ检测方法。 １材料与方法 母猪繁殖障碍的重要病原体之一，主要引起母猪发 生流产、死胎、畸形胎、木乃伊胎及不孕等。近年来， 猪细小病毒病有上升的趋势，并且该病常常与猪圆 环病毒２型、猪繁殖与呼吸综合征病毒，伪狂犬病病 毒等发生混合感染，给养猪业造成巨大的损失 收稿日期：２ＯｌＯ一１２一Ｏ２ 。 １．１ 毒株及病料来源 猪细小病毒７９０９株、 ＮＡＤＬ一２株，购自中国兽医药品监察所；猪繁殖与呼 吸综合征病毒标准株（ＶＲ ２３３２）、猪伪狂犬病病毒 Ｂａｒｔｈａ—Ｋ６１株、猪瘟病毒（Ｃ株）、弓形虫（ＲＨ株）的 核酸样品，由本实验室制备保存。疑似ＰＰＶ感染流 基金项目：农业部重点项目（２００８ Ｇ５７） 作者简介：黄书林（１９８２），男，硕士，从事畜禽传染病诊断研究 Ｅ—ｍａｉｌ：ｈｓｌ９８０２８５５＠ｓｏｈｕ．ｃｏｒｎ 通讯作者：吴文学，Ｅ ｍａｉｌ：ｗｕｗｅｎｘｕｅ＠ｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ４ 中国兽医杂志２０１１年（第４７卷）第１Ｏ期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 产胎儿组织病料采自北京周边地区、山东潍坊等地 规模化猪场。 １．２方法 用。 １．２．２ ＬＡＭＰ引物的设计在ＧｅｎＢａｎｋ下载了ＮＳ－ １基因全长序列，利用生物学软件ＤＮＡＳｔａｒ的 ＭｅｇＡｌｉｇｎ软件进行同源性比对分析，选取ＮＳ－１基因 同源性高即保守区域，使用在线ＬＡＭＰ引物设计软 件设计并筛选出ＰＰＶ特异的６条引物（表１及图１）。 １．２．１ 核酸ＤＮＡ的提取 采用基因组ＤＮＡ提取 试剂盒（ＴｒａｎｓＧｅｎ）提取ＰＰＶ ７９０９株、ＮＡＤＬ一２株 的细胞培养物和组织样本ＤＮＡ，于一８Ｏ℃保存备 表１所设计的引物 １９２１ ｇｃａａｃａａｔｇｇ ｃｔａｇｃｔａｔａｔ ｇ？ａｔｃａｔ－ｔｇｇ ｇｇａａａｔｇｔａｃ ｃｔｇａ Ｆｌｃ １９８１ ｇａｇｇａ罢ｅｅａ氇ａａａｔｇｃａａａｃ ｃｃｃａａｔａ童ａ ａｅａ ｃａａｃａｇ ａｃｔｃｔｃａｇａｔ ｔｔｃｃａｃａｔｃａ Ｂｌｃ ＬＢ Ｂ２ ２０４ｌ—ｇｔｇａａａａｃｔｔ ｃｇｃｃａｇｃｇｇａ ｃａａｃａａｃｔａｃ ｇｃ＆ｇｃａａｃｔｃ ｃａａｔａｃａｇ舂 磊夏蕊Ｂ３ ｃ ｇ ｔ ｇｇａｇｃｇａｇ ｃｃａａｃａ 图１猪细小病毒ＬＡＭＰ各引物的名称与顺序和各引物在基因组中对应的位置 注：Ｆ３、Ｂ３、ＬＦ、ＬＢ、ＦＩＰ（由Ｆ１ｃ和Ｆ２组成）和ＢＩＰ（由Ｂ１ｅ和Ｂ２组成）分别代表ＬＡＭＰ方法的６条特异性引物； ＊：ＦＩＰ与ＢＩＰ分别由Ｆ１Ｃ、Ｆ２与Ｂｌｃ、Ｂ２组成，中间用“ＴＴＴＴ”连接 １．２．３ ＬＡＭＰ反应的建立 参照日本荣研株式会 社生产ＬＡＭＰ试剂盒，优化后的２５ Ｌ反应体系 为：４ Ｌ Ｔｒｉｓ—ＨＣ１（１２５ ｍｒｎｏｌ／Ｌ），２ Ｌ ＭｇＳＯ４ （１００ ｍｍｏｌ／Ｌ），２肚Ｌ ＫＣｌ（１２５ ｍｍｏｌ／Ｌ），２止Ｌ （ＮＨ ）２ＳＯ （１２５ ｍｍｏｌ／Ｌ），０．４ ｕＬ Ｂｅｔａｉｎｅ（５０ １．２．４ ＰＣＲ反应 以猪细小病毒ＮＳ一１基因（Ｇｅｎ－ Ｂａｎｋ登录号：ＮＣ一００１７１８）为靶序列设计ＰＣＲ引 物。上游引物：５ 一ＴＡＧＧＡＴＧＣＧＡＧＧＡＡＡＧＡＣ一 ３ ，下游引物：５，＿ＧＧＡＧＴＴＡＡＧＴＧＣＡＧＧＴＴ ３ ， 扩增产物大小为４００ ｂｐ。２５ ｆｆＬ ＰＣＲ反应体系，包 括１２．５ Ｌ ２ｘ Ｔａｇ ＰＣＲ ＳｕｐｅｒＭｉｘ（ＴｒａｎｓＧｅｎ），上 ｏｏｌｔ／Ｌ），０．０２５“Ｌ ０．２ Ｔｗｅｅｎ ２０，ｄＮＴＰｓ（１００ ｍｍｏｌ／Ｌ）各０．３ ｆｆＬ，１２ Ｕ Ｂｓｔ ＤＮＡ聚合酶（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ），此外，体系中引物ＦＩＰ（４０ ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＢＩＰ（４ｏ ｍｍｏｌ／Ｌ）、Ｆ３（５ ｍｍｏｌ／Ｌ）、Ｂ３（５ 下游引物（２５ ｆｆｍｏｌ／Ｌ）各０．６ Ｌ，２ Ｌ模板ＤＮＡ， 加双蒸水至２５ Ｌ。反应条件为９４℃预变性５ ｍｉｎ， 之后９４℃变性４５ Ｓ，５４℃退火３０ Ｓ，７２℃延伸４５ Ｓ， 共３５个循环，最后７２℃延伸１０ ｍｉｎ。通过１ 琼脂 糖凝胶电泳分析反应产物。 ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＬＦ（２０ ｍｍｏｌ／Ｌ）、ＬＢ（２０ ｍｍｏｌ／Ｌ）各１ ｆＬ，２ Ｌ模板ＤＮＡ，加双蒸水至２５ Ｌ。 反应通过ＬＡ一２００实时浊度仪（Ｔｅｒａｍｅｃｓ，Ｊａ— ｐａｎ）进行实时监测。反应产物若经２ 琼脂糖凝胶 １．２．５ ＬＡＭＰ与ＰＣＲ的敏感性 本试验针对 ＬＡＭＰ和ＰＣＲ检测的共同扩增区域序列构建重组 质粒。以猪细小病毒ＮＡＤＬ一２株ＤＮＡ为模板，使 用上述１．２．４中的ＰＣＲ方法进行扩增反应。ＰＣＲ 反应产物（４００ ｂｐ）连接于ｐＥＡＳＹ—Ｔ１ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｖｅｃ— ｔｏｒ载体（ＴｒａｎｓＧｅｎ），构建含有目标片段的重组质 粒，经分光光度计法测定并计算质粒的拷贝数浓度， 电泳呈现典型“梯形”条带，则判定为阳性。置于 ＬＡ一２００实时浊度仪（日本）中６３℃恒温反应，可实 时监测反应液的浊度变化。以反应液浊度达到０．１ 判为阳性。反应４５ ｍｉｎ结束，以检量曲线的形式展 示反应结果。同时，反应产物还通过２ 葡萄糖琼 脂凝胶电泳进行检测。 进行１０倍连续倍比稀释，使质粒在反应体系中的分 ６ 中国兽医杂志２Ｏ１１年（第４７卷）第１Ｏ期 明，ＬＡＭＰ方法阳性检出率２２．１％（３３／１４９），高于 ＰＣＲ方法的阳性检出率１８．１ （２７／１４９）。 表２临床检测结果（ｎ一１４９） 察其颜色变化即可快速判定结果，这使得ＬＡＭＰ方 法在临床检验上具有广阔的应用前景，为早期诊断、 防制和净化提供了一种新方法。 参考文献： ［１］Ｗｏｏｄｂｉｎｅ Ｋ Ａ，Ｍｅｄｌｅｙ Ｇ Ｆ，Ｓｌｅｖｉｎ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｓｐａｔｉｏｔｅｍｐｏｒａｌ ｐａｔｔｅｒｎｓ ａｎｄ ｒｉｓｋｓ ｏｆ ｈｅｒｄ ｂｒｅａｋｄｏｗｎｓ ｉｎ ｐｉｇｓ ｗｉｔｈ ｐｏｓｔｗｅａｎ— 注：ＬＡＭＰ检出的阳性样本中包括全邵２７个ＰＣＲ阳性样本以 ｉｎｇ ｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍｉｃｗａｓｔｉｎｇ ｓｙｎｄｒｏｍｅＥＪ￣．Ｖｅｔ Ｒｅｃ，２００７，１６０： ７５１＿７６２． 及６个ＰＣＲ阴性样本 Ｋｉｍ Ｊ，Ｃｈａｅ Ｃ．Ａ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｓｕｂｐｏｐｕｌａ ３ 讨论 ｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｉｇｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｌｙ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ２ 目前已有常规ＰＣＲ、多重ＰＣＲ、Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ ａｎｄ／ｏｒ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＥＪ￣．Ｖｅｔ Ｊ，２００３，１６５：３２５—３２９． 和Ｎｅｓｔ—ＰＣＲ等方法检测细小病毒，且多选择高度 Ｎｏｔｏｍｉ Ｔ，Ｏｋａｙａｍａ Ｈ，Ｍａｓｕｂｕｃｈｉ Ｈ， ＆ ．Ｌｏｏｐ—ｍｅｄｉａｔｅｄ 保守的ＮＳ－１基因作为检测的靶基因ｌ＿７ ｊ。在本文 ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡＥＪ３．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ２０００，２８（１２）：６３． 中，我们同样选取了该基因上的保守区域设计了数 张跃伟，李旭妮，郭盼盼，等．荧光显色在环介导等温扩增 套引物，并通过阴性和阳性筛选，获得１套高效、特 （ＬＡＭＰ）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的应用［Ｊ］．农业生物 异ＬＡＭＰ引物，建立了最佳反应体系。 技术学报，２０１０，１８（３）：５０８—５１３． 试验发现，该方法能在６３ Ｃ的恒温反应４５ ｍｉｎ 李佳禾，李一婧，付萍，等．猪胸膜肺炎放线杆菌环介导等温扩 增检测方法的建立与应用［Ｊ］．农业生物技术学报，２００９，１７ 即可判定结果。敏感性试验表明，ＬＡＭＰ方法最低 （６）：９４８—９５３． 能检出１Ｏ个拷贝数的ＰＰＶ基因组，相当于０．１ 郭盼盼，黄书林，张跃伟，等．环介导等温扩增技术快速诊断猪 ＴＣＩＤ５。／ｌｏｏ“Ｌ，比常规ＰＣＲ方法高１００倍，与先前 肺炎支原体ＥＪ］．农业生物技术学报，２０１０，１８（４）：８２２—８２６． 报道的该病原的ＬＡＭＰ方法灵敏度相当＿＿８ ］。对多 Ａｎａ Ｉ Ｒ，Ｊｕａｎ Ｊ Ｍ，Ｅｓｍｅｒａｌｄａ Ｄ Ａ， ｎ ．Ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒ～ 种病原基因组进行检测，无交叉反应，显示良好的特 ｕｓ：ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ， １９８９，７０：２５４１—３２５５． 异性。此外，通过对１４９份临床样本检测，结果证 Ｃｈｅｎ Ｃ Ｍ，Ｃｕｉ Ｓ Ｊ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ ｂｙ ｌｏｏｐ— 明，ＬＡＭＰ的阳性检出率（２２．１ ）要高于ＰＣＲ方 ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ 法（１８．１％），也进一步证明了ＬＡＭＰ具有更高的灵 Ｍｅｔｂｏｄｓ，２００９，ｌ５５（２）：ｌ２２～ｌ２５． 敏度。因此，可确定本试验建立的ＬＡＭＰ方法适用 Ｃｈｅｎ ＨＴ，Ｚｈａｎｇ Ｊ，Ｙａｎｇ ＳＨ，ｅｌ ａ１．Ｒａｐｉｄ ｄｅｔｅｃｌｉｏｎ ｏｆ ｐｏｒ— 于ＰＰＶ检测的高敏感性和特异性的方法。 ｃｉｎｅ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ ＤＮＡ ｂｙ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｌｏｏｐ— ｍｅｄｉａｔｅｄ ｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍ— ｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００９，１５８（１ 为了避免气溶胶造成假阳性的问题，我们通过 ２）：１ＯＯ一１０３． 在反应前体系中加入钙黄绿素，反应结束后肉眼观 ＜＞ ＜＞●＜）●◇ ＜＞●＜＞●＜） ㈨●＜＞●＜＞．（）．＜）●＜）●＜＞．（）．＜＞●＜） ＜＞●＜＞ ＜＞●＜＞．（）．＜＞●＜＞●＜＞●＜＞●（＞ ＜＞ ＜＞●＜＞．（）．＜＞ ０。＜＞ ＜＞●（） ＜）… 中国畜牧兽医学会期刊编辑学分会２０１１年会 暨中国畜牧兽医科技期刊发展论坛在吉林延吉举行 本刊讯 ２０１１年８月２８～２９日，中国畜牧兽医学会期刊编辑学分会２０１１年会暨中国畜牧兽医科技期 刊发展论坛在吉林省延边朝鲜族自治州延吉市举行，业内数十家期刊的近７０名代表参会。 分会理事长冯艳秋主持开幕式，中国畜牧兽医学会副理事长兼秘书长阎汉平研究员参加会议并致辞，他 充分肯定了期刊编辑学分会的工作，对分会今后工作指明了发展方向。会上，共评选出９本精品期刊、１５本 优秀期刊，７家分获行业贡献奖、数字化战略奖、发展创新奖，评选出期刊领军人物５名，优秀主编１５名、优 秀编辑２６名、优秀记者５名、优秀美编６名、优秀营销９名、优秀编务６名。本刊评为中国畜牧兽医精品期 刊；汪明、赵欢、张冬梅、黄长钦分别被评为优秀主编、优秀编辑、优秀营销和优秀编务。 在期刊发展论坛上，中国社会科学院法学研究所李顺德研究员就“数字技术环境下期刊出版的版权管理 与探讨”进行了专题讲座。中国农业科学院家禽研究所副所长戴有理研究员就我国畜牧兽医期刊发展的创 新、资源打造、数字出版路径、产业链延伸、人才队伍建设等问题进行了探讨。 在座谈交流会上，精品（优秀）期刊、先进个人的代表介绍了各自刊物的办刊经验。冯艳秋编审就国家期 刊改制情况与相关进行了专题发言，分会秘书长孔平涛主任对期刊编辑学分会近两年的工作进行了总 结，初步确定２０１２年分会会议论坛的主题为“变革时期期刊的创新与经营”，同时将筹备分会成立２０周年纪 念活动。
