岛津分子荧光光谱仪 RF-5301PC
氙灯安装和性能测试
岛津分子荧光光谱仪 RF-5301PC 氙灯安装和性能测试
摘要：介绍了岛津分子荧光谱仪RF-5301PC的氙灯安装和仪器的灵敏度，S/N，波长准确度测试，及荧光谱仪的结构和一些主要构件。 面向的对象：主要是化验人员的仪器维护和初次接触荧光光谱仪的工程人员。另一个目的也是自己以后维护便于查看。这个仪器接触不多，也希望其他朋友帮助指正。
目录：
一些安全问题------------------------------------------------------1楼
仪器的一个不能和计算机通信的问题解决------------------------1楼
RF-5301的通信设置---------------------------------------------------2楼
灯的安装及位置的校准------------------------------------------------3楼
仪器灵敏度的调整（增益调整）------------------------------------4楼
仪器性能测试（S/N的测试）----------------------------------------5楼
校准波长准确度---------------------------------------------------------6楼
分子荧光光谱仪介绍---------------------------------------------------7楼
参考文献：
图片后面的【x】表示引用的文献。
仪器专场展示：分子荧光光谱 圆二色光谱 拉曼光谱 关 键 词：岛津 安装 氙灯 性能测试 PC
一、一些安全问题.
1.RF-5301的氙灯保证flicker 500小时。说明书中是说，当使用时间超过1000小时时，可能会爆炸(burst) 。 2.由于氙灯内有高压气体，如果氙灯被硬物撞击存在爆裂的危险，所以安装氙灯时，要带上安全眼镜，手套，长袖子衣服。
3.安装氙灯时，必须关掉电源，拔掉电源线。因为关机后，氙灯电极上仍然存有充电电压，所以，关掉电源后，要等5分钟或更长，才能换灯，不然有触电危险。
4.氙灯工作时温度非常高。关机后，必须等1个小时才能更换。
5.氙灯启动时有3KV高压加在氙灯的电极上，所以，开机前，保证盖子盖好。
6.氙灯工作时，灯光很强，其射线会损伤视网膜，紫外线会损伤眼角膜，所以，应该避免直视光源。 7.手印问题
二。仪器的一个不能和计算机通信的问题解决。
先说说仪器RF5301的保险丝位置。
仪器保险丝的位置：
1.仪器后盖处的保险丝。
这里有两个。这两个保险丝电子市场一般买不到，但是只要粗细和长短一致，电气参数一致即可。 如下图：
2. 仪器内部：
打开盖子，在一个竖着的板子上有一个保险丝。普通类型。 另外主板上有一排，大概五六个。
为了更换主板上的保险丝，必须拿出主板。 说说主板的拆出问题。
图中两个红色圈圈圈住得螺丝钉，拧开，可以拔出主电路板（拔出前，一定要打开仪器盖子，拔掉连接主板的一个排线，并保证没有其他的接插线在拔出主板时，会被拉坏。）
主电路板上有一排保险丝。在一些故障时，可以先看看这些保险丝的通断。
三、RF-5301的通信设置：
1.打开仪器电源，打开计算机。
2.点击计算机上的工作站软件RFPC，在主菜单里，点击Configrue。
3.点击“PC Configuration\弹出
4. 设置使用的串口，点击OK。仪器就会开始跟计算机建立通信。
如果没有，可以点击菜单\"Configure-Instrument\弹出，Fluorometer选择 On，仪器开始和计算机建立通信。
当通信建立后，仪器显示自检画面，并设置仪器参数。
仪器初始化完成后，可以点击菜单\"Configure--Parameters\"或者用快捷键\"Ctrl+P\" >
仪器初始化完成后，可以点击菜单\"Configure--Parameters\"或者用快捷键\"Ctrl+P\"，弹出
输入文件名，点击\"Save\"，通信参数保存为缺省文件。
四、灯的安装及位置的校准：
1. 拧松图中两个螺钉，打开灯室。
2.拧松下图螺钉，移动可移动板。
3. 用仪器自带的工具，插入下图中孔的靠下位置，逆时针转动，拧松氙灯紧固螺钉。
4. 从包装盒中取出氙灯，去掉在正负极上的防护件。
5. 使负极上的黑色或者红色标记朝向灯紧固螺钉方向。把氙灯插入光室。
6. 用工具插入下图位置，顺时针方向紧固氙灯。
7. 关上可移动盖子，拧紧螺钉。把氙灯正极接上正电极线，并用螺钉紧固 （只允许用手拧，用工具可能损坏氙灯）
灯位置粗调：（仪器预先预热30分钟）
1. 打开工作站RFPC，右下角的\"Go To WL\"
2. 设置激发波长(Ex Wavelength)为500nm。
3. 打开样品室，在样品室中放一个白纸，应该可以看到一个绿色光斑。
4. 用工具调整灯的水平位置，使绿色光斑最亮。 （一定要先调整灯的水平位置！）
5. 调整灯的垂直位置，使绿色光斑最亮。
6. 这样灯位置的大概位置就调好了。
灯位置的精细调整：
1. 拿掉白纸，样品室中放入盛有蒸馏水的比色皿，盖上盖子。 2. 点击菜单”Configure-Instrument“,弹出
3. 点击\"Lamp Align\"的\"Perform\"，弹出
（注：灯使用时间的复位也在这里） 然后，
a.用工具调整灯的水平位置，使上图中的数值最大 b.用工具调整灯的垂直位置，使上图中的数值最大
这样灯的位置就完全调好了。
如果是新安装的灯，可以按一下上图中的Reset键，这样灯的使用时间就可以从零开始记录。
五、仪器灵敏度的调整（增益调整）：
先看看几个相关的调节钮的位置。如下图
VR0: 增益调整。用户可以做。
VR1:厂家设置。不建议用户自己动。这个是当负高压控制关闭时，用来调整检测灵敏度。
VR2：厂家设置。不建议用户自己动。这个是当灯补偿（lamp compensation）开启时，用来调整检测灵敏度。
”灯补偿“，我在整个说明书里都没见提到怎么设置。
可以看到的一个
增益调整：
1. 点击菜单\"Acquire Mode”-“Spectrum\"，如下图
2.弹出，并设置参数如下图：
3.点击菜单”Configure”-“Instrument“,弹出并设置参数如下图：
4.点击工作站右下角的\" >
4.点击工作站右下角的\"Go To WL\"
5.弹出对话框如下图，设置EM Wavelength 为450nm。
6.点击”Set“关闭对话框。
7.点击图16中的”Auto Zero“---”Start“。得出的光谱图如下图
8.在谱图上，点击鼠标右键，选择”Cross hair“,
会弹出一个子菜单，如下图，选择显示，在谱图上，会出现一个十字光标，用这个光标可以获得蒸馏水拉曼峰的峰值波长（大概397nm）和峰值强度。
当峰值强度的值在10±2时，可以不用调整VR0.当峰值强度不在这个范围时，调整VR0。然后再重复上面灵敏度测试的方法。
六、仪器性能测试（S/N的测试）
当安装了新灯后，要进行仪器性能测试。 1.仪器预热30分钟。
2.点击菜单\"Configure-Instruement\弹出
3.在对话框中，点击\" >
3.在对话框中，点击\"S/N Ratio Check\"的\"Perform\弹出下图：
4. 按提示，在样品室中放入盛蒸馏水的比色皿后，点击OK。
仪器会测量蒸馏水的拉曼峰高，并显示出来。这个峰值会测量10分钟，考虑到峰值的稳定性。 基于拉曼峰，仪器噪声会被估算。然后计算出S/N ratio。如下图
规定，S/N ratio应该大于150。
假如上图中的Peak Height 不在10±2的范围内，要按上面的调整灵敏度的放大调整VR0. S/N ratio<150，用户可以看看，灯有没安装好，灯寿命是否到了，或者蒸馏水问题。
七、校准波长准确度
（遗憾的是说明书上没有修正波长误差的方法）
校准发射单色器：
利用荧光灯的汞发射谱线（435.8nm）
操作：
1.打开仪器样品室盖，使荧光灯照射样品室，拿掉样品室中的比色皿。 2.点击：”Acquire Mode-Spectrum“
3. 点击”Configure-Instrument“,弹出 \"HV Control\"和\"PMT Protect\"选择 ”off“
4.点击\"Configure-parameters\" > 4.点击\"Configure-parameters\" >
4.点击\"Configure-parameters\弹出对话框，并设置为如下：
5.点击工作站右下角的\"Start\" > 5.点击工作站右下角的\"Start\" >
5.点击工作站右下角的\"Start\"。完成扫描后，会显示出谱图
6.利用工作站的寻峰功能([Peak Pink]),找到峰值对应的波长。合格范围是：435.8±1.5nm。如果峰的强度过高，可以调节在灵敏度调节里提到的VR1。
校准激发单色器：
粗测：用蒸馏水；精确测量：用汞灯。
使用蒸馏水校准的方法。
操作：
1.将盛有蒸馏水的比色皿放入样品室，盖上盖子。 2.点击”Configure-Instrument“,弹出
\"HV Control\"和\"PMT Protect\"选择 ”On “
3. 点击\"Configure-parameters\弹出对话框，
设置上图中的”EM Wavelength“值为上面发射单色器校准时测量的值。 4. 点击工作站右下角的\"Start\"。完成扫描后，会显示出谱图
5.利用工作站得寻峰功能来找到峰值对应的波长。这个波长和设置的”EM Wavelength“应该相差不多。
八、分子荧光光谱仪介绍
（一）RF-5301PC结构
RF-5301PC光路：
（二）荧光光谱仪的一些组件
1.氙灯
报废的氙灯应裹上厚纸，并把石英壳敲碎，以免留下后患。
2.光电倍增管
3.荧光光谱仪
