气相色谱法测定白酒中甲醇的含量

󰀡doi:10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2019.16.028Process󰀡Technology工艺技术气相色谱法测定白酒中甲醇的含量Determination of Methanol Content in Chinese Spirits by GC◎ 钱 菁1，叶小君2，周云婷1，李俊行3（1.新昌县食品药品检验检测中心，浙江 新昌 312500；2.嵊州市产品质量监督检验所，浙江 嵊州 312400；3.浙江医药股份有限公司新昌制药厂，浙江 新昌 312500）(1.Xinchang Food and Drug Inspection and Testing Center, Xinchang 312500, China;Qian Jing1, Ye Xiaojun2, Zhou Yunting1, Li Junhang33. Zhejiang Medicine Co., Ltd. Xinchang Pharmaceutical Factory, Xinchang 312500, China)2.Shengzhou Products Quality Supervision and Testing Office, Shengzhou 312400, China;摘 要：目的：建立白酒中甲醇的含量测定方法。方法：采用Agilent DB-WAX色谱柱（30 m×0.25 mm ×0.5 μm）；流速为1.0 mL·min-1；程序升温条件为40 ℃保持5 min，4 ℃·min-1升至80 ℃；检测器温度为250 ℃，进样口温度为250 ℃，载气流量为1.0 mL·min-1；进样量为1 μL。结果：甲醇在25～1 000 mg·L-1 范围内线性关系良好，相关系数为0.999 9。甲醇的回收率在70%～130%，RSD最大为1.6%。结论：该方法具有良好的专属性、检测灵敏度、精密度、线性和准确度，适用于白酒中甲醇的质量控制。关键词：气相色谱法；外标法；白酒；甲醇Abstract：Objective: To establish a method for determination of methanol content in Chinese spirits. Methods: Agilent DB-WAX column (30 m×0.25 mm×0.5 μm) was adopted at a flow rate of 1.0 mL·min-1. The temperature temperature was 250 ℃, injection port temperature was 250 ℃, carrier gas rate was 1.0 mL·min-1. The injection volume was 1 μL. Results: The method had good linear relationship within the range 25～1 000 mg·L-1 for methanol, with the rise program: initial temperature was kept at 40 ℃ for 5 min, then increased to 80 ℃ at the rate of 4 ℃·min-1; detector correlation coefficient was 0.999 9. Methanol recoveries were 70%～130%, with maximum RSD of 1.6%. Conclusion: The method has good specificity, sensitivity, precision, linearity, accuracy and can be used for quality control of methanol in Chinese spirits.Key words：Gas chromatography; External standard method; Chinese spirits; Methanol中图分类号：R155白酒是我国的传统饮料酒，其在我国的消费量居会不可避免地产生甲醇，世界之首。白酒在发酵过程中，为原料和辅料中果胶质内甲基酯分解而成[1]。甲醇被人体饮用后不会被氧化成为二氧化碳被排出，而是在体内蓄积，对中枢神经有抑制作用，尤其对视网膜神经的损害难以恢复。甲醇在人体内还会代谢产生甲酸作者简介：钱 菁（1973—），女，本科，工程师；研究方向为食品药品的质量标准研究。通讯作者：李俊行（1986—），男，硕士，工程师；研究方向为食品药品的质量标准研究。XIANDAISHIPIN现代食品/Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.工艺技术Process Technology和甲醛，毒性更大，甲酸的毒性比甲醇的毒性大6倍，甲醛的毒性比甲醇大30倍。甲醇饮用过量会引起双目失明，甚至导致死亡[2]。因此，精确有效地测定白酒中的甲醇含量，为生产厂家控制酿酒工艺和食品监督抽检提供重要的技术支持，也能为人民群众的生命安全提供重要的保障。对于白酒中甲醇含量的测定，据综述文献报道[3-4]的有显色法、气相色谱法、激光拉曼光谱法和折射法，也有文献[5-6]对葡萄酒、啤酒中的甲醇进行了检测分析，GB 5009.266-2016《食品安全国家标准 食品中甲醇的测定》于2017年6月23日正式实施[7]。该实验在此基础上进行了优化研究，最终获得一种简单、快捷，同时具有较高灵敏度和准确度的检测方法。（精确至0.001 g）甲醇至100 mL容量瓶中，用乙醇溶液（40%）定容至刻度，混匀。甲醇标准溶液：取6个50 mL容量瓶，分别吸取0.25、1、2、4、8 mL和10 mL甲醇标准储备溶液于容量瓶中，用乙醇溶液稀释至刻度（浓度分别为25、100、200、400、800 mg·L-1和1 000 mg·L-1）。甲醇100 mg·L-1水平加标溶液（浓度为500 mg·L-1）： 取50 mL量瓶，吸取5.0 mL甲醇标准储备溶液 （5 000 mg·L-1），用乙醇溶液稀释至刻度。甲醇400 mg·L-1水平加标溶液（浓度为2 000 mg·L-1）： 取50 mL量瓶，吸取20 mL甲醇标准储备溶液 （5 000 mg·L-1），用乙醇溶液稀释至刻度。甲醇1 000 mg·L-1水平加标溶液（浓度为5 000 mg·L-1）：即甲醇标准储备溶液。甲醇检测限溶液：取浓度为25 mg·L-1的甲醇标准溶液，用40%乙醇溶液定量稀释制成含甲醇7.5 mg·L-1的溶液。1 材料与方法1.1 仪器与材料Agilent 70A气相色谱仪（安捷伦科技有限公司）、METTLER-TOLEDO ML204型电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。甲醇对照品（含量≥99.5%，批号为20180626，国药集团化学试剂有限公司）；叔戊醇对照品（含量为99.80%，批号为T1711058，北京坛墨质检科技有限公司）；白酒样品：古井陈酿（250 mL/瓶，酒精度为45%vol，安徽古井贡酒股份有限公司）；乙醇（色谱纯，西陇科学股份有限公司）。1.5 供试品溶液的配制白酒样品溶液：直接取白酒试样。样品加标溶液（每个水平配制6份）：取10 mL量 瓶，加适量白酒样品，加入各自浓度水平的甲醇加标标准溶液2 mL，用白酒样品稀释至刻度，混匀，即得。1.6 标准曲线的绘制取甲醇标准溶液各1 μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图。以甲醇浓度为横坐标，以甲醇峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。1.2 色谱条件Agilent DB-WAX色谱柱（30 m×0.25 mm×0.5 μm）； 进样口和检测器温度均为250 ℃；柱温起始为40 ℃保持5 min，4 ℃·min-1升至80℃；进样量1 μL，分流比为10∶1；柱流速为1.0 mL·min-1。1.7 供试品溶液中甲醇含量的测定取1.5项下制备的供试品溶液各1 μL，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，根据标准曲线得到供试品溶液中甲醇的浓度。1.3 空白溶液的配制空白溶液即40%乙醇溶液，量取400 mL乙醇，用水定容至1 000 mL，混匀。2 结果与分析2.1 专属性试验结果表明，空白溶液色谱图中基线平缓，只有一个明显的乙醇峰，在甲醇出峰处（约5.433 min）无杂峰干扰，图谱见图1。1.4 标准溶液的配制甲醇标准储备溶液（5 000 mg·L-1）：准确称取0.5 g 90/现代食品XIANDAISHIPINCopyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.󰀡Process󰀡Technology工艺技术图1 空白溶液（乙醇）图谱图2.2 检测灵敏度试验试验结果见表1，检测限图谱见图2。表1 检测灵敏度试验结果表检测灵敏度指标浓度/mg·L-1检测限7.5定量限25S/N6.122.9图2 检测限图谱图2.3 标准曲线的绘制和线性关系的考察线性方程为Y=0.663 8X-0.672 4，线性相关系数为0.999 9，结果表明甲醇在线性范围内与峰面积呈良好的线性关系，标准曲线图见图3。峰面积甲醇浓度/mg·L-1图3 甲醇标准曲线图XIANDAISHIPIN现代食品/91Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.工艺技术Process Technology2.4 精密度试验和加样回收率试验加标浓度水平分别为100、400、1 000 mg·L的样品溶液各6份，进样并记录色谱图（见图4～6）。结果表明方法的重复性良好。计算加标回收率，结果见表2。结果表明该方法具有较好的准确度。-1表2 精密度试验和加样回收率数据表（n=6）加标浓度水平/mg·L-11004001 000甲醇含量的RSD/%1.60.20.8平均加样回收率/%79.9124.297.4图4 加样回收率试验图谱图（加标浓度水平为100 mg·L-1）图5 加样回收率试验图谱图（加标浓度水平为400 mg·L-1）图6 加样回收率试验图谱图（加标浓度水平为1 000 mg·L-1）3 讨论与结论3.1 关于国家标准GB 5009.266-2016中内标定量方法的思考内标法是色谱分析中一种比较准确的定量方法，但必须准确称量试样和内标物，否则会影响实验结果，适于分析样品量较少且进样重复性差的情况。对于配有自动进样器的气相色谱仪，已经具有良好的进样重复性，用内标法检测甲醇含量，没有特别的优势，反而增加了每个样品需要定量加入0.10 mL叔戊醇的误差。92/现代食品XIANDAISHIPINCopyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.󰀡Process󰀡Technology工艺技术此外，在药品的残留溶剂分析中，利用外标法检测甲醇已经是普遍运用的方法。因此，对于配有自动进样器的气相色谱仪，该实验直接用外标法检测白酒中甲醇含量。参考文献：[1]狄红梅，李艳敏，张立严.气相色谱内标法测定白酒中甲醇含量的确认及应用[J].酿酒科技，2018（2）：62-.[2]张明赞，何腊平，张义明.白酒中甲醇、甲醛、氰化物和金属离子的研究进展[J].食品安全质量检测学报，2015，6（9）：3563-3566.[3]李红洲，彭小东，谈小君，等.白酒中甲醇检测方法研究进展[J].酿酒科技，2017（7）：99-101.[4]贾偶然.酒精中甲醇含量检测方法[J].现代食品，2016（23）：65-67.[5]张广芳，曾桂凤，曾令文.自酿葡萄酒中甲醇和杂油醇检测分析[J].中国食品添加剂，2016（5）：141-146.[6]李 培，闫 峰，牛伟涛，等.啤酒中甲醇含量的测定[J].现代食品，2017（23）：101-103.[7]国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.GB 5009.266-2016食品安全国家标准 食品中甲醇的测定[S].北京：中国标准出版社，2017.3.2 关于标准曲线绘制的优化国家标准中，甲醇标准溶液的浓度是100～ 1 000 mg·L-1，定量限是25 mg·L-1，如果出现有样品的甲醇浓度介于25～100 mg·L-1，样品的浓度在线性范围之外，检测结果的准确性就会打折扣。因此，该实验把线性范围扩大至25～1 000 mg·L。-13.3 结论方法学验证结果表明，该实验建立的GC外标法测定白酒中甲醇含量的方法，具有良好的专属性、检测灵敏度、精密度、线性和准确度，方法较为简便，准确可靠，能够比较好地控制产品质量，易于推广应用，适用于白酒中甲醇的质量控制。（上接第85页）最佳配方为苹果汁40%、柠檬酸0.20%、白砂糖用量6%与CMC-Na和黄原胶0.1%。通过本方法得到的苹果汁饮料色泽鲜艳，风味协调，质地均匀，将是一种受消费者青睐的饮料。参考文献：[1]赵光远.混浊苹果汁的研制及其储藏稳定性的研究[D].无锡：江南大学，2005.[2]王 皎，李赫宇，刘岱琳，等.苹果的营养成分及保健功效研究进展[J].食品研究和开发，2011，38（1）：1-168.[3]李 明.制汁技术与实例[M].北京：化学工业出版社，2008.[4]张水华.食品分析[M].北京：中国轻工业出版社，2009.[5]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会. GB 47.2-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 菌落总数测定[S].北京：中国标准出版社，201.[6]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会. GB 47.3-2016 食品安全国家标准 微生物学检验 大肠杆菌群计数[S].北京：中国标准出版社，2016.[7]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会. GB 47.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验[S].北京：中国标准出版社，2016.[8]张水华.食品感官鉴评[M].广州：华南理工大学出版社，2003.一米一粟得之不易,惜粮节粮从我做起!XIANDAISHIPIN现代食品/93Copyright©博看网 www.bookan.com.cn. All Rights Reserved.