醋酸菌种制备工艺流程

流程：

菌种（沪酿1.01）→试管→三角瓶→一级种子罐→二级种子罐→醋酸罐

说明：

一、 接种量。

试管(装料10～12ml)：接种针画线； 三角瓶：一支试管接一支三角瓶（三角瓶装料150ml）； 一级种子罐：6L(40支三角瓶，种子罐装料80L)； 二级种子罐：80L(种子罐装料800L)； 醋酸罐：800L（醋酸罐装料8m3）。 二、菌种保藏。

液体蜡封试管：冰箱4℃，时间1年，每1年转接一次； 斜面试管：冰箱4℃，时间3个月，每三个月转接一次； 三角瓶、一级种子、二级种子，成熟即用。 四、培养基配料

斜面试管：

①葡萄糖1g，②酵母膏0.9g, ③CaCO31.5g，④琼脂2.5g，⑤酒精2ml(95%)，水100ml。 三角瓶（40支）：

①葡萄糖60g,②酵母膏60g, ③酒精120ml, ④水6000ml。

一、二级种子罐：

新鲜酒醪液（上清液）,酒精度2.5～3.5%。 五、制作方法

斜面试管菌种：

③装于250ml洁净三角瓶→干热灭菌（165℃2hr.）→加①＋②＋100mlH2O混合加热溶解→加④烧开溶解→灭菌（121℃30min）→无菌加⑤混合均匀→趁热无菌分装至10支经干热灭菌试管（14×150）摇匀→摆斜面→接种（接种针划线）→培养（30±1℃48hr.）

三角瓶菌种：

①、②、④于钢筋锅混合加热溶解→分装至40支干热灭菌后的1000ml三角瓶→灭菌（121℃30min）→无菌分装④（每支3ml）→冷却至30℃接种→摇床培养24hr.（温度30±1℃）。

一级种子：

种子罐→清洗→消毒→吸入新鲜酒醪液（上清液）80L（酒精度2.5～3.5%）→接种→封盖→通风培养（风量0.5～1.0m3/hr. 温度30±1℃）→培养至酸度2.0左右→成熟使用

二级种子：

种子罐→清洗→消毒→吸入新鲜酒醪液（上清液）700L（酒精度2.5～3.5%）→接种→封盖→通风培养（风量8～15m3/hr. 温度30±1℃）→培养至酸度2.0左右→成熟使用。