专墨论述 ＤＯＩ：１Ｏ．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１５．１５．０３３ 食品研究与开发 Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏ ２０１５年８月 第３６卷第１５期 牡蛎蛋白活性肽的分离及生物活性研究进展 陈艳辉 。李超柱 。黎丹戎。 （１．钦州学院，广西钦州５３５０００；２．广西医科大学，广西南宁５３００２１） 摘要：牡蛎活性肽是海洋天然产物研究的重要组成部分，现代医学研究表明，牡蛎活性肽在抗肿瘤、抗氧化、降血 压、降血糖等方面具有特殊的生理活性。就牡蛎蛋白质酶解法制备活性肽的分离纯化技术、牡蛎活性肽的生物活性作 用等研究进展进行概述，为牡蛎活性肽的深入研究提供参考。 关键词：牡蛎；活性肽；酶解产物；分离纯化 Ｔｈｅ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｏｆ Ｏｙｓｔｅｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＣＨＥＮ Ｙａｎ—ｈｕｉ ，ＬＩ Ｃｈａｏ—ｚｈｕ。，ＬＩ Ｄａｎ—ｒｏｎｇ （１．Ｑｉｎｚｈｏｕ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｑｉｎｚｈｏｕ ５３５０００，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｕａｎｇｘｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３００２１， Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｙｓｔｅｒ ａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｒｅ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｐａｒｔ ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｔｈｅ ｎａｔｕｒａｌ ｍａｒｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔ．Ｍｏｄｅｍ ｍｅｄｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｏｙｓｔｅｒ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｈａｖｅ ｓｐｅｃｉａｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｓｕｃｈ ａｓ ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒ， ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ，ｌｏｗｅｒｉｎｇ ｂｌｏｏｄ ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｂｌｏｏｄ ｓｕｇａｒ ａｎｄ ＳＯ ｏｎ．Ｔｈｅ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｉｃａｔｉｏｎ ｆｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｏｙｓｔｅｒ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｏｙｓｔｅｒ ａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｗｅｒｅ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ，ｗｈｉｃｈ ｗｉｌｌ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｏｙｓｔｅｒ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｙｓｔｅｒ；ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅ；ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｅａｔｉｏｎ 浩瀚的海洋是人类保健和药品的天然宝库，迄 今，人们已从各类海洋生物中分离获得１４ ５００余种具 有各种结构类型的海洋天然产物，近１／２具有各种生 物活性；更重要的是超过０．１％的化合物结构新颖独 肽”。牡蛎的蛋白质含量高，是采用酶解法制备生物活 性肽的良好原料。现就牡蛎蛋白质酶解法制备活性肽 及分离纯化技术、牡蛎活性肽作用方面的研究最新进 展作一简述。 １ 酶解牡蛎蛋白质制备活性肽及分离纯化 特，活性显著，已成为先导化合物或新药来源【ｌＪ。海洋 天然活性肽是海洋药物研究的重要组成部分，它们显 示出多种多样的生理活性，如抗肿瘤活性、抗氧化性、 牡蛎蛋白质酶解法制备活性肽及分离纯化工艺 一抗高血压性、抗凝血、抗菌性、免疫活性、降血糖等 。 但天然存在的海洋活性肽等在生物体中含量低，而且 分离纯化困难，难以实现规模化生产１７１。为解决这一瓶 般流程为：牡蛎一剥壳取肉＿十清洗一匀浆一酶解一 灭酶 离心取上清液－÷酶解粗提物一分离纯化 活 性肽。 颈问题，人们想到利用特异的蛋白酶水解，使其释放 出具有活性的肽。由于酶法生产活性肽产品安全性极 高，生产条件温和，水解易控制，可定位生产特定的肽， 成本低，故已成为最主要的生产方法。该法还有一个 突出的优点，就是可以将一些“惰性蛋白”转变为“活性 基金项目：广西自然科学基金资助项目（２０１４ＧＸＮＳＦＡＡ１１８０６６）；广 １．１小于１ ｋＤａ肽的制备及分离纯化 于娅等１８１用碱性蛋白酶Ａｌｃａｌａｓｅ１８ Ｕ／ｋｇ于６０℃、 ｐＨ８．５下对脱脂牡蛎干粉进行恒温水解４ ｈ，对酶解粗 提物选择Ｓｅｐ ｈａｄｅｘ Ｇ一１５凝胶柱，用醋酸一醋酸钠缓冲 液进行洗脱，收集到５个组分，其中２、３、４组分具有很 强的ＡＣＥ（血管紧张转化酶）抑制活性的短肽，其相对 分子质量在２０２—６０２之间，即大致为２肽～５肽的牡蛎 短肽。 冯晓梅等嘲采用胰蛋白酶５％浓度于４５ ｏＣ、ｐＨ８．０ 西教育厅科研立项项目（２０１３ＬＸ１６２） 作者简介：陈艳辉（１９５８一），女（汉），教授，本科，研究方向：天然产 物有机化学。 陈艳辉，等：牡蛎蛋白活性肽的分离及生物活性研究进展 专题论述 －＝＝＝１３６ 对牡蛎蛋白质进行酶解４ ｈ，使其释放出具备特殊活性 的活性肽，粗提物上Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ一２５凝胶色谱柱，经 ＮＨ３／ＣＯ 缓冲液洗脱，得到Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３、Ｆ４４个组分，取 纯度和含量较多的组分Ｆ３和Ｆ４继续上 ＤＥＡＥ２Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ离子交换色谱，用ＮａＣ１梯度洗 脱，经过进一步分离纯化获得Ｆ３１、Ｆ３２、Ｆ４１组分。 ＴＯＦ—ＭＳ测定结果显示样品纯度较高，同时测得Ｆ３１、 Ｆ３２、Ｆ４１的相对分子质量分别为８８５、８１０及４０９。 余杰等［ ｏｌ采用复合酶２ ６１４ Ｕ／ｇ底物在温度４５℃， 底物质量浓度１５－３ ｇ／Ｌ条件下对牡蛎蛋白酶解３ ｈ，取 上清液，过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ一２５柱，采用ｐＨ７．０，０．０２ ｍｏｌ／Ｌ 磷酸缓冲液进行分级分离，获得一种活性肽并命名为 ＢＰＯ，并根据ＢＰＯ的洗脱体积和标准曲线求出其相对 分子质量为７５１。 欧成坤［１１】等采用５３７酸性蛋白酶酶解牡蛎蛋白 质，通过高效液相色谱分析了水解度为１６％的酶解产 物的相对分子质量分布，具有特殊功能活性的肽对应 相对分子质量为５６８和２０３，主要由２肽到５肽的多 肽类物质。 １．２小于２ ｋＤａ肽的制备及分离纯化 汪秋宽等［ ２１采用木瓜蛋白酶于１５０ ｍｉｎ、ｐＨ７．０、酶 用量６％、温度４５℃条件下对牡蛎肉进行酶解，将牡 蛎酶解液离心，用相对分子质量截留量为３０ ０００的膜 组件进行超滤，超滤后用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ一１５凝胶柱分离， 收集柱层析分离的洗脱液，洗脱液在２８０ ｎｍ下有两个 吸收峰，其清除自由羟基、超氧自由基的作用很显著， 估算其蛋白肽的相对分子质量分别为１ １９１和８２６左 右。而采用中性蛋白酶在酶用量３％、温度６５℃、时间 １ １０ ｍｉｎ、ｐＨ６．０条件下对牡蛎肉进行酶解，酶解液处理 与上述方法操作相同，结果洗脱液在２８０ ｎｍ下的２个 吸收峰的蛋白肽组分的自由羟基清除活性最强，估算 其相对分子质量分别为１ ０７４和７３５左右。 周敏华ｆｌ３１等采用胰酶（２．４ｘ１０ Ｕ／ｇ）水解近江牡蛎 制备高Ｆ值寡肽，其方法是将牡蛎蛋白按底物质量分 数１６－４％、胰酶添加量１５ ０００ Ｕ／ｇ、ｐＨ ９．３２、温度４９℃ 酶解４ ｈ，然后将酶解液用活性碳吸附，取上清液，用 Ｂｉｏｇｅｌ Ｐ２凝胶层析法，采用碳酸氢铵作为洗脱液洗 脱，可得到Ｆ值大于２０的寡肽混合物，其相对分子质 量约１ ４５０～８ｏ０。 １．３小于５ ｋＤａ肽的制备及分离纯化 周先果［ ４１采用胰蛋白酶（１：２５０）酶解牡蛎肉，其酶 解条件为：加酶量２％，ｐＨ８．０，温度４５℃酶解６ ｈ，将 酶解液上清用１％壳聚糖醋酸溶液进行絮凝法除杂质 后，常温下再离心即得粗提物。将粗提物＿￣ＳｅｐｈａｄｅｘＧ一 ２５葡聚糖凝胶柱，用ＮＨ．ＨＣＯ，缓冲液洗脱，结果层析 图谱出现４个洗脱峰，经采用常规Ｔｒｉｓ一甘氨酸系统 ＳＤＳ—ＰＡＧＥ与小肽Ｔｒｉｃｉｎｅ—ＳＤＳ—ＰＡＧＥ电泳相结合的 方法分析ＳｅｐｈａｄｅｘＧ一２５层析柱各个层析峰的肽段分 布情况可知，Ｇ一２５ＩＶ峰：主要为小于２ ５１２ Ｄａ的小肽 等物质。 陈艳辉等ｌｌ ５Ｉ采用动物蛋白水解酶在６０℃、酶的质 量分数２．０‰、水解时间为４ ｈ的条件下水解牡蛎蛋白 质，酶解液经灭酶和脱色后，经柱层析、超滤膜分离（采 用ＭＷＣ０３０００超滤膜）获得分子量小于３ ０００ Ｄａ的具 有较好抗癌活性的牡蛎活性肽。 张辉［ｔ６１采用胰蛋白酶（１：２５０）酶解牡蛎肉，在加 酶量为２％、ｐＨ８．０、４５ ｏＣ条件下酶解６ ｈ后，４℃离心 ３０ ｍｉｎ，上清液即得牡蛎酶解液。酶解液经过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ一５０柱层析后得到两个峰，收集第Ⅱ峰，由凝胶层析 结果可粗略估算出牡蛎酶解活性肽Ｇ一５０Ⅱ峰的相对 分子质量小于５ ｋＤａ。 ２牡蛎活性肽的生物活性作用的研究 ２．１抗肿瘤作用 ２．１．１诱导分化肿瘤细胞 细胞形态与超微结构是细胞行使细胞功能的基 础和表现，其改变在一定程度上可反映细胞相关功能 活动状态的变化。因此，诱导分化处理前后肿瘤细胞 形态与超微结构特征的改变是判断肿瘤细胞是否逆 转分化的一个重要指标【】 ９１。 梁盈等［２ｏ１为了研究牡蛎低分子活性肽ＢＰＯ—Ｌ对 人肺腺癌Ａ ５４９细胞形态和超微结构的影响，分别采 用光学显微镜和透射电镜观察了经０．１ ｍｇ／ｍＬＢＰＯ—Ｌ 处理后的Ａ ５４９细胞，结果表明，ＢＰＯ—Ｌ能有效的改 变肺癌细胞的恶性形态和超微结构特征，使之出现与 正常细胞相似的形态和结构变化，由此说明牡蛎活性 肽ＢＰＯ—Ｌ对人肺腺癌细胞具有诱导分化作用。 李祺福等【２ ｌ以ＨＭＢＡ处理组为平行对照，流式细 胞仪检测细胞周期变化及以免疫细胞化学方法检测 相关癌基因、抑癌基因表达变化，研究牡蛎低分子活性 多肽组分ＢＰＯ—Ｌ对人肺腺癌Ａ５４９细胞分化的生物 学效应，探索其对肺癌细胞的作用机理。实验结果显 示，ＢＰＯ—Ｌ能有效抑制Ａ５４９细胞增殖活动，促使细胞 阻滞于ＧｄＧ 期。在此过程中，Ａ５４９细胞ｍｙｃ，ＭＴｐ５３ 等癌基因蛋白表达减弱，ｐ２１ＷＡＦ１／ＣＩＰ１和Ｒｂ等抑癌 基因蛋白表达活性的增强。证实ＢＰＯ—Ｌ对肺癌细胞具 有显著的诱导分化作用。 黄大川 应用从僧帽牡蛎中分离提取的牡蛎低分 子活性肽ＢＰＯ—Ｌ处理人肺腺癌Ａ５４９细胞，观察鉴定 牡蛎低分子活性肽对人肺腺癌细胞的生物学效应及 其作用性质，并进一步探索牡蛎低分子活性肽对人肺 腺癌细胞的作用机制。结果表明，ＢＰＯ—Ｌ能有效抑制 专题论述 陈艳辉，等：牡蛎蛋白活性肽的分离及生物－活Ｉ｝生研究进展 人肺腺癌Ａ５４９细胞增殖、活动，细胞周期明显阻 滞Ｇｏ／Ｇ 期。光镜、透射电镜结果显示，经ＢＰＯ—Ｌ处理 后的Ａ５４９细胞趋于扁平铺展状态，细胞体积增大，核 质比例减小，核形状较为规则，核内异染色质减少，常 染色质增多，高尔基体较为典型发达，粗糙型内质网 增多，多聚核糖体减少，分泌颗粒增多。 ２．１．２诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖 肿瘤是一种细胞增殖与死亡障碍性疾病，凋亡调 控机制失常在恶性肿瘤的演进过程中发挥重要作用， 故肿瘤治疗的关键是抑制肿瘤细胞的增殖或促进肿 瘤细胞的凋亡。 余杰等 ｏｌ检测牡蛎活性肽ＢＰＯ诱导宫颈癌ＨｅＬａ 细胞凋亡的作用机制。结果表明，ＢＰＯ诱导ＨｅＬａ细胞 凋亡的效应主要通过对细胞周期阻滞和激活细胞凋 亡信号通路来实现；ＢＰＯ的作用机制与诱导凋亡基因 Ｃａｓｐａｓｅ３ ｍＲＮＡ表达上调和细胞周期（Ｇｏ／Ｇ 期）阻滞 有关。 周先果㈣观察牡蛎活性肽ＢＰＯ Ｇ５０一ＩＩ在不同浓 度、不同作用时间对人舌鳞癌细胞株（Ｔｃａ８１１３）体外增 值的抑制作用；应用倒置相差显微镜、Ｈ．Ｅ染色和透射 电镜观察细胞形态学的改变；ＡＯ—ＥＢ荧光法观察细胞 凋亡。结果表明，牡蛎活性肽ＢＰＯ Ｇ５０—１１对人舌鳞癌 细胞株（Ｔｃａ８１１３）体外增殖具有抑制作用，并能诱导其 发生凋亡。廖共山［２３等也探讨牡蛎活性肽ＢＰＯ Ｇ５０一ｌＩ 对人舌鳞癌Ｔｅａ８１ １３细胞增殖和凋亡的影响，结果与 周先果相同。 等为研究牡蛎活性肽组分ＢＰＯ一１对人胃 腺癌ＢＧＣ一８２３细胞周期与基因表达的，结果显 示，牡蛎天然活性肽ＢＰＯ一１对肿瘤细胞的生物学效应 主要是通过凋亡的诱导而表现为对细胞增殖的抑制 作用。李夏闷对牡蛎胰蛋白酶抑制剂的制备及其抗肿 瘤活性的研究也表明，牡蛎胰蛋白酶抑制剂对人肺腺 癌Ａ５４９细胞生长有明显的抑制作用。 ２．１＿３增强机体免疫功能 免疫活性肽不仅能增强机体的免疫力，在动物体 内起着重要免疫调节作用，而且还能刺激机体淋巴细 胞的增殖，增强免疫器官的免疫应答能力及巨噬细胞 的吞噬能力，提高机体对外界病源物质的抵抗能力， 从而降低肿瘤的发生率［２６１。李超柱等 以小鼠脾淋巴 细胞为实验模型，通过淋巴细胞增殖实验和混合淋巴 细胞实验，从细胞、分子水平研究牡蛎活性肽（利用动 物蛋白水解酶水解牡蛎肉所得的分子质量小于３ ｋＤａ 的肽）对小鼠脾淋巴细胞的免疫抑制活性及作用机 制。结果表明，牡蛎活性肽可以抑制小鼠脾脏淋巴细 胞分泌ＩＬ一２和ＴＮＦ一 ，由此推测牡蛎活性肽可能是通 过抑制细胞因子的分泌来产生免疫抑制作用。提示牡 蛎活性肽可提高人体的细胞免疫功能而防止肿瘤的 发生。 ２．２抗氧化作用 自由基参与许多生理和病理过程，是机体正常代 谢的中间产物。人体内自由基含量随年龄增长而积累， 过多的自由基会导致ＤＮＡ的氧化破坏、蛋白质交联和 肽键断裂、酶和激素失活、发生脂质过氧化反应，形成 脂褐素（老年斑），沉积于心、脑、肾等器官使其功能减 弱，机体免疫能力下降。自由基清除剂作为抗氧化物 能不同程度地清除人体内积累的自由基。 周先果㈣为了探讨牡蛎酶解液的抗氧化活性，用 普鲁士蓝反应法测定牡蛎酶解液还原能力，在ＤＰＰＨ 体系、Ｆｅｎｔｏｎ体系和邻苯三酚自氧化体系中分别检测 牡蛎酶解液清除二苯代苦味酞自由基、羟基自由基和 超氧阴离子的能力，并考察牡蛎酶解液在Ｆｅ２＋ｉ￣发卵 黄脂蛋白过不饱和脂肪酸（ＰＵＥＡ）过氧化体系中的抗 氧化作用。结果表明，牡蛎酶解液清除羟基自由基的 效果较强，是硫脲的３．５倍；牡蛎酶解液也具有较强的 清除二苯代苦味酞自由基的能力；在Ｆｅ舢诱发卵黄脂 蛋白过不饱和脂肪酸（ＰＵＦＡ）过氧化体系中有明显的 抑制作用。 汪秋宽等［勰吩别检测了牡蛎木瓜蛋白酶和中性蛋 白酶酶解液体外自由羟基清除活性和体内抗氧化活 性。结果表明，当分子量为１ １９１ Ｄａ和８２６ Ｄａ左右的 木瓜蛋白酶酶解活性肽组分体外清除羟自由基活性 分别达到５３．６％和６６．５％；当分子量分别为１ ０７４ Ｄａ 和７３５ Ｄａ左右的中性蛋白酶酶解活性肽组分体外羟 自由基清除活性分别５７．６％和７Ｏ．５％。对小鼠肝脏 ＧＳＨ—ＰＸ酶、ＳＯＤ活力、ＧＳＨ含量显著提高，肝脏ＭＤＡ 含量显著降低。欧成坤『１１］等研究结果显示，采用５３７酸 性蛋白酶酶解牡蛎蛋白质，在水解度为１６％的酶解产 物中的肽对应相对分子质量为５６８和２０３肽，对二苯 代苦味酞自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基具 有良好的清除的能力。 ２．３降血压作用 降血压肽是通过抑制人体中血管紧张素转换酶 ＡＣＥ的活性而达到降血压作用。ＡＣＥ是肾Ｉ血管紧张 素系统中对调节血压起重要作用的酶，它通过去除血 管紧张素Ｉ的碳末端Ｈｉｓ—Ｌｅｕ生成有血管收缩活性 的血管紧张素Ⅱ，同时使舒缓激肽失活，引起血压升 高［２９－３０１。故评价牡蛎活性肽的降血压作用主要看ＡＣＥ 抑制的效果。 张辉 用碱性蛋白酶所得牡蛎酶解液经葡聚糖凝 胶柱层析的产物，测定对ＡＣＥ的抑制作用。结果表明， Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ一２５ ＩＩＩ组分对ＡＣＥ抑制率达到６０．４４％。 于娅等＿８ｌ通过ＨＰＬＣ法定量马尿酸测定碱性蛋白 陈艳辉，等：牡蛎蛋白活性肽的分离及生物活性研究进展 专题论述 １３８ 酶酶解牡蛎蛋白的各组分短肽的ＡＣＥ抑制活性。结果 表明，牡蛎水解液为２肽到５肽的牡蛎短肽具有很强 的ＡＣＥ抑制活性。欧成坤… 等研究结果显示，采用５３７ 酸性蛋白酶酶解牡蛎蛋白质，在水解度为１６％的酶解 产物中的肽对应相对分子质量为５６８和２０３肽，对 ＡＣＥ的抑制率为７１．７１％。 ２．４降血糖作用 血糖升高是糖尿病的一个重要特征，测定各种条 件下血糖含量是了解动物病情发展程度和药物作用 的重要手段。张辉［３１］采用腹腔注射四氧嘧啶造糖尿病 模型小鼠，牡蛎活性肽低、中、高剂量组按０．５、１、２ ｇ／ｋｇ 灌胃，研究了牡蛎活性肽ＢＰＯ不同剂量对其的降血糖 作用效果。结果显示，牡蛎活性肽能显著降低四氧嘧 啶诱导糖尿病小鼠的高血糖，其降血糖效果呈一定的 剂量效应关系，一定范围内剂量增加则降糖效果增加。 ３展望 从牡蛎中制取纯度高、活性好、安全性强的生物 活性肽药物成分具有十分良好的发展前景。我国对牡 蛎的应用开发己开展了很多研究工作，并有商业产品 面市，但与国外发达国家相比存在较大的差距。由于 目前研究中的牡蛎蛋白质酶解产物一般是各种肽段 的混合物，活性效果也往往是多种肽段活性协作的结 果。故今后对牡蛎蛋白质酶解法制备活性肽及分离纯 化技术应不断改进，同时要设法提高多肽类物质的分 析鉴定效率。相信随着科技的快速发展，一些先进的 仪器和手段被应用后，国内在牡蛎活性肽的研究方面 必将会取得突飞猛进的发展。 参考文献： 【１］姜丽琴．天然海洋多肽Ｔａｓｉａｍｉｄｅ的合成研究［Ｄ】．天津大学：２００６：６ ［２１林心銮．海洋鱼、虾、贝类的生物活性肽研究进展［Ｊ］．福建水产， ２００７，２６（３）：５８－６０ ［３］吴继卫，何海伦，路敬涛，等．海洋生物蛋白的酶解及酶解产物的 抗氧化活性［Ｊ１．海洋科学，２００５，２９（３）：７６—８Ｏ ［４］吴继卫．海洋来源生物活性肽的抗肿瘤作用研究进展［Ｊ］．安徽农 业科学，２００９，３７（２１）：９８６１—９８６２ ［５ｊ徐静，于红霞．牡蛎提取物的生物活性研究进展ＩＪＪ．中国公共卫 生，２００７，２０（１ １）：１３９５—１３９７ ［６］李超柱，潘珍凤，陈艳辉，等．牡蛎软体活性物质的研究进展［ＪＪ．食 品工业科技。２０１２，３３（８）：４１２—４１５ ［７］刘政，刘莹，王丽威，等．生物活性肽的酶法制备［Ｊ１．化学与生物工 程．２００５（３）：７—９ ［８］于娅，杨瑞金，王璋．牡蛎功能短肽的制备及ＡＣＥ抑制活性『Ｊ１＿无 锡轻工大学学报，２００４，２３（２）：４９—５２ ［９］冯晓梅，韩玉谦，赵志强，等．牡蛎活性肽的制备及其理化性质的 初步研究ｆＪ１＿中国海洋药物杂志，２００６，２５（４）：２２—２５ 【ｌＯ】余杰，杨振国，陈美珍，等．牡蛎活性肽体外诱导ＨｅＬａ细胞凋亡及 其作用机制ｆＪ１＿食品科学，２０１２，３３（２１）：２９０～２９４ 【１ １１欧成坤，杨瑞金．牡酶解产物的ＡＣＥ抑制活性和清除自由基活性 研究ＩＪＪ．食品工业科技，２００５，２６（３）：５９—６２ ［１２］汪秋宽，宋琳琳，徐玲，等．牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究【Ｊ】． 大连水产学院学报，２００９，２４（４）：９５—９９ 『ｌ３１周敏华，章超桦，曾少葵，等．酶解牡蛎肉制备高Ｆ值寡肽的研究 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