高效液相色谱法

高效液相色谱法

Newly compiled on November 23, 2020

第十八章 高效液相色谱法

15.外标法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷含量：色谱柱为Zirchrom C8柱（20cm×，5um）；流动相为乙腈-甲醇-水（含%三乙胺，磷酸调）（28：18：54）；以黄芩苷对照品配成浓度范围为～ml的对照品溶液。进样，测得黄芩苷峰面积，以峰面积和对照品浓度求得回归方程为：A=××103，r=.精密称取黄芩颗粒，置于50ml量瓶中，用70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取1ml于10ml量瓶中，30%甲醇定容到刻度，摇匀即得供试品溶液。平行测定供试品溶液和对照品溶液（ml），得峰面积分别为4250701，5997670.

解：

c样c标50c样10250701100%17.4%  w%0.125561.85997670A标A样c样/1016．校正因子法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量：ODS色谱柱；甲醇-水（60：40）流动相；检测器UV280nm；对硝基甲苯为内标物。

（1）校正因子的测定：取对硝基甲苯（内标物）、炔诺酮和炔雌醇对照品适量，用甲醇制成10ml溶液，进样10ul，记录色谱图。重复三次。测得含ml内标物、ml炔诺酮和ml炔雌醇的对照品溶液平均峰面积列于表18-6。

（2）试样测定：取本品20片，精密称定，求出平均片重（片）。研细后称取（约相当于炔诺酮），用甲醇配制成10ml供试品溶液（含内标物ml）。测得峰面积列于表18-6。

表18-6 复方炔诺酮片中各成分及内标物平均峰面积（uv·s）

对照品溶液 供试品溶液 解：f醇炔诺酮 ×10×106 炔雌醇 ×105 内标物 ×105 6 ×10 5×10 5m醇/A醇ms/As0.03510/(1.043105)0.073310/(6.58710)53.02

试样含炔雌醇的量：

m醇f醇msA醇As3.020.0733101.3871056.8411050.449(mg)

每片含炔雌醇的量：

0.44960.3(0.0369mg/片) 732.817．测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱的含量，称取内标物、黄连碱和小檗碱对照品各0.2000g配成混合溶液。测得峰面积分别为, 和4.04cm2。称取0.2400g内标物和试样0.8560g同法配制成溶液后，在相同色谱条件下测得峰面积为, 和4.54cm2。计算试样中黄连碱和小檗碱的含量。

解：f黄m黄/A黄ms/AsAs3.601.05 A黄3.4318．计算在反相色谱中甲醇－乙腈－水（60:10:30）的强度因子。如果改用四氢呋喃－甲醇－水，水的含量不变，为了保持相同的洗脱强度，甲醇的比例是多少

解：S混S甲甲＋S乙乙＋S水水3.00.60＋3.20.10＋00.302.12 设改换溶剂后，甲醇的比例为x，则 x = = %

19．用15cm长的ODS柱分离两个组分。柱效n=×104m–1；测得t0=；组分的

tR14.10min；tR2=。(1)求k1、k2、α、R值。(2)若增加柱长至30cm，分离度R可否达

解：(1) k12R1tR1't0tR1t0t04.101.312.13

1.31 (2) 由

R22L11.020.15，则2 R2 = (达不到 L20.30R2