５６ ・实验研究・ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１ ５，Ｖｏ１．１ ３，Ｎｏ．５ 原子荧光光谱法测定五味丹草片中砷的不确定度评定 赵昱玮 ＇。 南敏伦 ＇ 吕 娜 方向明 赫玉芳 于敏 赵全成 （１吉林省中医药科学院，吉林长舂１３００１２；２吉林农业大学，吉林长春１３０１１８，３长春理工大学，吉林长春１３００２２） 【摘要】目的建立原子荧光光谱法测定五味丹草片中砷的不确定度评定的方法。方法分析影响不确定度测量的主要因素，获得不确定度 评价结果。结果消化过程和重复性试验是影响测量结果不确定度的主要因素，样品称样量及定容过程产生的不确定度较小，对测量结果 无明显影响。对合成不确定度进行计算，当五味丹草片中砷质量浓度为Ｏ．１２７ ｇｇ／ｇ时，扩展不确定度为０．０７７６ ∥ｇ ＝２）。结论不确定度 主要来源于消化过程、重复性试验 标准曲线线性拟合、标准曲线绘制、标准溶液配制过程。 【关键词】原子荧光法；五味丹草片；砷；不确定度；评定 中图分类号：Ｒ２８２．７１０．５ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７１—８１９４（２０１５）０５—００５６—０３ 砷是一种以有毒而著名的类金属，并有许多的同素异形体。砷元 １．６测试原理：试样经湿消解后，加入硫脲使五价砷预还原为三价砷， 素广泛的存在于自然界，砷及其化合物已被国际癌症机构确认为致癌 再加人硼氢化钠使还原生成砷化氢，由氨气载人原子化器中分解为原 物；砷是食品中的有害元素，是重要的食品、卫生检测项目，各个国 子态砷，在砷空心阴极灯的发射光激发下产生原子荧光，其荧光强度 家对食品中的砷都有严格的限量要求”】，国家标准《ＧＢ １６７４０—１９９７保 在固定条件下与被测液中的砷浓度成正比，与标准系列比较定量。 健（功能）食品通用标准》对保健（功能）食品中有害金属及有害物质进 ２结果与分析 行了限定，其中规定砷的限量为０Ｉ３ ｍｇ／ｋｇ口］。五味丹草片是以吉林省 ２．１数学模型： 一试样中砷的含量（ｐ．ｇ ｇ）；ｃ－测定 道地药材五味子及葡萄籽为主要原料，配伍以积雪草和丹参开发而成 的具有自主知识产权的保健食品，具有明显地降低酒精性肝损伤的作 用试液中砷的质量浓度（ｎｇ／ｍＬ）；ＣＯ－试剂空白液中砷的质量浓度（ｎｇ／ 用。五味丹草片中砷的含量是保证食品安全不可或缺的重要检测指标 ｍＥ）；Ｖ－试样定容体积（ｍＬ）；１１７一试样质量（ｇ）。 ２．２不确定度因素分析：结合数学模型及样品处理过程可知，测定五 之一。 测量不确定度简称不确定度，是根据所用到的信息，表征赋予被 味丹草片中砷的含量，引起不确定度的因素主要包括样品的称量、前 处理、标准溶液的配制、标准曲线的拟合、测量重复性等。 测量量值分散性的非负参数 ，是测量结果质量的衡量尺度。通过评 ２．３不确定度评定 定测量不确定度可以分析影响测量结果的主要因素、评价分析测试方 ２．３．１标准物质的不确定度评定：标准物质的不确定度主要包括标准 法，从而提高分析测试结果的质量。 储备液的配制、稀释过程、移液管、容量瓶体积带来的不确定度。 本文依据ＪＪＦ １１３５—２００５《化学分析测量不确定度评定 】，对原 ２．３．１．１标准储备液的配制不确定度评定：砷标准储备液（ＧＢＷ０８６１１）， 子荧光光谱法测定五味丹草片中砷的不确定度进行分析和评定。 质量浓度（１０００±１）“ｇ／ｍＬ ＝３），则砷标准储备液的标准不确定度 １材料与方法 为： １．１材料与试剂：五味丹草片，自制。、高氯酸、硫脲、硼氢化 （ｐ）＝ ＝ｊ； ＝０．３３×１０。 钠、硫酸（均为优级纯），北京化工厂；水为自制超纯水；砷标准溶液 （标准值为１０００ Ｉｘｇ／ｍＬ，ＧＢＷ０８６１１），中国计量科学研究院。 ２．３．１．２稀释过程引入的不确定度评定：用１ ｍＬ移液管吸取１．０ ｍＬ砷标 １．２仪器与设备：ＡＦＳ一８２２０型原子荧光分光光度计（砷空心阴极灯）， 准储备液，置于１００ ｍＬ容量瓶（Ａ级）中，用水定容至刻度，制成质量 北京吉天；ＡＬ２０４电子分析天平；梅特勒一托利多；ＥＨ３５Ａ ＰＬＵＳ微控 浓度为１０．０“ｇ／ｍＬ的砷标准使用液；再用５ ｍＬ移液管吸取制成的质量 数显电热板；莱伯泰科、Ｄｉｒｅｃｔ—Ｐｕｒｅ ＵＰ超纯水及ＲＯ纯水机；上海乐 浓度为１０．０ ｐ．ｇ／ｍＬ砷标准溶液置于１００ ｍＬ容量瓶（Ａ级）中，用水定容至 枫。环境条件：温度（２０±３）℃、湿度（７５土５）％。 刻度，制成质量浓度为０．５￣ｍｇｍＬ砷标准使用液。 １．３测定依据：按ＧＢ／Ｔ ５００９．１１—２００３《食品中总砷及无机砷的测定》 】 ２．３．１．２．１移液管导致的不确定度评定 氢化物原子荧光光度法测定五味丹草片中砷的含量。 ２．３．１．２．１．１根据ＪＪＧ１９６—２００６Ⅸ玻璃仪器检定规程》，规定１ ｍＬ移液管 １．４样品处理：取五味丹草片，研细，取０．５ ｇ，精密称定，加 吸取１．０ ｍＬ时容量允差为士０．００８ ｍＬ、５ ｍＬ移液管吸取５．０ ｍＬ时容量 ２０ ｍＬ，硫酸１．２５ ｍＬ，摇匀，放置过夜，进行湿法消解，消解后用水 允差为士０．０２５ ｍＬ，容量允差包括体积校准、充满液体至移液器刻度 转入２５ ｍＬ比色管中，加入（１十９）硫酸１２．５ ｍＬ，质量浓度为５０ ｇ几的硫 的变动性（重复性）、人员读数，取矩形分布： ０鬈．００８ 脲２．５ ｍＬ，补加水至刻度，？昆匀，上原子荧光光度计测定。 “（ｖ移１）＝＝４．６２×１０一 ｍＬ ｘｌ １．５仪器条件：光电倍增管电压：２７０Ｖ；砷空心阴极灯电流：６０ｍＡ； ０ 瑶．０ ２５ １１２１１＇１；氩气流速：载气３００ ｍＬ／ｍｉｎ；测量方式：浓度直 Ｈ（ ＃２）＝＝原于化器高度８ ２．８９×１０～ｍＩ ，× ， 读；读数方式：峰面积，读数延迟时间：１ Ｓ；读数时间：１０ Ｓ；标液 ２．３．１．２．１ ２温度带来的不确定度（假设３℃差异）。水的膨胀系数为２．１ 或样液加人体积：０．５ ｍＬ。 ×１０ ，Ｐ－－０．９５，３℃差异，则温度引起的不确定度： 体啾 化Ｖ×液体 鳇长系数×ＡＴ “（ｖ移３】＝ 基金项目：吉林省医药产业发展专项资金项目（２０１ ３０７２７０８６ＹＹ） 露 １ ９６ 通讯作者：Ｅ—ｍａｉＪ：ｈｙｆ＿１ ９９２＠１ ６３．Ｃ０ｍ 叠＝０３２×１ｏ一，ｍＬ ｉ ９６ ．…— ２０１５年２月第１３卷第５期 ・实验研究・ ５７ 表１标准曲线测定结果 “ 糯 受化ｌ－ ｘ液髂麟滕糸毅×４７ （ｖ 一… …一… …… ２．３．２．２标准曲线线性拟合带来的不确定度评定：标准曲线拟合的标准 ２．１ ￣１０３不确定度是通过对分别对标准系列测量获得，标准曲线的测量结果见 ～一 …＝１．６１×１０一 ｍＬ 表１。标准曲线共５个点，用最小二乘法拟合标准曲线，得线性方程为 １ ｍＬ移液管带来的相对合成不确定度： ｙ＝２３０．６１４５ｌ 一８４．６５７，相关系数为ｒ＝Ｏ．９９９５。（截距ａ一８４．６５７，斜率 ‰＃一 “１）一 ＿：趣 （…０．３…２￣～Ｉ ＝４化Ｈｖ移 －一 ｌ６３×１００３ Ｕ一ｂ＝２３０．６１４５）。 —叶・． ＾ ３ ５ ｍＬ移液管带来的相对合成不确定度： 曲线拟合引入的标准不确定度计算公式为： “嘶 ＝ ＝ 一：０．６６×１０。 ２．３．１．２．２容量瓶体积带来的不确定度评定 ２．３．１．２．２．１ ＪＪＧ１９６—２００６《常用玻璃量器》规定，２０℃时１００ ｍＬ容量 式中ｓＲ为标准溶液响应信号残差的标准差 瓶（Ａ级）的容量允差为±０．１０ ｍＬ，取矩形分布，则容量瓶体积带来的 Ｓ 不确定度评定： 口 为样品的测定次数，６；ｎ２为标准溶液的测定次数，１０； 为样 。）＝ ＝ ＝０．０５７７ｍＬ ２．３．１．２．２．２温度引起的不确定度评定。水的膨胀系数为２．１ Ｘ １０一， 一 ｆ ； 品中砷的平均质量浓度，ｘ＝１２７ ｎｇ／ｒ ｇ；为标准溶液质量浓度的平均 值； 参与拟合的每一标准溶液的质量浓度； 为标准系列溶液中对应 Ｐ＝－０．９５，３℃差异，则温度引起的不确定度： 一瞬～ ｍ 的不同溶液吸光值。０ 搿 体 瘦化 渡阵澎朦系数ｘＡＴ 一 ｝＾ Ｚ 簟痢 …一……— 一…… ～瓤 ～ ＝１．２８ ｎｇ ～ 一 旦 ！ ：！－－０．０３２ｍＬ 标准曲线带来的相对标准不确定度为： Ｉｆｘ， １．２８ ｎｇ／１２７ ｎｇ－－０．０１０１ ２－３．１．２．２－３定容过程引入的合成不确定度评定。定容过程中，容量允 ２．３．３称量过程引入的不确定度评定：称量准确至０．０００１ ｇ，根据《化 差和温度引入的合成定度为： 学分析中不确定度的评估指南＊，该准确级的天平的最大允差是士 ｕ（ 定】 Ⅷ～ ０∞ｓ７７：｛０ ０３２ ＝０．０６６ ｍＬ ｏ．ｏ００５ ｇ，按均匀分布，则ｕ㈤： ： ：０．０００２８９ ｇ 定容引起的相对不确定度： 称取０．５ ｇ五味丹草片由天平引起的相对不确定度为： 蹩 ＝ ＝０．６６ ｘ １０。３ ）＝ ７８×１ｏ。 综上所述，标准系列溶液配制过程中引入的相对不确定度为： ２．３．４样品处理操作过程产生的不确定度评定：样品处理操作过程产 ／／ｒｅｌ（ｅ标）＝ ，ｊ ｛“ ＃ ， ｊ抻 ｛｝ ２ｕ ｊ ＝ 生的不确定度主要包括样品消化过程、重复性测量的不确定度。 ￣ｉ（０．３３ｘｌ０ ）！ ｉ４．６ｘＩｏ ）：ｖ｛０．６６ｘｌ ４－２静砸 ｌｆＪ ｝ ＝４．７５×１０一 ２．３．４．１样品消化过程产生的不确定度评定：由于样品？肖化不完全或消 ２－３．２标准曲线带来的不确定度评定：标准曲线带来的不确定度主要 化过程中导致砷的损失或污染及消化液转移过程中的损失等，使五昧 包括标准曲线测定、标准曲线拟合带来的不确定度。 丹草片中砷不能１００％进入到测定液中，采用加标回收的方法进行测 ２．３．２．１标准曲线测定带来的不确定度评定。砷标准曲线制备：Ｉ［７，２５ ｍＬ 定，测得砷的加标回收率分别为９６．９９％、９７．０６％、９７．９２％、９６．５１％、 容量瓶５个，依次准确加入质量浓度为０．５￣ｔｇ／ｍＬ的砷标准使用液０．１、 １００．０６％、１０１．７％，平均回收率为９８．４６％，ＲＳＤ为２．１９％。 ０．２、０．３、０．４、０．５ ｍＬ，各加（１＋９）硫酸１２．５ ｍＬ，质量浓度为５０ ｇ几的 样品加标回收率的不确定度按ＪＪＦ１０５９—２０１２《测量不确定度评定 硫脲２．５ ｍＬ，补加水至刻度，混匀，测定吸光值，绘制标准曲线。 与表示》计算： 标准曲线配制过程中使用的玻璃量具，按照ＪＪＧ１９９６—２００６《常 ｕ 、： 曼｝ ：，； ｆ｝｛ｌ＾： ｌｌｊｌ１ ： ” ：０．０２］２ 用玻璃量器检定规程》规定，０．５ ｍＬ移液管、５ ｍＬ移液管、２５ ｍＬ移 ６ ６ ２．３．４．２重复性带来的标准不确定度及相对标准不确定度评定：在重复 液管、２５ ｍＬ容量瓶的容量允差分别为±０．００５ ｍＬ、±Ｏ．０２５ ｍＬ、± ０．１０ ｍＬ、士Ｏ．００３ ｍＬ，取矩形分布，则此带来的不确定度分别为２．８９ 性测定条件下，对五味丹草片进行６次测试，测得砷的质量浓度 ×１０一ｍＬ、１４．４３×１０～ｍＬ、５７．７４×１０一ｍＬ、１．７３ Ｘ１０一ｍＬ；温度弓Ｉ 分别为：０．１３、０．１２、０．１３、０．１４、０．１２、Ｏ．１２ ｇｇ／ｇ，则砷的平均含量 起的不确定度分别为０．１６×１０一ｍＬ、１．６１×１０。ｍＬ、８．０５×１０。。ｍＬ、 为０．１２７￣ｔｇ／ｇ。 标准不确定度采用平均值的标准偏差为： ８．０５ Ｘ １０～ｍＬ；相对不确定度ｕ ｒｅｌ ５１＝５．７８ Ｘ １０一、Ｕｒｃｌ（５）＝２．９０×１０～、 ｇ：一— ； ”Ｕｒ￣ｌ（２５）＝２．３３×１０～、／／ｔｅｌ（２５）＝０．３３ Ｘ １０～。 ＝３．３４ ｘ １０－３￣ｔｅ，ｓ 相对标准不确定度 ，… 一一 ；一 … … … 相对标准不确定度为：／／， ＩｆＡｆ＝３．３４×１０一／０．１２７＝０．０２６３ “（郴） ０§“峨㈣ ＋５ｕ 。‘５ｕｍ ５ｕ ２．３．５定容过程产生的不确定度评定：定容过程产生的不确定度主要 包括容量允差、温度、定容过程引入的不确定度。 ５８ ・实验研究・ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１ ５，Ｖｏ１．１ ３，Ｎｏ．５ 吉日木松汤的薄层色谱鉴别 乌丽雅苏 （内蒙古阿拉善盟食品药品化妆品检验检测中心，内蒙古巴彦浩特７５０３０６） 【摘要】目的建立吉日木松汤薄层色谱鉴别方法。方法以脯氨酸对照品及锁阳、甘草次酸及甘草作为对照，采用ＴＬＣ鉴别方法。结 果该方法提取完全，斑点清晰，分离理想。经空白试验证明：其他味药对结果无干扰。结论吉Ｅｌ木松汤中锁阳和甘草的薄层鉴别实验操 作简便，无阴性干扰，重现性好，斑点清晰，专一性强，结果满意，可以作为蒙药吉日木松汤的薄层鉴别方法。 【关键词】吉Ｅｌ木松汤；薄层色谱法；锁阳；甘草 中圈分类号：Ｒ２８２．７１０．３ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１６７１—８１９４（２０１５）０５—００５８—０２ 占日木松汤为用于健胃，止反酸，呕吐，尤其用于妊娠呕吐的复 方制剂。该方为汤剂剂型，处分由粳米，甘草，锁阳，冰糖四味药组 成。处方中除了粳米（制）、冰糖外，其余二味药材均在《中国药 典 ２００５年版～一部有收载。 为提高民族药的内在质量，建立了吉日木松汤中锁阳和甘草的薄 １．５吉日木松汤生产厂家为阿拉善盟额济纳旗中蒙医院（批号： ２００５１１２５、２００５１１２９、２００６０３１８）。 ２方法与结果 ２．１ Ａ．锁阳薄层鉴别…：溶液的制备。 ２．１．１对照品溶液的制备以及ＴＬＣ实验。 ２．１．２对照品溶液的制备：取脯氨酸对照品适量，加水制成每１ ｍＬ含 ２ Ｉ－ｔＬ的溶液，摇匀，即得。 层鉴别的方法。该法操作简便，无阴性干扰，重现性好，斑点清晰， 专一性强，结果满意，为该制剂的质量提供了准确的测定方法。 １仪器与试剂 ２．１．３对照药材溶液的制备：取锁阳对照药材ｌ ｇ，加水１０ ｍＬ，浸渍 ３０ｒａｉｎ，滤过，取滤液即得。 ２．１．４供试品溶液的制备，取本品粉末５ ｇ，加水ｌ０ ｍＬ，浸渍３０ ｍｉｎ， 滤过，即得。 １．１仪器：ＤＧ２０—００２台式干燥箱，ＳＬＤ—Ｉ型薄层显色喷雾泵。 １．２试剂：硅胶Ｈ（青岛海洋华工厂产品）其他试剂均为分析纯薄层 板（１０ ｃｍ×２０ ｃｍ，自制，含０．５％ｃｍｃ—Ｎａ）。 １．３脯氨酸对照品（批号１１１６５９—２００３０１）购自中国药品生物制品检 定所。 ２．１．５ ＴＬＣ实验：取对照品溶液，对照药材溶液，供试品溶液：分别吸 取上述溶液各５ Ｌ，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶Ｈ薄 层板上，以正丙醇一冰醋酸一乙酸一水（４：１：１：２）为展开剂，展 开，取出，晾干，喷以吲哚醌试液，晾干，在１００℃加热至斑点显色 １．４ Ｈ 草次酸对照品（批号１１０７２３—２００３１０）购自中国药品生物制品检 定所。 ２．３．５．１容量允差。ＪＪＧ１９９６－２００６《常用玻璃量器检定规程》规定，２５ ｍＬ Ａ级容量瓶在２０℃时的容量允差为±０．０３０ ｍＬ（体积校准、重复性、人 员读数）。取矩形分布，则此带来的不确定度为： ”采用原子荧光分光光度计对五味丹草片中砷的含量进行测定，当 称样量为０．５ ｇ时，测得的含量为（Ｏ．１２７±０．０７７６）ｐ＿ｇ／ｇ（ｋ－２）。 结合测定过程中各引起不确定度的因素对总不确定度的影响， 可以看出，不确定度主要来源于消化过程、重复性试验、标准曲 线线性拟合、标准曲线绘制、标准溶液配制过程，样品在消化过 程对测量结果不确定度评价结果影响最大，其次是重复性检测过 程中的检测引起的不确定度，称量及定容过程带来的不确定度可 “（ 。）＝＝ ＝ ＝０．０１７３ ｍＬ ２．３ ５．２温度引起的不确定度：水的膨胀系数为２．１×１０ ，Ｐ＝０．９５，３℃ 差异，则温度引起的不确定度： ， “（ｖ定２）＝ ＝ ； ｊ ＝ 篷ｇ 搿 蠢粥鼗一 蛳 ＝ ’｛ｒｌ ｉ 以忽略不计。 “。。０．００８０４ｍＬ ｌ９ｎ 参考文献 【１】宋洪强，郝云杉，吴益舂，等．原子荧光光度法中湿法消解、微波 ２．３．５．３定容过程引入的合成不确定度。定容过程中，容量允差和温度 引入的合成不确定度为： ／／（ｖ￣】＝ ．｛｛ｌ？ 哪 Ｏ．０１９１ ｍＬ 消解、干灰化前处理法测定水产品中总砷含量的比较［Ｊ］．浙汀 海洋学院学报（自然科学版），２０１０，２９（４）：３６７—３７２． ［２】国家质量监督检验检疫总局．ＧＢ １６７４０—１９９７保健（功能）食品通 用标准［ｓ］．北京：中国标准出版社，１９９７． ［３】国家质量监督检验检疫总局．ＪＪＦ１０５９，１－２０１２测量不确定度评定 与表示（ｓ】．北京：中国计量出版社，２０１２． ｎ ‰ 定容引起的相对合成不确定度为： “ ” ＝“＝“（ ）＝０．７６４×１０。 ２．４合成相对标准小确定度。根据计算公式合成各不确定度分量后， 合成相对标准不确定度为： “ｆｅｌｆｘ１ ∥ 。 ［４］国家标准物质研究中心．ＪＪＦ１１３５—２００５化学分析测量不确定度 ｝ｔｔ ＝０．０３８８ ｄ 、 － － ㈨ ｌ… ＂ ｛． ｝蛳”ｊ 评定［ｓ］．北京：中国计量出版社，２００５． ［５］ 中华人民共和国卫生部．ＧＢ／Ｔ ５００９．１１－２００３食品中总砷及尢机 砷的测定ｉｓ］．北京：中国标准出版社，２００３． ２．５扩展不确定度：取包含因子ｋ－２（９５％置信概率）；Ｕｃ＝２×￡， －０．０７７６ ３结论与讨论
