准备实验材料：双报告基因实验系统。CHOK1细胞。Fugene高效转染试剂。6孔组织培养板。96孔平底底透白色TC处理板。光学放大的封膜。SpectraMax i3x多功能微孔板读板机及其注射器卡盒。进行酶标准曲线实验：配制萤火虫和海肾荧光素酶的工作液和标准品。准备双荧光素酶检测试剂。使用这些试剂冲洗注射器卡盒，并进行加液
非脂质体的脂质：革新配方成分形成胶束结构而非简单的双层膜结构，令核酸传递更有效率而且细胞毒性也显著降低。能够转染各种贴壁细胞，也可用于悬浮细胞，毒性较阳离子脂质体更小。目前，Qiagen的Attractene系列试剂，Roche的FuGENE 6都是非脂质体型的脂质分子类转染试剂。2. 物理介导法 电转染：也叫细胞电...
1、先将细胞接种到细胞培养板，细胞汇合度在70%左右，再进行转染。2、复合物制备：将质粒DNA与Zeta Life Advanced Transfection Reagent AD600050转染试剂按照1:1（12ug:12ul）关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟。3、将复合物加入完全培养基的细胞培养板，并轻轻混匀，放入...
一般而言，插入片段长度增加会导致转染效率降低，而转染效率与质粒转染量在一定范围内呈正相关。确保高质量DNA的提取与纯化对于提高转染效率至关重要。选择适合的转染试剂，考虑高效与低毒原则，如在绵羊成纤维细胞中使用FuGene HD，在小鼠胶质细胞中使用GenEscortTM I。转染效率与质粒/转染试剂比值在一定范围...
3、转染试剂的选择：转染试剂将外源核酸片段导入细胞，影响内源基因表达水平。在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂，例如在绵羊成纤维细胞转染过程中FuGene HD的转染效率更高，GenEscortTM I对小鼠胶质细胞则具有更好的转染效果。总之，可以遵循高效、低毒等原则进行选择。4、质粒与转染...
五、转染策略选择 对于普通细胞，化学介导是首选。 对于难转染细胞，考虑使用电转或病毒转染。 优化转染条件，关注细胞状态和培养环境，确保转染效率。在进行转染实验时，建议根据具体实验需求和细胞类型选择合适的转染方法和试剂，并遵循相关操作指南和注意事项，以确保实验的成功和安全。
我后期会进一步摸索此条件）。4、转染24小时后对细胞进行正常换液。5、质粒DNA转染48小时后荧光检测转染效率 三、注意事项：1细胞培养基：Zeta Life胎牛血清z7181-500，Gibco DMEM;2本转染方法不适用在下面转染试剂的转染如：lipo3000、,FuGENE 6、FuGENE HD、Effectene等；
